釉原蛋白是細(xì)胞外釉基質(zhì)的主要蛋白種類，依據(jù)不同的種屬?gòu)腗r 20 000～27 000，富含疏水性的脯氨酸。其基因結(jié)構(gòu)、染色體定位和一級(jí)結(jié)構(gòu)基本清楚，不同種屬的釉原蛋白氨基酸序列高度同源［2］。釉原蛋白的轉(zhuǎn)錄與成釉細(xì)胞最初的極化有關(guān)。一旦基因開(kāi)始表達(dá)，釉原蛋白隨之轉(zhuǎn)錄［3］。內(nèi)釉上皮細(xì)胞的分化是由外胚間充質(zhì)細(xì)胞相互作用誘導(dǎo)的，以后內(nèi)釉上皮細(xì)胞開(kāi)始分化為成釉細(xì)胞并表達(dá)釉原蛋白。在釉基質(zhì)成熟階段，成釉細(xì)胞降低釉原蛋白的含量。雖然關(guān)于釉原蛋白確切的功能目前還不清楚，但它在釉質(zhì)生物礦化的過(guò)程中起著決定性的作用，它參與Ca的轉(zhuǎn)運(yùn)，控制釉質(zhì)晶體的生長(zhǎng)和大?。?］。

　　關(guān)于釉原蛋白的異質(zhì)性，有兩個(gè)機(jī)理：一是在釉質(zhì)發(fā)育階段細(xì)胞外蛋白酶對(duì)新生釉原蛋白分子的降解，產(chǎn)生了一系列小的蛋白片段［4］；二是釉原蛋白轉(zhuǎn)錄時(shí)的交叉剪切［5］，這種交叉剪切發(fā)生在多種種屬中，如牛、人、豬、小鼠、大鼠。有一些這樣交叉剪切的mRNA　可以在蛋白水平上檢測(cè)到［6］。我們用于原位雜交的探針是從大鼠cDNA質(zhì)粒中轉(zhuǎn)錄的，包括所有七個(gè)交叉剪切位點(diǎn)的大部分編碼序列。釉原蛋白交叉剪切的mRNA 已經(jīng)在鐘狀期、分泌期、成熟期的成釉細(xì)胞中檢測(cè)到［7］，因此在大鼠釉質(zhì)發(fā)育的不同時(shí)期檢測(cè)的雜交信號(hào)可以代表不同的交叉剪切產(chǎn)生的mRNA.本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了釉原蛋白在Wistar 大鼠牙胚發(fā)育各期的轉(zhuǎn)錄，顯示大鼠下頜第一磨牙最早可以檢測(cè)到Am mRNA是在出生后第1 d（鐘狀期、前成釉細(xì)胞正在極化的時(shí)期）。出生后前四 天成釉細(xì)胞Am mRNA 水平逐漸升高，到第5 d達(dá)到最高，以后隨著成釉細(xì)胞分化完成，成熟期成釉細(xì)胞中的表達(dá)持續(xù)在一個(gè)較低的水平。成牙本質(zhì)細(xì)胞中未檢測(cè)到表達(dá)。因此可以說(shuō)Am mRNA 在分泌性成釉細(xì)胞中高表達(dá)，在分泌后期細(xì)胞中的表達(dá)逐漸下降，分泌完成以后不表達(dá)。釉原蛋白量在整個(gè)分泌階段逐漸升高，成熟階段的早期達(dá)到高峰，然后快速下降。成熟釉質(zhì)的細(xì)胞外基質(zhì)中釉原蛋白分解消失。

　　細(xì)胞分泌和表達(dá)的基礎(chǔ)是細(xì)胞核內(nèi)基因組有選擇的逐漸關(guān)閉或開(kāi)放，導(dǎo)致某些成分的表達(dá)被抑制，而某些特異性蛋白表達(dá)開(kāi)始并逐步增強(qiáng)［8］。但細(xì)胞核內(nèi)基因組有選擇性表達(dá)并導(dǎo)致成釉細(xì)胞分泌、分化的調(diào)控因子有哪些，他們分別調(diào)控哪些基因的關(guān)閉和哪些基因的開(kāi)放，迄今為止仍不清楚。

　　作者單位：西安第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 710032

　　參考文獻(xiàn)

　　1.Karg HA， Burger EH， Lyaruu DM， et al. Gene expression and immunolocalization of amelogenins in developing embryonic and neonatal hamster teeth. Cell Tissue Res， 1997，288：545

　　2.Deutsch D， Catalano-Sherman J， Dafni L， et al.Enamel matrix proteins and ameloblast biology. Connect Tissue Res. 1995，32：97

　　3.Krishnan H， Trawich S，Witz H. The chemistry and biology of mineralized tissue.Biochemistry，1996，25：4879

　　4.Robinson C，Kirkham J，Brookes SJ， et al. The chemistry of enamel development. Int J Dev Biol， 1995，31：145

　　5.Simmer JP. Alternative splicing of amelogenins.Connect Tissue Res， 1997，32：134

　　6.Robinson C ， Brookes SJ， Shore RC， et al. The developing enamel matrix：Nature and function. Eur J Oral Sci， 1998，106：282

　　7.Girodot M， Sire JY. Evolution of the amelogenin gene in toothed and toothless vertebrates.Dev Biol，1998，106：501

　　8.Paine ML， Krebsbach PH， Chen LS. Protein-to-protein interactions： Criteria defining the assembly of the enamel organic matrix. J Dent Res， 1998，77：496