主要指沿海大陸架、中國(guó)海島及河湖水網(wǎng)所產(chǎn)的道地藥材。如:珍珠、珍珠母、石決明、海螵蛸、牡蠣、海龍、海馬等。
(三)藥材的采收
1.采收與藥材質(zhì)量、產(chǎn)量的關(guān)系
1)中藥質(zhì)量的優(yōu)劣,取決于有效成分,有效成分含量的高低除取決于藥用植物種類、藥用部位、產(chǎn)地、生產(chǎn)技術(shù)。
2)藥材的采收年限、季節(jié)、時(shí)間、方法等直接影響藥材的質(zhì)量、產(chǎn)量和收獲率。
① 槐花在花蕾期蘆丁的含量最高可達(dá)28.0%,如已開(kāi)花,則蘆丁含量急劇下降;
②甘草在生長(zhǎng)初期甘草酸(甘草甜素)的含量為6.5%,開(kāi)花前期為10.5%,開(kāi)花盛期為4.5%,生長(zhǎng)末期為3.5%。
3)中藥材的適時(shí)采收是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)藥材的重要環(huán)節(jié)。
2.藥材的適宜采收期
以藥材質(zhì)量的最優(yōu)化和產(chǎn)量的最大化為原則,確定其最適宜的采收期。
1有效成分含量高峰期與產(chǎn)量高峰期基本一致時(shí),共同的高峰期即為適宜采收期。
1)許多根及根莖類中藥,在秋冬季節(jié)地上部分枯萎后和春初植物發(fā)芽前或剛露苗時(shí),既是有效成分高峰期,又是產(chǎn)量高峰期,此時(shí)最適宜采收期。如莪術(shù)、郁金、姜黃、天花粉、山藥等。
2)金銀花在花蕾期含有效成分綠原酸最多,產(chǎn)量最高,所以最適宜采收期應(yīng)是花蕾期。
3)對(duì)不同生長(zhǎng)期穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量的動(dòng)態(tài)研究表明,它們?cè)?、9月份即在花蕊期至開(kāi)花前期含量較高,此時(shí)產(chǎn)量亦高,故穿心蓮適宜采收期為花蕊期至開(kāi)花前期。uO aWM3V9~l"FatsG
2有效成分含量有顯著高峰期,而藥用部分產(chǎn)量變化不顯著者,有效成分含量高峰期是其最適宜采收期。
1) 三顆針的根在營(yíng)養(yǎng)期與開(kāi)花期小檗堿含量差異不大,但在落果期小檗堿含量增加一倍以上,故三顆針的根的適宜采收期應(yīng)是落果期。
2)對(duì)野生移栽的芍藥根中的芍藥苷積累動(dòng)態(tài)的研究表明,在全年中芍藥苷含量以休眠期為最高,果熟期為最低,其適宜采收期應(yīng)在休眠期。
3)同一種藥用植物在不同產(chǎn)地,其生長(zhǎng)發(fā)育受當(dāng)?shù)貧夂?、土壤、水質(zhì)等生態(tài)環(huán)境影響,有效成分含量的高峰期常因產(chǎn)地不同而有所差異,故其最佳采收期也有所不同。如麻黃中的麻黃堿在春季最少,隨后逐漸增高。而內(nèi)蒙的麻黃8月最高,以后逐漸下降。而山西的麻黃9月最高;以后逐漸下降。
3有效成分含量無(wú)顯著變化,藥材產(chǎn)量的高峰期應(yīng)是其最適宜采收期。
通過(guò)對(duì)五倍子中肚倍蟲(chóng)癭發(fā)育規(guī)律及其發(fā)育過(guò)程中單寧酸含量變化的研究,發(fā)現(xiàn)肚倍蚜蟲(chóng)的癭內(nèi)生活期為80天左右,肚倍蟲(chóng)癭在生長(zhǎng)的全過(guò)程中單寧酸含量維持穩(wěn)定。蟲(chóng)癭的發(fā)育在前期速度較快,后期較緩慢。肚倍成熟爆裂最初出現(xiàn)在7月12日,最晚為7月30日,因此肚倍的最適宜采收期由獲取最大產(chǎn)量因素決定,應(yīng)選擇在7月12日之后,7月30日前,過(guò)早采收,縮短蟲(chóng)癭生長(zhǎng)時(shí)間,造成減產(chǎn);過(guò)晚采收,肚倍成熟爆裂,同樣會(huì)減產(chǎn)。
4有效成分含量高峰期與產(chǎn)量高峰期不一致時(shí),有效成分總含量最高時(shí)期即為適宜采收期。
1)單位面積有效成分的總量=單位面積產(chǎn)量×有效成分的百分含量。利用繪制含量與產(chǎn)量曲線圖,由二曲線的相交點(diǎn)可直接找到適宜采收期。如薄荷,揮發(fā)油為其主要有效成分,薄荷在花蕾期揮發(fā)油含量最高,而薄荷的揮發(fā)油主要存在于葉中,葉的產(chǎn)量高峰在花后期。其揮發(fā)油含量高峰期與葉產(chǎn)量高峰期不一致,若分別以揮發(fā)油含量(%)和葉的產(chǎn)量為縱坐標(biāo),以不同生長(zhǎng)期為橫坐標(biāo),即可繪制出兩條曲線來(lái),將二曲線圖中的產(chǎn)量高峰與含油高峰以同一坐標(biāo)高度表示,即二曲線交點(diǎn)之對(duì)應(yīng)時(shí)期即為適宜采收期。
2)對(duì)多年生藥用植物適宜采收年限的選擇,應(yīng)根據(jù)有效成分含量高峰期,兼顧產(chǎn)量高峰期,經(jīng)綜合分析來(lái)確定。如人參,對(duì)吉林撫松栽培的不同年齡人參的皂苷含量測(cè)定結(jié)果表明,皂苷的積累是隨人參栽培年限的增加而逐漸增加,至4年生含量達(dá)到最高(4.8%),以后兩年增加較慢或略有下降,6年生者在秋季藥材產(chǎn)量和人參皂苷總含量均較高,故栽培人參應(yīng)以6年生者秋季為適宜采收期。
5多種因素影響藥材質(zhì)量,運(yùn)用計(jì)算機(jī)技術(shù)確定適宜采收期能得到更確定的判定。
如烏梅的質(zhì)量取決于水提液的pH、游離總酸度、還原糖含量、檸檬酸與蘋(píng)果酸含量比(與成熟度有關(guān))等4個(gè)指標(biāo);其藥材產(chǎn)量又與果肉率、烏梅產(chǎn)率兩個(gè)指標(biāo)有關(guān)。對(duì)梅果實(shí)的上述各項(xiàng)質(zhì)量與產(chǎn)率共用的6個(gè)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,將所得結(jié)果應(yīng)用SAS(6.03版)軟件系統(tǒng)用計(jì)算機(jī)進(jìn)行多元方差分析處理。綜合考查上述多重指標(biāo)確定梅的最佳采收期為核仁、果肉成熟期。
6含有毒成分的藥材,應(yīng)以藥效成分總含量最高,毒性成分含量最低時(shí)采集為宜。
3.各類藥材的一般采收原則
1根及根莖類
一般在秋、冬兩季植物地上部分將枯萎時(shí)及春初發(fā)芽前或剛露苗時(shí)采收,此時(shí)根或根莖中貯藏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)最為豐富,通常有效成分的含量也比較高。
2莖木類
一般在秋、冬兩季采收。
3皮類
一般在春末夏初時(shí)采收,此時(shí)樹(shù)皮養(yǎng)分和液汁增多,形成層細(xì)胞分裂較快,皮部和木部容易剝離,傷口也較易愈合。杜仲、黃柏等就可采用“環(huán)狀剝皮技術(shù)”。
4葉類
一般在植物光合作用旺盛期,葉片繁茂,顏色青綠,開(kāi)花前或果實(shí)未成熟前采收,此時(shí)往往有效成分含量高。
5花類
一般不宜在花完全盛開(kāi)后采收,開(kāi)放過(guò)久接近衰敗的花朵,不僅影響藥材的顏色、氣味,而且有效成分的含量也會(huì)顯著減少。花類中藥的采收如下:
1)有的在含苞待放時(shí)采收,如金銀花、丁香、辛夷、槐米等;
2)有的在花初開(kāi)時(shí)采收,如洋金花等;
3)有的在花盛開(kāi)時(shí)采收,如菊花、番紅花等;
4)紅花則要求花冠由黃變紅時(shí)采摘;
5)而對(duì)于那些花期較長(zhǎng),花朵陸續(xù)開(kāi)放的植物,應(yīng)分批采摘。
6果實(shí)種子類
1)一般在果實(shí)自然成熟或?qū)⒔墒鞎r(shí)采收。少數(shù)采收幼果,如枳實(shí)、青皮等。
2)種子類藥材宜在果實(shí)成熟時(shí)采收。
7全草類
1)一般在植株充分生長(zhǎng),莖葉茂盛時(shí)采收,如青蒿、淡竹葉、穿心蓮等;
2)有的在開(kāi)花時(shí)采收,如益母草、香薷、荊芥等。
