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常規(guī)免疫檢測技術(shù)是臨床醫(yī)學檢驗主任醫(yī)師考試涉及的知識點,醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理了相關(guān)資料以便大家更好地復習。
(一)皮內(nèi)試驗
宿主在病原體刺激后,體內(nèi)產(chǎn)生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應抗原結(jié)合后,肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性物質(zhì),引起注射抗原的局部皮膚出現(xiàn)皮丘及紅暈醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理,以此便可判斷體內(nèi)是否某有種特異性抗體存在。
(二)免疫擴散和免疫電泳
1.免疫擴散于 一定條件下,抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇,在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉淀。本法有兩種類型:
①單相免疫擴散:將一定量的抗體混入瓊脂凝膠 中,使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環(huán),其大小與抗原量成正比;
②雙相免疫擴散:將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置,二者可自由擴散并在中間形成沉 淀線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體,也可用已知抗體檢測未知抗原。
2.免疫電泳是將免疫擴散與蛋白質(zhì)凝膠電泳相結(jié)合的一項技術(shù)。事先將抗原在凝膠板中電泳,之后在凝膠槽中加入相應抗體,抗原和抗體雙相擴散后,在比例合適的位置,產(chǎn)生肉眼可見的弧形沉淀線。
(三)間接紅細胞凝集試驗
以紅細胞作為可溶性抗原的載體并使之致敏。致敏的紅細胞與特異性抗體結(jié)合而產(chǎn)生凝集,抗原與抗體間的特異性反應即由此而顯現(xiàn)。常用的紅細胞為綿羊或O型人紅細胞。
(四)間接熒光抗體試驗
vvv本 法用熒光素(異硫氰基熒光素)標記第二抗體,可以進行多種特異性抗原抗體反應,即可檢測抗原又可檢測抗體。本法具有較高的敏感性、特異性和重現(xiàn)性等優(yōu)點, 除可用于寄生蟲病的快速診斷,流行病學調(diào)查和疫情監(jiān)測外,還可用于組織切片中抗原定位以及在細胞和亞細胞水平觀察和鑒定抗原、抗體和免疫復合物。
(五)對流免疫電流試驗
對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質(zhì)的一種快速,敏感的電泳技術(shù)。既可用已知抗原檢測抗體,又可用已知抗體檢測抗原。反應結(jié)果可信度高,適用范圍廣。以本法為基礎改進的技術(shù)有酶標記抗原對流免疫電泳和放射對流免疫電泳自顯影等技術(shù)。二者克服了電泳技術(shù)本身不夠靈敏的弱點。
(六)酶聯(lián)免疫吸附試驗
vvv酶聯(lián)免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結(jié)合,使其保持免疫反應和酶的活性。把標記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結(jié)合,再使之與相應的無色底物作用而顯示顏色,根據(jù)顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定結(jié)果。
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