臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試：《答疑周刊》2016年第36期：

問題索引：

一、「問題」什么是過氧化物酶染色？

二、「問題」什么是中性粒細胞堿性磷酸酶染色？

三、「問題」什么是非特異性酯酶染色？

四、「問題」什么是糖原染色？

具體解答：

一、「問題」什么是過氧化物酶染色？

「解答」血細胞中的過氧化物酶（POX）能分解試劑中的底物H2O2，釋放出新生態(tài)氧，使無色聯(lián)苯胺氧化為藍色聯(lián)苯胺，后者與亞硝基鐵氰化鈉結合形成藍黑色的顆粒，沉著于細胞質(zhì)中。胞質(zhì)中無藍黑色顆粒者為陰性反應，出現(xiàn)細小顆粒、分布稀疏者為弱陽性反應，顆粒粗大而密集者為強陽性反應。主要用于急性白血病類型的鑒別。急性粒細胞白血病時，白血病細胞多呈強陽性反應，急性單核細胞白血病時呈弱陽性或陰性反應，急性淋巴細胞白血病呈陰性反應。

二、「問題」什么是中性粒細胞堿性磷酸酶染色？

「解答」堿性磷酸酶主要存在于成熟階段的中性粒細胞，其他細胞均呈陰性反應。陽性反應為胞質(zhì)中出現(xiàn)灰色到棕黑色顆粒，反應強度分為5級，即"-、1+、2+、3+、4+".反應結果以陽性反應細胞百分率和積分值來表現(xiàn)。血涂片染色后在油鏡下觀察100個成熟中性粒細胞，陽性反應細胞所占百分率即為陽性率。對所有陽性反應細胞逐個按反應程度分級，將各級所占的百分率乘以級數(shù)，然后相加，即為積分值。成人NAP陽性率10-40%，積分值40-80分。由于各實驗室條件不同，參考值也有差異。急性化膿性感染活性增高，病毒性感染時活性正?；驕p低；慢性粒細胞白血病活性明顯減低，積分值常為0，類白血病反應是活性極高；急性粒細胞白血病時積分值減低，急性淋巴細胞白血病積分值多增高，急性單核細胞白血病是一般正?；驕p低；再障時活性增高，PNH時活性減低。

三、「問題」什么是非特異性酯酶染色？

「解答」α-醋酸萘酚酯酶又稱非特異性酯酶（NSE），能將基質(zhì)液中的α-醋酸萘酚水解，產(chǎn)生α-萘酚，再與重氮染料偶聯(lián)，形成不溶性的有色沉淀，定位于胞質(zhì)內(nèi)。胞質(zhì)中出現(xiàn)有色沉淀為陽性反應，此酶主要存在于單核系細胞中，原單核細胞為陰性反應或弱陽性反應，由單核細胞和單核細胞為陽性反應，粒系細胞一般為陰性或弱陽性反應，淋巴細胞一般為陰性反應。所以急性單核細胞白血病細胞呈強陽性反應，但單核細胞中的酶活性可被氟化鈉抑制，故在進行染色，常同時被氟化鈉抑制試驗。急性粒細胞白血病是呈陰性反應或弱陽性反應，但陽性反應不被氟化鈉抑制。

四、「問題」什么是糖原染色？

「解答」糖原染色又稱過碘酸-Schiff反應（PAS），過碘酸能將血細胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基，醛基與Schiff液中的無色品紅結合，形成紫紅色化合物，定位于胞質(zhì)內(nèi)。胞質(zhì)中出現(xiàn)紅色者為陽性反應，陽性反應物可呈顆粒狀、小塊狀或彌漫均勻紅色。PAS的陽性程度通常以強陽性、陽性、弱陽性和陰性來表示。也有用陽性百分率和積分值來表示。紅血病或紅白血病時幼紅細胞呈強陽性反應；急性粒細胞白血病時，原粒細胞成陰性或弱陽性反應，陽性反應物質(zhì)呈細顆粒狀或均勻淡紅色；急性淋巴細胞白血病時，原淋和幼淋細胞常呈陽性反應，陽性反應物質(zhì)呈粗顆粒狀或塊狀；急性單核細胞白血病，原單核細胞大多為陽性反應，呈彌漫均勻紅色或細顆粒狀。

「例題」男性，25歲，發(fā)熱，牙齦出血，皮膚瘀斑5天，胸骨壓痛明顯，肝脾肋下觸及，血紅蛋白70g/L，白細胞50×109/L，血小板20×109/L，骨髓：原始細胞0.90， POX（+），PAS陰性，非特異性酯酶陰性，診斷為

A. 急性粒細胞白細胞

B. 急性早幼粒細胞白血病

C. 急性單核細胞白血病

D. 急性淋巴細胞白血病

E. 急性紅白血病

「正確答案」A

「解析」細胞化學染色

⑴過氧化物酶：急淋細胞呈陰性（陽性＜3％）；急粒細胞呈強陽性；急單細胞呈陽性或弱陽性。

⑵糖原染色：急淋細胞呈陽性（粗顆?；虼謮K狀，常集于胞漿一側）；急粒、急單細胞呈弱陽性（彌散性細顆粒狀）；紅白血病：幼紅細胞呈強陽性。

⑶非特異性酯酶染色：急單細胞呈強陽性，能被氟化鈉明顯抑制（>50％）；急粒細胞呈陽性或弱陽性，氟化鈉輕度抑制（＜50％）；急淋細胞一般呈陰性。

⑷中性粒細胞堿性磷酸酶染色：急淋白血病積分增高或正常；急粒白血病明顯減低；急單白血病可增高或減低。

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