(8)藻、菌、地衣類
藥用部位不同,其采收時(shí)間也不一樣。如
1)茯苓,立秋后采收質(zhì)量較好;
2)冬蟲(chóng)夏草宜在夏初子座出土孢子未散發(fā)時(shí)采收;
3)海藻宜在夏、秋兩季采撈;
4)松蘿則全年均可采收。
二、動(dòng)物藥類
1昆蟲(chóng)類
1)入藥部位含蟲(chóng)卵的,應(yīng)在蟲(chóng)卵孵化前采收,如:桑螵蛸應(yīng)在深秋至次年3月中旬前采收,過(guò)時(shí)卵已孵化,降低質(zhì)量;
2)以成蟲(chóng)入藥的,均應(yīng)在活動(dòng)期捕捉,如土鱉蟲(chóng)等;
3)有翅昆蟲(chóng)可在清晨露水未干時(shí)捕捉,因此時(shí)不易起飛,如斑蝥。
2兩棲類、爬行類
1)多數(shù)宜在夏、秋兩季捕捉采收,如蟾蜍和各種蛇類藥材;
2)也有在霜降期捕捉采收的,如哈蟆油等。
3脊椎動(dòng)物
1)大多數(shù)全年均可采收,如龜甲、雞內(nèi)金、牛黃、馬寶等;
2)鹿茸則需在5月中旬至7月下旬鋸取,過(guò)時(shí)則會(huì)骨化;
3)麝香的活體取香則一般在10月進(jìn)行。三、礦物藥類
全年可挖,大多結(jié)合開(kāi)礦采掘。
4.采收藥材中的注意事項(xiàng)
1選擇適宜的采收的機(jī)具,保持清潔、無(wú)污染。
2除藥材的藥用部位外,還要充分利用其他部位,開(kāi)展綜合利用。
3保護(hù)野生藥材資源。一要按需采藥:采大留小,采密留稀,分期采集,合理輪采;二要輪采、野生撫育和封育。
(四)藥材的產(chǎn)地加工
1.產(chǎn)地加工的目的
中藥材采收后,除少數(shù)要求鮮用如生姜、鮮蘆根等外,絕大多數(shù)需經(jīng)過(guò)產(chǎn)地加工。中藥材產(chǎn)地加工的目的是:
1除去雜質(zhì)及非藥用部位,保證藥材的純凈度。
2按藥典規(guī)定進(jìn)行加工或修制,使藥材盡快滅活、干燥,保證藥材質(zhì)量。對(duì)鮮用的藥材保鮮處理,防霉、防腐。。
3降低或消除藥材毒性或刺激性,保證用藥安全 有的藥材毒性很大,通過(guò)浸、漂、蒸、煮等加工方法可以降低毒性,如附子等。有的藥材表面有大量的毛狀物,如不清除,服用時(shí)可能刺激口腔和咽喉黏膜,引起發(fā)炎或咳嗽,如狗脊、枇杷葉等。
4有利于藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)化。
5有利于包裝、運(yùn)輸與貯藏。
2.常用的產(chǎn)地加工方法
揀、洗、切片、蒸、煮、燙、搓揉、發(fā)汗、干燥
1揀、洗
將采收的新鮮藥材除去泥沙雜質(zhì)及非藥用部位,但具芳香氣味的藥材一般不用水洗,如薄荷、木香、細(xì)辛等。
2切片
1)較大的根及根莖類、堅(jiān)硬的藤木類及肉質(zhì)的果實(shí)類藥材有的趁鮮切成塊片,以利干燥,如大黃、雞血藤、木瓜。
2)某些含揮發(fā)性成分或有效成分較易氧化的藥材,則不宜切成薄片干燥,如當(dāng)歸、川芎等。
3蒸、煮、燙
含漿汁、淀粉或糖分多的藥材,用一般方法不易干燥,須先經(jīng)蒸、煮或燙的處理,以利干燥,同時(shí)可使藥材中的酶失去活性,不致分解藥材的有效成分。但加熱時(shí)間的長(zhǎng)短不等,視藥材的性質(zhì)而定,如:
1)白芍煮至透心;
2)天麻、紅參蒸至透心;
3)太子參置沸水中略燙;
4)五倍子、桑螵蛸蒸至蟲(chóng)卵或蚜蟲(chóng)被殺滅。
4熏硫
1)為使有些藥材色澤潔白,防止霉?fàn)€,常在干燥前后用硫黃熏制,如白芷、山藥、川貝母等。
2)熏硫雖是一種傳統(tǒng)的加工方法,但藥材經(jīng)硫熏后會(huì)殘留硫化物,影響藥材的安全性,有些藥材經(jīng)熏硫后其有效成分的含量大大降低,如白芷等。而且熏硫也會(huì)造成環(huán)境污染,因此該法需深入研究。
5發(fā)汗
有些藥材在加工過(guò)程中為了促使變色,增強(qiáng)氣味或減少刺激性,有利于干燥,常將藥材堆積放置,使其發(fā)熱、“回潮”,內(nèi)部水分向外揮散,這種方法稱為“發(fā)汗”,如厚樸、杜仲、玄參、續(xù)斷、茯苓等。
6干燥
除少數(shù)要求鮮用的藥材如石斛、地黃、生姜等外,大多數(shù)藥材經(jīng)加工后均應(yīng)及時(shí)干燥。干燥的目的就是除去藥材中的大量水分,避免發(fā)霉、變色、蟲(chóng)蛀以及有效成分的分解和破壞,保證藥材質(zhì)量,利于貯藏?!吨袊?guó)藥典》對(duì)藥材產(chǎn)地加工及炮制規(guī)定的干燥方法如下:
1)烘干、曬干、陰干均可的,用“干燥”;
2)不宜用較高溫度烘干的,則用“曬干”或“低溫干燥”(一般不超過(guò)60℃);
3)烘干、曬干均不適宜的,用“陰干”或“晾干”;
4)少數(shù)藥材需要短時(shí)間干燥,則用“曝曬”或“及時(shí)干燥”。近年來(lái),亦有用遠(yuǎn)紅外干燥、微波干燥、冷凍干燥等新方法干燥藥材。
四、中藥的鑒定
(一)中藥鑒定的依據(jù)
1.國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)
(1)《中國(guó)藥典》
1)是國(guó)家監(jiān)督管理藥品質(zhì)量的法定技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。
2)它規(guī)定了藥品的來(lái)源、質(zhì)量要求和檢驗(yàn)方法。
3)是全國(guó)藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用和檢驗(yàn)等單位都必須遵照?qǐng)?zhí)行的法定依據(jù)。
4)共頒布了九版:1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005、2010。
(2)部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)
1)由國(guó)家藥典委員會(huì)編纂出版;
2)是補(bǔ)充在同時(shí)期該版藥典中未收載的品種或內(nèi)容;
3)與《中國(guó)藥典》同屬國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn),也是全國(guó)各有關(guān)單位必須遵照?qǐng)?zhí)行的法定藥品標(biāo)準(zhǔn)。
4)與藥材相關(guān)的主要有:
①中藥材部頒標(biāo)準(zhǔn) 如《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(中藥材第一冊(cè)),載藥101種,1991年頒布;《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(藏藥第一冊(cè)),載藥136種,1995年頒布;《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(蒙藥分冊(cè)),載藥57種,1998年頒布;《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(維吾爾藥分冊(cè)),載藥202種,1999年頒布等。②進(jìn)口藥材部頒標(biāo)準(zhǔn) 我國(guó)常用的進(jìn)口藥材約50種,現(xiàn)行版為2004年再次根據(jù)藥典品種的變化進(jìn)行修訂并執(zhí)行的《兒茶等43種進(jìn)口藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》。
2.地方藥品標(biāo)準(zhǔn)
(1)各省、自治區(qū)、直轄市中藥材標(biāo)準(zhǔn)
