免疫電泳法與免疫固定電泳
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免疫電泳法
免疫電泳法是指利用凝膠電泳與雙向免疫擴(kuò)散兩種技術(shù)結(jié)合的實(shí)驗(yàn)方法。在電場(chǎng)作用下標(biāo)本中各組分因電泳遷移率不同而分成區(qū)帶,然后沿電泳平行方向?qū)⒛z挖一溝槽,將抗體加入溝槽內(nèi),使抗原與抗體相互擴(kuò)散而形成沉淀線。根據(jù)沉淀線的數(shù)量、位置及形狀,以分析標(biāo)本中所含組分的性質(zhì),本實(shí)驗(yàn)常用于抗原分析及免疫性疾病的診斷。此法在微量的基礎(chǔ)上具有分辨率高,靈敏度高,時(shí)間短,是很理想的分離和鑒定蛋白質(zhì)混合物的方法。用于抗原、抗體定性及純度的測(cè)定。
免疫固定電泳
免疫固定電泳是一種包括瓊脂凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個(gè)過(guò)程的操作。血清IFE可檢測(cè)IgG、IgM、IgA等及κ輕鏈、λ輕鏈。原理是將樣本在瓊脂平板上作區(qū)帶電泳,分離后其上覆蓋抗血清濾紙,濾紙分別含抗κ輕鏈、抗λ輕鏈,或抗各類重鏈抗血清,當(dāng)抗體與某區(qū)帶中的單克隆Ig結(jié)合,可形成免疫復(fù)合物沉淀,即固定,再通過(guò)漂洗與染色,呈現(xiàn)濃而窄的著色區(qū)帶,即可判別單Ig的輕鏈和重鏈的類別。血清樣本要求使用免疫項(xiàng)目藍(lán)色管采集靜脈血,避免溶血。
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