單向擴散試驗有下列影響因素:
① 抗血清的親和力、特異性、及效價。要求親和力強,特異性好、效價高。注意存放的方法,防止效價下降。
② 標(biāo)準(zhǔn)曲線必須在每次測定時同時制作,絕不可一次作成,長期應(yīng)用。
③ 測定時必須加測質(zhì)控血清,以保證定量的準(zhǔn)確性。
④ 有時出現(xiàn)擴散環(huán)呈現(xiàn)兩重的雙環(huán)現(xiàn)象,這是出現(xiàn)了抗原性相同的兩個組分,其擴散率不同,例如α重鏈病血清中出現(xiàn)的α重鏈和正常的 IgA兩種成分并存,皆與抗IgA 抗體發(fā)生反應(yīng),就形成內(nèi)外兩重環(huán)。
⑤ 在單擴試驗時,有時回出現(xiàn)結(jié)果與真實含量不符,這主要出現(xiàn)在 Ig 測定中醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。如用單克隆抗體或骨髓瘤純抗原免疫動物獲得的抗血清,都存在單一結(jié)合價的現(xiàn)象,若用此作為單擴試劑測量正常人的多態(tài)性抗原,則抗體相對過剩,是沉淀圈直徑變小,測量值降低。
⑥ 測得假陽性升高現(xiàn)象與上面相反,如用多克隆抗體測定單克隆病,則抗原相對過剩(單一抗原決定簇) ,致使沉淀圈呈不相關(guān)擴大,從而造成某一成分的偽性增加。