各省、自治區(qū)、直轄市制訂的中藥材標(biāo)準(zhǔn),收載的藥材多為國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)未收載的品種而為各省、自治區(qū)或直轄市的地區(qū)性習(xí)慣用藥,該地區(qū)的藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用、檢驗(yàn)和管理部門(mén)必須遵照?qǐng)?zhí)行,而對(duì)其他省區(qū)無(wú)法定約束力,但可作為參照?qǐng)?zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)。(2)各省、自治區(qū)、直轄市中藥炮制規(guī)范
按藥品管理法規(guī)定,中藥飲片的鑒定必須按照國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行,國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)有規(guī)定的,必須按照省、自治區(qū)、直轄市人民政府藥品監(jiān)督管理部門(mén)制定的炮制規(guī)范執(zhí)行。
(二)中藥檢驗(yàn)工作的一般程序
(1)檢品受理與取樣
由業(yè)務(wù)科按規(guī)定接受檢品(抽樣樣品和委托樣品)取樣。符合條件的委托檢驗(yàn)品由委托方填寫(xiě)委托書(shū)。檢品的取樣按《中國(guó)藥典》的規(guī)定,正式的樣品由業(yè)務(wù)科登記、留樣、填寫(xiě)檢品卡。
(2)檢驗(yàn)
對(duì)中藥的鑒定,其檢驗(yàn)?zāi)康闹饕ㄈ矫妫褐兴幍恼鎸?shí)性鑒定、安全性檢查及質(zhì)量?jī)?yōu)劣鑒定。以藥材和飲片為例,鑒定的內(nèi)容主要有:1中藥的真實(shí)性鑒定
包括中藥的來(lái)源、性狀、鑒別(包括經(jīng)驗(yàn)鑒別 、顯微鑒別、理化鑒別、薄層色譜、光譜、氣相色譜、液相色譜等鑒別內(nèi)容)。
2中藥的安全性檢查
包括內(nèi)源性有害物質(zhì)的檢查和外源性有害物質(zhì)(如重金屬及有害元素、農(nóng)藥殘留量、二氧化硫殘留量及黃曲霉毒素等)的檢查。
3中藥質(zhì)量?jī)?yōu)劣的鑒定
包括中藥的純度(如雜質(zhì)、水分、灰分等)和質(zhì)量?jī)?yōu)良度(如浸出物、揮發(fā)油及有效成分的含量測(cè)定等)的鑒定。
(3)檢驗(yàn)記錄及檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)
檢驗(yàn)記錄是出具報(bào)告書(shū)的原始依據(jù)。檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)是對(duì)藥品質(zhì)量作出的技術(shù)鑒定,如是藥品檢驗(yàn)所出具的檢驗(yàn)報(bào)告書(shū),則是具有法律效力的技術(shù)文件,應(yīng)長(zhǎng)期保存。(4)異議與仲裁
被抽檢(或委托)單位在收到檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)后,如有異議,應(yīng)在1周內(nèi)向檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)申請(qǐng)復(fù)驗(yàn)。復(fù)驗(yàn)結(jié)果與原報(bào)告一致,原報(bào)告有效;如果不一致,以復(fù)驗(yàn)報(bào)告為準(zhǔn)。如仍有異議,可向上一級(jí)藥檢機(jī)構(gòu)申請(qǐng)仲裁檢驗(yàn),并以仲裁檢驗(yàn)結(jié)果為最終結(jié)論。
(三)《中國(guó)藥典》(2010年版)一部中與藥材鑒定相關(guān)的內(nèi)容
1.凡例
(1)凡例的作用
凡例是解釋和使用藥典,正確進(jìn)行質(zhì)量檢定的基本指導(dǎo)原則,并把與正文、附錄、及質(zhì)量檢定的有關(guān)共性問(wèn)題加以規(guī)定,避免重復(fù),具有同樣法定的約束力。(2)名稱與編排
藥材和飲片名稱包括中文名、漢語(yǔ)拼音、及拉丁名(拉丁名排列:屬名或?qū)倜?種加詞在先,藥用部位在后)。(3)對(duì)照品、對(duì)照藥材、對(duì)照提取物、標(biāo)準(zhǔn)品
系指用于鑒別、檢查、含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。對(duì)照品應(yīng)按其使用說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的方法處理后按標(biāo)示含量使用。(4)精確度
取樣量的準(zhǔn)確度和試驗(yàn)的精密度。
1試驗(yàn)中供試品與試藥等“稱重”或“量取”的量,均以阿拉伯?dāng)?shù)碼表示,其精確度可根據(jù)數(shù)值的有效數(shù)位來(lái)確定。如稱取“0.1g”系指稱取重量可為0.06~0.14g;稱取“2 g”系指稱取重量可為1.5~2.5g;稱取“2.0g”系指稱取重量可為1.95~2.05g;稱取“2.00 g”系指稱取重量可為1.995~2.005g。1)“精密稱定”:稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一;
2)“稱定”:稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的百分之一。
3)“精密量取”:量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求;
4)“量取”:可用量筒或按照量取體積的有效數(shù)位選用量具。取用量為“約”若干時(shí),系指取用量不得超過(guò)規(guī)定量的±10%。2恒重:供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下的重量;干燥至恒重的第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1小時(shí)后進(jìn)行;熾灼至恒重的第二次稱重應(yīng)在繼續(xù)熾灼30分鐘后進(jìn)行。
3試驗(yàn)中規(guī)定“按干燥品(或無(wú)水物,或無(wú)溶劑)計(jì)算”時(shí),除另有規(guī)定外,應(yīng)取未經(jīng)干燥(或未去水,或未去溶劑)的供試品進(jìn)行試驗(yàn),并將計(jì)算中的取用量按[檢查]項(xiàng)下測(cè)得的干燥失重(或水分,或溶劑)扣除。
4“空白試驗(yàn):在不加供試品或以等量溶劑替代供試液的情況下,按同法操作所得的結(jié)果;[含量測(cè)定]中的“并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正”,系指按供試品所耗滴定液的量(ml)與空白試驗(yàn)中所耗滴定液的量(ml)之差進(jìn)行計(jì)算。
5試驗(yàn)時(shí)的溫度,未注明者,系指在室溫下進(jìn)行;溫度高低對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著影響者,除另有規(guī)定外,應(yīng)以25±℃為準(zhǔn)。
2.附錄
(1)藥材和飲片取樣法
藥材和飲片取樣法是指按《中國(guó)藥典》的規(guī)定選取供檢驗(yàn)用藥材或飲片的方法。所取樣品應(yīng)具有代表性、均勻性,并留樣保存。1抽取樣品前
應(yīng)核對(duì)品名、產(chǎn)地、規(guī)格等級(jí)及包件式樣是否一致,檢查包裝的完整性、清潔程度以及有無(wú)水跡、霉變、或被其他物質(zhì)污染等情況,并詳細(xì)記錄。凡有異常情況的包件,應(yīng)單獨(dú)檢驗(yàn)并拍照。
2從同批藥材和飲片包件中抽取供檢驗(yàn)用樣品的原則
1)5~99件,隨機(jī)抽5件取樣;
2)100~1000件,按5%比例取樣;
3)超過(guò)1000件的,超過(guò)部分按1%比例取樣;
4)總包件數(shù)不足5件的,逐件取樣; 貴重藥材和飲片,不論包件多少均逐件取樣。3每一包件的取樣原則
1)至少在2—3個(gè)不同部位各取樣品一份,大包件從10cm以下不同部位抽??;
2)破碎在1cm或粉末可用采樣器(探子)抽取樣品;
