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甲型肝炎病毒病毒感染模型與培養(yǎng)

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(一)甲型肝炎病毒形態(tài)與結(jié)構(gòu)

病毒呈球形,直徑約為27nm。無(wú)囊膜。衣殼由60個(gè)殼微粒組成,呈20面體立體對(duì)稱,有HAV的特異性抗原(HAVAg),每一殼微粒由4種不同的多肽即VP1、VP2、VP3和VP4所組成。

在病毒的核心部位,為單股正鏈RNA。除決定病毒的遺傳特性外,兼具信使RNA的功能,并有傳染性。

HAV的單股RNA,其長(zhǎng)度相當(dāng)于7400個(gè)核苷酸。在RNA的3′末端有多聚的腺苷序列,在5′末端以共價(jià)形式連接一由病毒基因編碼的細(xì)小蛋白質(zhì),稱病毒基因組蛋白(Viral protein ,genomic,VPG)。

它在病毒復(fù)制過(guò)程中,能使病毒核酸附著于宿主細(xì)胞的核蛋白體上進(jìn)行病毒蛋白質(zhì)的生物合成。

(二)甲型肝炎病毒病毒感染模型與培養(yǎng)

黑猩猩和狨猴對(duì)HAV易感,且能傳代,經(jīng)口或靜脈注射可使動(dòng)物發(fā)生肝炎,并能在肝細(xì)胞凍中檢出HAV。在潛伏期和急性期的早期,HAV可隨糞便排出?;謴?fù)期血清中能檢出HAV的相應(yīng)抗體。

1979年P(guān)rovost 等首次成功地將已適應(yīng)在狨猴傳代的毒株培養(yǎng)于原狨猴肝細(xì)胞或恒河猴胚腎細(xì)胞FPhK6株中。我國(guó)學(xué)者也先后成功地使HAV在肝癌細(xì)胞株中增殖。病毒在組織培養(yǎng)細(xì)胞中雖可增殖。但不引起細(xì)胞病變,且增殖與細(xì)胞釋放均甚緩慢。應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn),可檢出組織細(xì)胞中的HAV,亦可用放射免疫方法,自細(xì)胞溶解物中檢出HAV。

(三)抵抗力

初步實(shí)驗(yàn)證明,HAV對(duì)乙醚、60℃加熱1小時(shí)及pH3的作用均有相對(duì)的抵抗力(在4℃可存活數(shù)月)。但加熱100℃5分鐘呈用甲醛溶液、氯等處理,可使之滅活。非離子型去垢劑不破壞病毒的傳染性。

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