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流行性出血熱的實(shí)驗(yàn)室檢查是中西醫(yī)執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試中經(jīng)常會(huì)遇到的問題,為了幫助大家了解流行性出血熱的實(shí)驗(yàn)室檢查,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)的小編特為您整理如下:
(一)常規(guī)檢查
1.血象不同病期中變化不同,對診斷、預(yù)后判定均重要。
(1)白細(xì)胞早期白細(xì)胞總數(shù)正常或偏低,3——4日后即明顯增高,多在(15——30)×109/L,中性粒細(xì)胞明顯左移,并可出現(xiàn)幼稚細(xì)胞,重型、危重型可出現(xiàn)晚幼粒,中幼粒,甚至早幼粒細(xì)胞,呈現(xiàn)類白血病反應(yīng)。異型淋巴細(xì)胞在1——2病日即可出現(xiàn),且逐日增多,一般為10——20%,部分達(dá)30%以上,對診斷有參考價(jià)值。
(2)紅細(xì)胞和血紅蛋白發(fā)熱期開始上升,低血壓期逐漸增高,休克期患者明顯上升,至少尿期下降,其動(dòng)態(tài)變化可作為判斷血液濃縮與血液稀釋的重要指標(biāo)。
(3)血小板全病程均有不同程度降低,2病日即降低,低血壓及少尿期最低,并有異型、巨核血小板出現(xiàn),多尿后期始恢復(fù)。血小板顯著減少是本病一項(xiàng)特征性表現(xiàn)。下降迅速原因,除病毒直接損害外,提示有DIC存在。
2.尿常規(guī)顯著的尿蛋白是本病的重要特點(diǎn),也是腎損害的最早表現(xiàn)。其主要特征為:出現(xiàn)早、進(jìn)展快、時(shí)間長。多在2——3病日尿中即開始出現(xiàn)蛋白,并發(fā)展迅速,可在1天內(nèi)由“+”突然增至“+++”或“++++”。少尿期達(dá)高峰,以后逐漸下降,尿中還可有紅細(xì)胞、管型或膜狀物(是凝血塊、蛋白質(zhì)與壞死脫落上皮細(xì)胞的混合凝聚物),故必須強(qiáng)調(diào)多次查尿、有助于診斷醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
(二)血液生化檢查
1.尿素氮及肌酐低血壓休克期輕、中度增高。少尿期至多尿期達(dá)高峰,以后逐漸下降,升高程度及幅度與病情成正比。
2.二氧化碳結(jié)合力發(fā)熱后期即下降,低血壓休克期明顯,少尿期亦有下降,多尿期逐漸恢復(fù)至正常。
3.電解質(zhì)血鉀在發(fā)熱期可有降低,休克期仍低,少尿期上升為高血鉀,多尿期又降低。但少尿期亦有呈低血鉀者。血鈉及氯在全病程均降低,以休克及少尿期最顯著。血鈣在全病程中亦多降低。
(三)凝血功能檢查
一般血小板均減少,有DIC者,開始為高凝階段,凝血時(shí)間縮短,但為時(shí)較短,不易觀察。其后轉(zhuǎn)為低凝血階段和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。低凝階段,表現(xiàn)為凝血因子大量消耗,血小板下降,凝血酶原和部分凝血活酶時(shí)間延長,纖維蛋白原降低。繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)表現(xiàn)為凝血酶凝固時(shí)間延長,纖維蛋白降解物增加及優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間縮短。血漿魚精蛋白副凝試驗(yàn)(3P試驗(yàn))陽性說明有纖維蛋白單體存在,證明有較多凝血酶及纖溶存在。
(四)免疫功能檢查普遍有免疫功能異常