3)大包件對(duì)個(gè)體較大的藥材,選取有代表性的樣品。4每一包件的取樣量
1)一般藥材和飲片抽取100~500g
2)粉末狀藥材和飲片抽取25~50g
將抽取的樣品混勻,即為抽取樣品總量。若抽取樣品重量超過(guò)檢驗(yàn)用量數(shù)倍時(shí),可按四分法再取樣,即將所有樣品攤成正方形,依對(duì)角線劃“×”,即分為四等份,取用對(duì)角兩份;再如上操作,反復(fù)數(shù)次,直至最后剩余量足夠完成所有必要的實(shí)驗(yàn)以及留樣為止。6最終抽取的供檢驗(yàn)用樣品量
最終抽取的供檢驗(yàn)用樣品量一般不得少于檢驗(yàn)所需用量的3倍,即1/3供實(shí)驗(yàn)室分析用,另1/3供復(fù)核用,其余1/3留樣保存。
(2)雜質(zhì)檢查法
藥材中雜質(zhì)的混存,直接影響藥材的純度。雜質(zhì)的概念:1來(lái)源與規(guī)定相同,但其性狀或部位與規(guī)定不符。
2來(lái)源與規(guī)定不同的有機(jī)質(zhì)。
3無(wú)機(jī)雜質(zhì),如砂石、泥塊、塵土等。
(3)水分檢查法
測(cè)定用的供試品,一般先破碎成直徑不超過(guò)3mm的顆?;蛩槠?span style="color:#ff0000">直徑和長(zhǎng)度在3mm以下的花類,種子和果實(shí)類藥材,可不破碎。減壓干燥法需先經(jīng)二號(hào)篩。水分測(cè)定法共有以下四種:
1烘干法 本法適用于不含或少含揮發(fā)性成分的藥品。
2甲苯法 本法適用于含揮發(fā)性成分的藥品。
3減壓干燥法 本法適用于含有揮發(fā)性成分的貴重藥品。
4氣相液譜法 《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VIE測(cè)定,應(yīng)符合條件:
1)理論板數(shù)按水峰計(jì)算應(yīng)大于1000,乙醇大于150;
2)水和乙醇兩峰的分離度應(yīng)大于2;
3)用無(wú)水乙醇進(jìn)樣5次,水峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不得大于3.0%
(4)灰分檢查法
1總灰分測(cè)定法
測(cè)定用的供試品須粉碎,使能通過(guò)二號(hào)篩,混合均勻后,取供試品2~3g(如須測(cè)定酸不溶性灰分,可取供試品3~5g),置熾灼至恒重的坩堝中,稱定重量(準(zhǔn)確至0.01g),緩緩熾熱,注意避免燃燒,至完全炭化時(shí),逐漸升高溫度至500~600℃,使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓浚?jì)算供試品中總灰分的含量(%)。2酸不溶性灰分測(cè)定法
取上項(xiàng)所得的灰分,在坩堝中小心加入稀鹽酸(10%的鹽酸)約10ml,用表面皿覆蓋坩堝,置水浴上加熱10分鐘,表面皿用熱水5ml沖洗,洗液并入坩堝中,用無(wú)灰濾紙濾過(guò),坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上,并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移置同一坩堝中,干燥,熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?,?jì)算供試品中酸不溶性灰分的含量(%)。
(5)浸出物測(cè)定法
浸出物測(cè)定法有水溶性浸出物測(cè)定法、醇溶性浸出物測(cè)定法和揮發(fā)性醚浸出物測(cè)定法3種。1水溶性浸出物測(cè)定法 包括冷浸法、熱浸法。
2醇溶性浸出物測(cè)定法 照水溶性浸出物測(cè)定法測(cè)定。除另有規(guī)定外,以各品種項(xiàng)下規(guī)定濃度的乙醇代替水為溶劑。
3揮發(fā)性醚浸出物測(cè)定法 加乙醚適量。
(6)揮發(fā)油測(cè)定法
測(cè)定用的供試品,除另有規(guī)定外,須粉碎使能通過(guò)2~3號(hào)篩,并混合均勻。揮發(fā)油測(cè)定法分甲法和乙法:1甲法 本法適用于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以下的揮發(fā)油。
2乙法 本法適用于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以上的揮發(fā)油。
(四)中藥鑒定的方法
1.來(lái)源鑒定法
(1)來(lái)源鑒定的目的
來(lái)源鑒定法又稱基原鑒定法,是應(yīng)用植(動(dòng)、礦)物的分類學(xué)知識(shí),對(duì)中藥的來(lái)源進(jìn)行鑒定,確定中藥正確的學(xué)名,以保證中藥的品種準(zhǔn)確無(wú)誤。(2)來(lái)源鑒定的內(nèi)容
1植(動(dòng))物藥的原植(動(dòng))物科名、植(動(dòng))物名、拉丁學(xué)名、藥用部位,
2礦物藥的類、族、礦石名或巖石名。(3)原植物鑒定的步驟
1觀察植物形態(tài) 對(duì)具有較完整植物體的檢品,應(yīng)注意觀察根、莖、葉、花和果實(shí)等部位的特征,對(duì)繁殖器官(花、果或孢子囊、子實(shí)體等)尤應(yīng)仔細(xì)觀察,并做好記錄。
2核對(duì)文獻(xiàn) 根據(jù)已觀察到的形態(tài)特征和產(chǎn)地、別名、效用等為線索,可查閱全國(guó)或地方植物志、中草藥書(shū)籍和圖譜,加以分析對(duì)照。
3核對(duì)標(biāo)本 當(dāng)初步鑒定檢品的科、屬、種,可與標(biāo)本館已知正確鑒定學(xué)名的該標(biāo)本核對(duì),或模式標(biāo)本核對(duì),或?qū)<覅f(xié)助鑒定。
2.性狀鑒定法
(1)藥材的形狀、大小、色澤、表面特征、質(zhì)地、斷面特征、氣、味、水試、火試
1形狀
是指藥材的形態(tài)。藥材的形狀與藥用部位有關(guān)。每種藥材的形狀一般比較固定。有的經(jīng)驗(yàn)鑒別術(shù)語(yǔ)形象生動(dòng),好懂易記,如:
1)黨參根頭部分稱為“獅子頭”,
2)款冬花形如“火炬頭”,
是指藥材的長(zhǎng)短、粗細(xì)(直徑)和厚度。3色澤
1)是指在自然光下觀察藥材的顏色及光澤度。藥材的顏色與其成分有關(guān),每種藥材常有自己特定的顏色,如丹參色紅、黃連色黃、紫草色紫、熟地黃色黑等。
2)顏色是否符合要求,是衡量藥材質(zhì)量好壞的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。
3)通常大部分藥材的顏色不是單一而是復(fù)合的,如用兩種色調(diào)復(fù)合描述色澤時(shí),以后一種色調(diào)為主色,例如黃棕色,即以棕色為主色,而棕黃色,則以黃色為主色。4表面特征
1)指藥材表面是光滑還是粗糙,有無(wú)皺紋、皮孔、鱗片、毛茸或其他附屬物及有無(wú)節(jié)等。如白芥子表面光滑,紫蘇子表面有網(wǎng)狀紋理,海桐皮表面有釘刺,合歡皮的皮孔棕紅色、橢圓形,辛夷(望春花)苞片外表面密被灰白色或灰綠色有光澤的長(zhǎng)茸毛,均為其重要鑒別特征。
2)葉類藥材包括上表面和下表面,皮類藥材的表面特征包括外表面和內(nèi)表面特征。5質(zhì)地
1)指藥材的輕重、軟硬、堅(jiān)韌、疏松(或松泡)、致密、黏性、粉性、油潤(rùn)、角質(zhì)、綿性、柴性等特征。
2)有的藥材因加工方法不同,質(zhì)地也不一樣,經(jīng)蒸、煮加工的藥材,常質(zhì)地堅(jiān)實(shí),半透明,呈角質(zhì)樣;富含淀粉者,曬干后質(zhì)地常顯粉性。6斷面特征
1)橫切面的特征在鑒別藥材及飲片時(shí)特別有意義。
2)包括自然折斷面和橫切面。折斷面特征指藥材折斷時(shí)的現(xiàn)象,如是否容易折斷,有無(wú)聲響,有無(wú)粉塵散落及折斷時(shí)斷面上的特征;斷面是否平坦,或顯纖維性、顆粒性、裂片狀,有無(wú)膠絲,是否可以層層剝離,有無(wú)放射狀紋理等。對(duì)不易折斷或折斷面不平坦的藥材,可削平后觀察維管束排列情況、射線的分布等。橫切面的經(jīng)驗(yàn)鑒別術(shù)語(yǔ)很多,如:
1)“菊花心”,是指藥材橫切面上維管束與不甚直的射線排列成細(xì)密的放射狀紋理,且在皮部沿射線常有裂隙,形如開(kāi)放的菊花,如黃芪、甘草等;
2)“車輪紋”是指藥材橫切面上維管束與較寬而直的射線排列成稀疏整齊的放射狀紋理,形如木質(zhì)車輻,如防己等;
3)茅蒼術(shù)有“朱砂點(diǎn)”;
4)還有一些屬于異常構(gòu)造的,如大黃的“星點(diǎn)”,何首烏的“云錦狀花紋”,商陸的“羅盤(pán)紋"等
7氣
1)氣也是藥材的重要鑒別特征之一。2)有些藥材有特殊的香氣或臭氣,是由于這些藥材含有揮發(fā)性物質(zhì)的緣故, 如:
①阿魏具強(qiáng)烈的蒜樣臭氣;
② 檀香、麝香有特異芳香氣;
③白鮮皮有羊膻氣。
8味
藥材的味感是由其所含的化學(xué)成分決定的,每種藥材的味感是比較固定的,對(duì)鑒別某些藥材的真?zhèn)紊踔临|(zhì)量的鑒別特別有價(jià)值。
1)烏梅、木瓜均以味酸為好;黃連、黃柏以味越苦越好;甘草、黨參以味甜為好等。
2)檢查味感時(shí),可取少量有代表性的藥材在口里咀嚼約1分鐘,使舌面的各部位都接觸到藥液,或用開(kāi)水浸泡后嘗浸出液。有毒的藥材如川烏、草烏、半夏、白附子等需嘗味時(shí),取樣要少,嘗后應(yīng)立即吐出漱口,洗手,以免中毒。9水試
利用某些藥材在水中產(chǎn)生的各種特殊的變化來(lái)鑒別藥材,如沉浮、溶解情況、顏色、透明度、有無(wú)黏性、膨脹度、旋轉(zhuǎn)與否及有無(wú)熒光等。這些現(xiàn)象常與藥材中所含有的化學(xué)成分或組織構(gòu)造密切相關(guān)。如:
1)紅花加水浸泡后,水液染成金黃色,藥材不變色;
2)秦皮水浸,浸出液在日光下顯碧藍(lán)色熒光;
3)蘇木投熱水中,水顯鮮艷的桃紅色;
4)來(lái)源于旌節(jié)花屬植物的小通草遇水表面顯黏性;
5)熊膽粉末投入清水杯中,即在水面旋轉(zhuǎn)并呈黃色線狀下沉而短時(shí)間內(nèi)不擴(kuò)散;
6)哈蟆油用溫水浸泡,膨脹系數(shù)不低于55等。
10火試
有的藥材用火燒之,能產(chǎn)生特殊的香氣或臭氣,會(huì)有顏色、煙霧、閃光或響聲等現(xiàn)象出現(xiàn),可據(jù)此鑒別其真?zhèn)紊踔羶?yōu)劣。如:
1)麝香少許用火燒時(shí)有輕微的爆鳴聲,起油點(diǎn)似珠,濃香四溢,灰燼白色;
2)海金沙易點(diǎn)燃并產(chǎn)生爆鳴聲及閃光,而松花粉及蒲黃無(wú)此現(xiàn)象,可資鑒別。(2)飲片的形狀、大小、表面特征、色澤、質(zhì)地、折斷面、氣、味
飲片系指藥材經(jīng)炮制后,可直接用于中醫(yī)臨床或制劑生產(chǎn)使用的處方藥品,又稱“咀片”。中藥飲片的性狀鑒定內(nèi)容與藥材性狀鑒定內(nèi)容一致,但中藥飲片與完整藥材相比,改變了形狀、大小、顏色甚至氣味。1形狀
不同類別藥材有各自形狀。
1)根、根莖大多圓形或橢圓形,如甘草、大血藤;
2)草本莖多段狀,如圓柱形(金錢(qián)草)、方柱形(薄荷)、中空有節(jié)(淡竹葉)
3)皮類常彎曲或卷曲的條片狀,如肉桂、厚樸;
4)葉類一般為絲條狀(枇杷葉);保持原狀(番瀉葉),皺縮狀(艾葉);碎片狀(桑葉)。
5)果實(shí)、種子一般為類圓球形,如五味子飲片,扁圓形如酸棗仁飲片,心形如苦杏仁飲片等,大者常切成類圓形片狀等,如木瓜飲片、檳榔飲片。
2大小 《中國(guó)藥典》2010年版一部的規(guī)定,飲片的規(guī)格有片、段、塊、絲:
1)0.5mm以下為極薄片,
2)1~2mm為薄片,
3)2~4mm為厚片;
4)短段:5—10cm,
5)長(zhǎng)段:10~15mm;
6)塊:8~12mm的方塊;
7)細(xì)絲寬2~3mm,
表面是飲片最具鑒別特征的地方,切片的飲片可分為外表面和切面。
一、外表面:
1)有的光滑;
2)有的粗糙;
3)有的鱗片狀剝落(如苦參);
4)根莖類有的呈環(huán)狀橫紋、須根及鱗葉殘痕,如黃連、石菖蒲、香附。
二、切面:
飲片的切面大多為橫切面,特征較多:雙子葉植物根、根莖等,有環(huán)狀形成層,呈放射狀列的維管束:
1)飲片切面呈環(huán)紋和放射狀紋理,如丹參、羌活;
2)放射狀紋理“菊花心”,如黃芪、甘草;
3)“車輪紋”,如防己、大血藤;
4)“金井玉欄”切面皮部白色,木部黃色,如黃芪、板藍(lán)根、桔梗。
三、觀察飲片切面應(yīng)注意區(qū)分雙子葉植物、單子葉植物及蕨類植物:
1)單子葉植物根、根莖為內(nèi)皮層環(huán),不具放射狀紋理,中柱小或維管束散列切面中心呈小木心,如麥冬。或散在的筋脈點(diǎn),如莪術(shù)。
2)雙子葉植物根根莖,單子葉植物根切面具髓,如黃連、天冬;雙子葉植物根,單子葉植物根莖切面中央一般無(wú)髓;如桔梗、知母。
3)有的中藥飲片具異常構(gòu)造如牛膝、川牛膝,具同心環(huán)狀排列的筋脈點(diǎn),商陸飲片切面上顯“羅盤(pán)紋”;何首烏飲片切面上顯“云錦狀花紋”,大黃根莖飲片髓部具多數(shù)“星點(diǎn)”等。
4)蕨類植物根莖葉柄基部的中柱有一定形狀或分體中柱環(huán)列,如狗脊根莖飲片中柱呈圓形環(huán),紫萁貫眾飲片葉柄基部中柱“U”字形,綿馬貫眾飲片葉柄基部分體中柱環(huán)列等。
5)木質(zhì)藤本植物導(dǎo)管較粗大,飲片切面上呈小孔洞,如川木通飲片。皮類中藥有的干皮組織中纖維束和薄壁組織相間排列,折斷面顯層狀結(jié)構(gòu),如黃柏飲片、秦皮飲片。
6) 分泌組織在切面上也是重要的識(shí)別特征,如人參、西洋參、五加皮具樹(shù)脂道,飲片皮部具棕黃色小點(diǎn);蒼術(shù)具大型油室,飲片顯“朱砂點(diǎn)”;雞血藤具分泌細(xì)胞,飲片皮部有樹(shù)脂樣紅棕色分泌物等。
4色澤
細(xì)胞所含成分不同,顏色各有異。丹參色紅,紫草色紫,玄參色黑,黃柏色黃;黃連色紅黃;麻黃切面有朱砂心,檳榔切面有大理石花紋。5質(zhì)地
飲片的質(zhì)地與細(xì)胞組織的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞中所含的成分有一定的關(guān)系,常有硬、脆、實(shí)、輕、重、松、粘、粉、韌、角質(zhì)等區(qū)別。
1)以薄壁組織為主,結(jié)構(gòu)較疏松的飲片一般較脆,如丹參飲片、甘松飲片;
2)以薄壁組織為主,結(jié)構(gòu)較酥松,空隙大的飲片一般較松泡,如南沙參飲片、生曬山參飲片;
3)淀粉多的飲片呈粉性,如山藥飲片、半夏飲片;
4)淀粉多、結(jié)構(gòu)緊密的飲片一般較重實(shí),如大黃飲片、川芎飲片;
5)纖維多的飲片則韌性強(qiáng),如葛根飲片、桑白皮飲片;
6)含糖、黏液多的飲片一般粘性大,如地黃飲片、黃精飲片;
7)富含淀粉、多糖成分的飲片經(jīng)蒸煮糊化干燥后呈角質(zhì)狀,如紅參飲片、延胡索飲片、天麻飲片等。6折斷面
常有平坦、纖維性、顆粒性、分層、刺狀、粉塵飛揚(yáng)、海綿狀、膠絲等,同樣與細(xì)胞組織的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞中的后含物有著密切的關(guān)系。
1)以薄壁組織、淀粉為主的飲片折斷面一般較平坦,如牡丹皮飲片;
2)含纖維多的飲片具纖維性,如厚樸飲片;
3)含石細(xì)胞多的飲片呈顆粒性,如木瓜飲片;
4)纖維束或石細(xì)胞群與薄壁組織相間排列,即有硬韌部與軟韌部之分,飲片?,F(xiàn)層狀裂隙,可層層剝離,如苦楝皮、黃柏的飲片;
5)木類中藥主要由木纖維組成,質(zhì)硬,飲片折斷面常呈刺狀,如沉香、蘇木的飲片;
6)含淀粉多的飲片折斷時(shí)粉塵飛揚(yáng),如山藥、川貝母的飲片;
7)含硬橡膠的飲片折斷時(shí)有白色膠絲,如杜仲飲片。7氣
飲片的氣和味常因其含不同的化學(xué)成分而有所不同。
1)木蘭科、傘形科、唇形科、姜科等的中藥飲片常因含揮發(fā)油,有明顯而特殊的香氣,如辛夷、厚樸、白芷、川芎、當(dāng)歸、薄荷、廣藿香、紫蘇、干姜的飲片等。
2)五加科植物組織中具樹(shù)脂道,如五加皮、人參的飲片。