在急性期細(xì)胞免疫功能普遍低下,尤以休克期為甚,其下降幅度與病情嚴(yán)重程度相平行,至多尿期漸回升。在EHF患者病程中存在著調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量和功能失常,表現(xiàn)為病初自發(fā)性抑制性T細(xì)胞(STs)活性即明顯低下,CD8細(xì)胞百分?jǐn)?shù)增加,CD4/CD8比值倒置,增加的CD8細(xì)胞屬于細(xì)胞毒性T細(xì)胞。
血清免疫球蛋白測定可見IgM和IgA增高,早期尤其以IgM增高為著。急性期補(bǔ)體水平下降,血清總補(bǔ)體及補(bǔ)體C3、C4含量,在發(fā)熱期即開始下降,低血壓及少尿期尤著,病情危重者明顯降低。免疫復(fù)合物檢出率增高,早期即出現(xiàn)循環(huán)免疫復(fù)合物,腎組織作電鏡或免疫熒光檢查,在腎小球基底膜見有免疫復(fù)合物沉積。
(五)特異性血清學(xué)檢查
自病毒分離成功以來,對本病的特異性診斷技術(shù)迅速建立,檢測對象已由血清抗體發(fā)展到尿液抗體,由檢測抗體發(fā)展到細(xì)胞內(nèi)抗原和尿中可溶性抗原,檢測方法也日新月異。近來用分子生物學(xué)技術(shù)如斑點(diǎn)雜交、原位雜交及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)已試用于EHF的診斷及發(fā)病機(jī)理研究。
1.免疫熒光技術(shù)(IFAT)為常規(guī)方法之一。用間接免疫熒光法檢測患者血清特異性IgM和IgG抗體,前者在第1病日即可檢出,第2病日陽性率88.2%,第3病日達(dá)100%;IgG在2病日即可檢出,4——5病日陽性率達(dá)75%.直接免疫熒光法,可檢出白細(xì)胞及尿沉渣細(xì)胞內(nèi)病毒抗原,用于早期診斷。
2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)用雙抗體夾心法檢測可溶性抗原,用竟?fàn)幏z測阻斷抗體,特異、敏感,又可避免需要熒光顯微鏡。EHF-IgM捕獲法ELISA(Mac-ELISA)以不同病日血清IgM檢出率為97.7%,而IFAT法檢出率為88.7%,是一敏感、特異的診斷方法。
3.免疫粘附血凝法(IAHA)用于檢測抗體,其抗體滴度與免疫熒光抗體滴度相仿,又可區(qū)別不同類型病毒抗體。
李鎬汪和日本學(xué)者合作制出檢測EHF抗體的間接凝集試驗(yàn)方法,將漢坦病毒結(jié)合到硅化物顆粒上,制成直徑為1.8μm的抗原致敏顆粒,與稀釋的待檢血清反應(yīng)40分鐘可觀察結(jié)果,此法簡便易行,非特異反應(yīng)少,敏感性好。
4.反向被動(dòng)血凝法(RPHA)用于檢測體液病毒抗原,與ELISA法滴度基本一致。
5.放射免疫法(RIA)國外用固相放射免疫法與ELISA進(jìn)行診斷及血清流行病學(xué)調(diào)查,其敏感性較免疫熒光法高10倍以上。
6.空斑減少中和試驗(yàn)(PRNT)中和抗體是EHFV感染后產(chǎn)生的一種重要抗體,是目前用于病毒血清學(xué)分型的主要依據(jù)。本法要求嚴(yán)格,操作復(fù)雜費(fèi)時(shí),難以在一般試驗(yàn)室開展。中和效價(jià)的高低與病型輕重有關(guān),即重癥患者低,中型患者較高。
7.放射免疫沉淀試驗(yàn)(RIP)有報(bào)告用RIP對83份不同病日患者血清測定,抗EHFV-NP(核蛋白)抗體最早出現(xiàn),大多在4病日便可測出,其后為抗G2(糖蛋白),抗G1僅在少數(shù)標(biāo)本中方能測出。三種病毒結(jié)構(gòu)蛋白抗體滴度也是抗NP最高,抗G1最低。
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