3)花類中藥常具蜜腺和含揮發(fā)油,香氣宜人,如月季花、玫瑰花、金銀花、菊花的飲片等。
4)木類飲片大多有樹(shù)脂及揮發(fā)油而有特殊香氣,如沉香、檀香、降香的飲片等。
5)有的飲片中含有的成分具香氣,如牡丹皮、徐長(zhǎng)卿的飲片所含的牡丹酚有特殊香氣,香加皮飲片中的甲氧基水楊醛等成分具奶油話梅樣香氣。
6)氣與飲片的炮制方法、制用的輔料有關(guān),如酒制的飲片有酒氣;炒炭的飲片有焦香氣等。8味
味是中藥口嘗的味覺(jué),常有酸、甜、苦、辣、咸、澀、淡等。
1)木瓜、烏梅飲片含有機(jī)酸而味極酸;
2)枸杞子含糖、甘草含甘草甜素而味甜;
3)穿心蓮含穿心蓮內(nèi)酯而味極苦;
4)干姜含姜辣素而味辣;
5)海藻飲片含鉀鹽而味咸;
6)地榆、五倍子、檳榔的飲片含鞣質(zhì)而味澀;
7)五味子果肉味酸,種子破碎后味辛而微苦。
8)味與飲片的炮制方法有關(guān),如鹽制法的飲片,常有咸味;蜜制法的飲片常有甜味;醋制法的飲片常有醋酸味等。(3)藥材和飲片性狀鑒別名詞術(shù)語(yǔ)
詳見(jiàn)內(nèi)容中。
3.顯微鑒定法
(1)顯微制片方法
1橫切面或縱切面制片
取完整的藥材觀察面,軟化后用徒手或滑走切片法,切片成10—20μm2表面制片
供試品濕潤(rùn)軟化,切取或撕取表皮。3粉末制片
供試品粉末過(guò)4號(hào)篩。4解離組織片
對(duì)一些富含纖維、石細(xì)胞、導(dǎo)管、管胞,細(xì)胞彼此不易分離的組織,常需使用化學(xué)試劑溶解細(xì)胞之間的胞間層,使細(xì)胞離散,以便觀察細(xì)胞的完整形態(tài)。供試品切片應(yīng)為5x2x1mm,供試品中薄壁組織占大部分,木化組織少或分散存在,可用氫氧化鉀法;如果供試品質(zhì)地堅(jiān)硬,木化組織較多或集成較大群束,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。5花粉粒與孢子制片
用于花粉、花藥和孢子粉。干燥供試品用冰醋酸軟化。6磨片制片
堅(jiān)硬的礦物藥、動(dòng)物藥,可采用磨片法制片,供試品為1-2mm。7含飲片粉末的中成藥顯微制片
1)散劑、膠囊直接取粉末;
2)片劑1-2片;
3)水丸、糊丸數(shù)粒;
4)錠劑1-2錠;
5)蜜丸切開(kāi)取中央部分。
(2)植物細(xì)胞壁和細(xì)胞后含物性質(zhì)的鑒別
1細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒別1)木質(zhì)化細(xì)胞壁 加間苯三酚試液1~2滴,稍放置,加鹽酸1滴,因木化程度不同,顯紅色或紫紅色。
2)木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁 加蘇丹Ⅲ試液,稍放置或微熱,顯橘紅色至紅色。
3)纖維素細(xì)胞壁 加氯化鋅碘試液,或先加碘試液濕潤(rùn)后,稍放置,再加硫酸溶液(33-50),顯藍(lán)色或紫色。
4)硅質(zhì)化細(xì)胞壁 加硫酸無(wú)變化。
2細(xì)胞后含物性質(zhì)的鑒別
1)淀粉粒
①加碘試液,顯藍(lán)色或紫色。
②用甘油醋酸試液裝片,置偏光顯微鏡下觀察,未糊化的淀粉粒顯偏光現(xiàn)象;已糊化的無(wú)偏光現(xiàn)象。2)糊粉粒
①加碘試液,顯棕色或黃棕色。
②加硝酸汞試液,顯磚紅色。材料中如含有多量脂肪油,宜先用乙醚或石油醚脫脂后進(jìn)行試驗(yàn)。3)脂肪油、揮發(fā)油或樹(shù)脂
①加蘇丹Ⅲ試液,顯橘紅色、紅色或紫紅色。
②加90%乙醇,脂肪油和樹(shù)脂不溶解(蓖麻油及巴豆油例外),揮發(fā)油則溶解。4)菊糖
加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸,顯紫紅色并很快溶解。5)黏液
①加稀醋酸不溶解,加稀鹽酸溶解而無(wú)氣泡發(fā)生。
②加硫酸溶液(1-2),逐漸溶解,片刻后析出針狀硫酸鈣結(jié)晶。7)碳酸鈣結(jié)晶(鐘乳體)
加稀鹽酸溶解,同時(shí)有氣泡發(fā)生。
8)硅質(zhì)
1在顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞及細(xì)胞后含物的大小??捎媚跨R測(cè)微尺。測(cè)量時(shí),以目鏡測(cè)微尺測(cè)量目的物的小格數(shù),乘以每小格代表的長(zhǎng)度(μm)即得。
2較長(zhǎng)的纖維、導(dǎo)管、非腺毛的長(zhǎng)度,可用低倍物鏡更方便。(4)顯微臨時(shí)制片常用封藏試液
1蒸餾水、稀甘油
適用于觀察淀粉粒、油滴、樹(shù)脂等細(xì)胞后含物及細(xì)胞壁的顏色。經(jīng)水合氯醛透化的切片或粉末,加稀甘油1滴,可防止水合氯醛析出結(jié)晶,并使切片透明。2甘油醋酸試液
為常用封藏劑,使淀粉粒不膨脹變性,特別適宜淀粉粒的觀察與顯微測(cè)量。3水合氯醛試液
為最常用的透化劑。切片或中藥粉末加水合氯醛液并適當(dāng)加熱處理,可使皺縮的細(xì)胞膨脹,并可溶解多種色素,如葉綠素等以及樹(shù)脂、淀粉粒、蛋白質(zhì)、菊糖、揮發(fā)油,而各種晶體不溶解。有清潔、透明作用,使細(xì)胞、組織透明、清晰,便于觀察細(xì)胞形狀和組織構(gòu)造及細(xì)胞內(nèi)含的各種結(jié)晶體。(5)掃描電子顯微鏡和偏光顯微鏡的應(yīng)用
1電子顯微鏡(簡(jiǎn)稱電鏡) 掃描電鏡已廣泛應(yīng)用于生物樣品表面及其斷面立體形貌的觀察。2偏光顯微鏡 主要用于觀察和分析礦物類中藥的光學(xué)性質(zhì),用于鑒定礦物類中藥。
4.理化鑒定法
(1)物理常數(shù)的測(cè)定
1)包括相對(duì)密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸點(diǎn)、凝固點(diǎn)、熔點(diǎn)等的測(cè)定。
2)對(duì)揮發(fā)油類、油脂類、樹(shù)脂類、液體類藥(如蜂蜜等)和加工品類(如阿膠等)藥材的真實(shí)性和純度的鑒定具有特別重要的意義。
3)藥材中如摻有其他物質(zhì)時(shí),物理常數(shù)就會(huì)隨之改變,如《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定蜂蜜的相對(duì)密度在1.349以上,蜂蜜中摻水就會(huì)影響?zhàn)こ矶龋瓜鄬?duì)密度降低。(2)一般理化鑒別
1化學(xué)定性分析
利用中藥的化學(xué)成分能與某些試劑產(chǎn)生特殊的氣、味、顏色、沉淀或結(jié)晶來(lái)辨別中藥的真?zhèn)巍?p style="text-align: left;">2中藥的膨脹度
膨脹度是藥品膨脹性質(zhì)的指標(biāo),系指按干燥品計(jì)算,每1g藥品在水或者其他規(guī)定的溶劑中,在一定時(shí)間與溫度條件下膨脹所占有的體積(ml)。主要用于含黏液質(zhì)、膠質(zhì)和半纖維素類中藥的真?zhèn)魏唾|(zhì)量控制。如:
1)南葶藶子和北葶藶子外形不易區(qū)分,北葶藶子膨脹度不低于12,南葶藶子膨脹度不低于3,兩者的膨脹度差別較大,通過(guò)測(cè)定比較可以區(qū)別二者。又如哈蟆油膨脹度不得低于55,偽品的膨脹度遠(yuǎn)低于此,可資區(qū)別。
2)膨脹度同時(shí)也是對(duì)中藥質(zhì)量?jī)?yōu)良度的一種評(píng)判方法,如哈蟆油和車前子正品一般膨脹度越大,其質(zhì)量越好。
3微量升華
是利用中藥中所含的某些化學(xué)成分,在一定溫度下能升華的性質(zhì),獲得升華物,在顯微鏡下觀察其結(jié)晶形狀、色澤,或取升華物加某種試液觀察其反應(yīng)來(lái)進(jìn)行鑒別。如:
1)大黃粉末升華物為黃色針狀、片狀或羽毛狀結(jié)晶,在結(jié)晶上加堿試液顯紅色,確證其為蒽醌類化合物;
2)斑蝥升華物(在30~140℃)為白色柱狀或小片狀結(jié)晶(斑蝥素),加堿液溶解,再加酸液又析出結(jié)晶等。4熒光分析
是利用中藥中所含的某些化學(xué)成分,在紫外光或常光下能產(chǎn)生一定顏色的熒光的性質(zhì)進(jìn)行鑒別。除另有規(guī)定外,紫外光燈的波長(zhǎng)為365nm,如用短波(254~265 nm)時(shí),應(yīng)加以說(shuō)明。如:
1)黃連折斷面在紫外光燈下顯金黃色熒光,木質(zhì)部尤為明顯;
2)秦皮的水浸出液在自然光下顯碧藍(lán)色熒光。
3)有些中藥本身不產(chǎn)生熒光,但用酸、堿或其他化學(xué)方法處理后,可使某些成分在紫外光燈下產(chǎn)生可見(jiàn)熒光,例如蘆薈水溶液與硼砂共熱,即起反應(yīng)顯黃綠色熒光。5顯微化學(xué)分析
利用顯微和化學(xué)方法,確定中藥有效成分在中藥組織構(gòu)造中的部位,稱顯微化學(xué)定位試驗(yàn)。
1)丁香切片滴加3%NaOH的NaCl飽和溶液,油室內(nèi)有針狀丁香酚鈉析出。
2)北柴胡加1滴無(wú)水乙醇-濃硫酸(1:1)液,可見(jiàn)木栓層、栓內(nèi)層和皮層呈黃綠色至藍(lán)綠色,表示有效成分柴胡皂苷位于此。 6泡沫指數(shù)和溶血指數(shù)的測(cè)定
利用皂苷的水溶液振搖后能產(chǎn)生持久性的泡沫和溶解紅細(xì)胞的性質(zhì),可測(cè)定含皂苷類成分藥材的泡沫指數(shù)或溶血指數(shù)作為質(zhì)量指標(biāo)。如《中國(guó)藥典》2010年版一部用泡沫反應(yīng)鑒別豬牙皂。(3)色譜法
色譜法根據(jù)分離方法分為:紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、電泳色譜法等。1薄層色譜法
1)《中國(guó)藥典》規(guī)定除設(shè)化學(xué)對(duì)照品外,同時(shí)還設(shè)對(duì)照藥材作對(duì)照,如黃連、黃柏、人參等。2)快速、簡(jiǎn)便和靈敏,是目前中藥鑒定中用于定性鑒別使用最多的色譜法之一。
2高效液相色譜法
1)具有分離效能高、分離速度快、靈敏度和準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)等特點(diǎn);
2)因該法不受樣品揮發(fā)性的約束,對(duì)低揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差、高分子化合物和離子型化合物均較適合。
3)既可用于定性鑒別又可用于定量分析,現(xiàn)已成為中藥含量測(cè)定方法的首選和主流。3氣相色譜法
1)適用于含揮發(fā)油及其他揮發(fā)性成分的藥材及中成藥的分析;
2)用于藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查、水分測(cè)定、農(nóng)藥殘留量測(cè)定和含量測(cè)定。4電泳色譜法
動(dòng)物類、果實(shí)種子類及根莖類等含蛋白質(zhì)及氨基酸類成分的藥材,已用該法成功地進(jìn)行真?zhèn)舞b別。
(4)分光光度法
分光光度法包括紫外-可見(jiàn)分光光度法、紅外分光光度法和原子吸收分光光度法。1紫外-可見(jiàn)分光光度法
1)靈敏、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確;
2)既可作定性分析又可作含量測(cè)定等優(yōu)點(diǎn);
3)適用于大類成分的含量測(cè)定,如總黃酮、總生物堿、總蒽醌等。
4)《中國(guó)藥典》2010年版一部有37種中藥用本法進(jìn)行含量測(cè)定。2紅外分光光度法
主要用于鑒別中藥真?zhèn)蝺?yōu)劣。 3原子吸收分光光度法
1)專屬性強(qiáng),檢測(cè)靈敏度和精度均高,測(cè)定速度快;
2)用于測(cè)定中藥中重金屬及有害元素、微量元素最常用的方法?!吨袊?guó)藥典》2010年版一部就采用本法進(jìn)行重金屬及有害元素限量檢查。(5)色譜、光譜和質(zhì)譜聯(lián)用分析法
1)具有色譜的高分離和質(zhì)譜的高鑒別能力;
2)在含揮發(fā)油成分的中藥已廣泛應(yīng);
3)質(zhì)譜-質(zhì)譜儀不需對(duì)中藥分離,可對(duì)粉末直接進(jìn)樣鑒定。
4)《中國(guó)藥典》2010版一部用液相色譜-質(zhì)譜連儀對(duì)國(guó)產(chǎn)千里光、川楝子、苦楝皮中的毒性進(jìn)行了限量檢查,解決了常規(guī)測(cè)定無(wú)法解決的問(wèn)題。
5.其他鑒定方法和技術(shù)簡(jiǎn)介
(1)DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)
1DNA分子由 G、A、C、T四種堿基構(gòu)成,為雙螺旋結(jié)構(gòu)的長(zhǎng)鏈狀分子。
2中藥常用的DNA分子標(biāo)記技術(shù)種類有:限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性、擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記。
3DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用:
1)近緣中藥品種的鑒定和整理研究;
2)動(dòng)物類中藥的鑒定;
3)名貴中藥與混偽品的鑒定;
4)道地藥材的鑒定;
5)中藥野生品與栽培;
1概念與意義建立中藥指紋圖譜的目的是為了全面反映中藥所含內(nèi)在化學(xué)成分的種類和相對(duì)含量,進(jìn)而反映中藥的整體質(zhì)量。中藥指紋圖譜能客觀地揭示和反映中藥內(nèi)在質(zhì)量的整體性和特征性,可用以評(píng)價(jià)中藥的真實(shí)性、有效性、穩(wěn)定性和一致性。
2分類
狹義的中藥指紋圖譜是指中藥化學(xué)(成分)指紋圖譜,廣義的中藥指紋圖譜則可按應(yīng)用對(duì)象、測(cè)定手段不同進(jìn)行分類。
1)按應(yīng)用對(duì)象分類
可分為中藥材指紋圖譜、中藥原料藥(包括飲片、配方顆粒)指紋圖譜、中藥制劑工藝生產(chǎn)過(guò)程中的中間產(chǎn)物指紋圖譜及中藥制劑指紋圖譜等。2)按測(cè)定手段分類 可分為中藥化學(xué)(成分)指紋圖譜和中藥生物指紋圖譜。目前在中藥質(zhì)量控制方面以中藥化學(xué)(成分)指紋圖譜中的色譜指紋圖譜為首選方法,如高效液相色譜指紋圖譜、氣相色譜指紋圖譜、薄層掃描指紋圖譜和高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜等。
3技術(shù)要求
1)供試品的收集不得少于10批,且固定品種、產(chǎn)地、藥用部位、采收期、加工炮制等——先決條件。
2)對(duì)藥材和復(fù)方制劑君藥的活性成分應(yīng)盡量選擇對(duì)照品作為參照物。
3)供試品的制備必須確保中藥的主要化學(xué)成分。
4)適宜的檢測(cè)方法是制定指紋圖譜的重要環(huán)節(jié),高效液相色譜法已成為中藥指紋圖譜技術(shù)的首選方法。
5)采用高效液相色譜。氣相色譜法制定指紋圖譜,指紋圖譜記錄時(shí)間一般為1-2小時(shí),
6)在標(biāo)定共有峰時(shí),應(yīng)選擇10批以上供試品中都出現(xiàn)的色譜峰為共有峰,非共有峰的面積不得大總峰的10%
(3)中藥生物活性測(cè)定法
1生物活性測(cè)定法是以藥物的生物效應(yīng)為基礎(chǔ),以生物統(tǒng)計(jì)為工具,運(yùn)用特定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),測(cè)定藥物有效性的一種方法,從而達(dá)到控制藥物質(zhì)量的作用。其測(cè)定方法包括生物效價(jià)測(cè)定法和生物活性限制測(cè)定法等。
2通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)品和供試品對(duì)生物體的特定生物效應(yīng),從而控制和評(píng)價(jià)供試品的質(zhì)量或活性的一種方法?!吨袊?guó)藥典》2005版和2010版中,水蛭就采用了生物效價(jià)檢測(cè)方法控制其質(zhì)量。
(五)中藥鑒定的內(nèi)容
1.中藥的真實(shí)性鑒定真實(shí)性鑒定的常用方法
1來(lái)源鑒定法
2性狀鑒定法
3顯微鑒定法
4理化鑒定法
2.中藥的安全性檢測(cè)
(1)內(nèi)源性有毒、有害物質(zhì)及檢測(cè)
1中藥中主要的內(nèi)源性有毒、有害物質(zhì)1)是指中藥本身所含的具有毒副作用的化學(xué)成分,大多為生物的次生代謝產(chǎn)物,如生物堿、苷類;
2)礦物類有汞類、砷類、鉛類、銅類等化合物;
3)肝腎毒性和胚胎毒性成分吡咯里西定生物堿,如千里光堿、野百合堿。4)腎毒性成分馬兜鈴酸,主要存在于馬兜鈴屬植物。在我國(guó)已取消了含馬兜鈴酸成分的關(guān)木通、廣防己、青木香的藥品標(biāo)準(zhǔn);而細(xì)辛也由以全草入藥,恢復(fù)到以根及根莖入藥,以保障臨床用藥的安全。
2國(guó)務(wù)院1988年公布了28種毒性中藥材:
1)植物藥:生馬錢(qián)子、生川烏、生草烏、生白附子、生附子、生半夏、生南星、生甘遂。生狼毒、生藤黃、雪上一支蒿、生巴豆、生千金子、生天仙子、鬧羊花、洋金花;
2)動(dòng)物藥:斑蝥、蟾酥、青娘蟲(chóng)、紅娘蟲(chóng);
3)礦物藥:砒石(紅砒、白砒)、砒霜、雄黃、水銀、紅粉、輕粉、紅升丹、白降丹。3中藥中主要的內(nèi)源性有毒、有害物質(zhì)的檢測(cè)
目前對(duì)中藥中肝毒性成分吡咯里西定生物堿、腎毒性成分馬兜鈴酸等,常用的檢測(cè)方法是高效液相色譜法、高效毛細(xì)管電泳及其與質(zhì)譜聯(lián)用的技術(shù)。
(2)外源性有害物質(zhì)及檢測(cè)(重金屬及有害元素、殘留農(nóng)藥、黃曲霉毒素、二氧化硫)
1中藥中的外源性有害物質(zhì)中藥中的外源性有害物質(zhì)主要包括重金屬及有害元素、殘留的農(nóng)藥、黃曲霉毒素、二氧化硫等。
2中藥中的外源性有害物質(zhì)的檢測(cè)
一、中藥中重金屬和有害元素的檢測(cè)
1)《中國(guó)藥典》2010年版一部規(guī)定,重金屬總量用硫代乙酰胺或硫化鈉顯色反應(yīng)比色法測(cè)定,砷鹽的檢測(cè)用古蔡氏法或二乙基二硫代氨基甲酸銀法兩種方法。
2)規(guī)定對(duì)單個(gè)鉛、鎘、汞、銅、砷元素的測(cè)定則使用原子吸收分光光度法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測(cè)定,并規(guī)定甘草、黃芪、丹參、白芍、西洋參、金銀花、阿膠等含鉛不得過(guò)百萬(wàn)分之五;鎘不得過(guò)千萬(wàn)分之三;汞不得過(guò)千萬(wàn)分之二;銅不得過(guò)百萬(wàn)分之二十;砷不得過(guò)百萬(wàn)分之二。
二、中藥中殘留農(nóng)藥的檢測(cè)
有機(jī)氯類、有機(jī)磷類、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類四大類農(nóng)藥。《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅸ Q收載“農(nóng)藥殘留量測(cè)定法”對(duì)有機(jī)氯類、有機(jī)磷類及擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥規(guī)定用氣相色譜法進(jìn)行檢測(cè)。
1)有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 有機(jī)氯農(nóng)藥的種類很多,其中滴滴涕(DDT)和六六六(BHC)是使用最久、數(shù)量最大的農(nóng)藥?!吨袊?guó)藥典》2010年版一部規(guī)定使用氣相色譜法測(cè)定中藥中六六六(總BHC)、滴滴涕(總DDT)及五氯硝基苯(PCNB)3類共9種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量,并對(duì)甘草和黃芪明確規(guī)定了有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留六六六(總BHC)不得過(guò)千萬(wàn)分之二、滴滴涕(總DDT)不得過(guò)千萬(wàn)分之二;五氯硝基苯(PCNB)不得過(guò)千萬(wàn)分之一。
2)有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 《中國(guó)藥典》2010年版一部規(guī)定使用氣相色譜法測(cè)定中藥中有機(jī)磷類農(nóng)藥如***、對(duì)硫磷、樂(lè)果、二嗪農(nóng)、久效磷等12種的殘留量。
3)除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 《中國(guó)藥典》2010年版一部規(guī)定使用氣相色譜法檢測(cè)氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯等3種在中藥中的殘留量。
三、黃曲霉毒素的檢測(cè)
1《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄IXV“黃曲霉毒素測(cè)定法”規(guī)定用高效液相色譜法測(cè)定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素(以黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、和黃曲霉毒素G2總量計(jì))。
2《中國(guó)藥典》并對(duì)桃仁、陳皮進(jìn)行限量檢查:
1)規(guī)定二者1000g含黃曲霉毒素B1不得超過(guò)5μg;
2)含黃曲霉毒素G2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素B1的總量不得超過(guò)10μg 四、二氧化硫的檢測(cè)
1《中國(guó)藥典》2005年規(guī)定不使用熏硫法;
2《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄IXV“二氧化硫殘留量測(cè)定法”規(guī)定用蒸餾法測(cè)定硫磺熏蒸處理過(guò)的藥材、飲片的二氧化硫殘留量?! ?/span>
3.中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)
(1)經(jīng)驗(yàn)鑒別
1“關(guān)防風(fēng)”以其“蚯蚓頭,質(zhì)松泡”為道地;
2茅蒼術(shù)以“斷面朱砂點(diǎn)多,香氣濃者為佳”。(2)純度檢查(雜質(zhì)、水分、灰分、色度檢查、酸敗度等)
《中國(guó)藥典》與中藥純度相關(guān)的檢查主要包括雜質(zhì)檢查、水分測(cè)定、干燥失重、灰分測(cè)定、色度檢查、酸敗度測(cè)定等,并已成為中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)中的常規(guī)檢查項(xiàng)。1雜質(zhì)檢查
《中國(guó)藥典》2010版規(guī)定廣霍香雜質(zhì)不得超過(guò)2%,金錢(qián)草雜質(zhì)不得超過(guò)8%
2水分測(cè)定
《中國(guó)藥典》2010版規(guī)定水分的限量:牛黃不得超過(guò)9.0%;人參不得超過(guò)12.0%;紅花不得超過(guò)13.0%;阿膠不得超過(guò)15.0%3灰分測(cè)定
《中國(guó)藥典》2010版作了限量規(guī)定:當(dāng)歸總灰分不得超過(guò)7.0%,酸不溶性灰分不得超過(guò)2.0%;秦艽總灰分不得超過(guò)8.0%,酸不溶性灰分不得超過(guò)3.0%
4酸敗度測(cè)定
1)油脂類或含油脂的種子類藥材和飲片,在貯藏過(guò)程中容易發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)變化,產(chǎn)生游離脂肪酸、過(guò)氧化物和低分子醛類、酮類等分解產(chǎn)物,因而出現(xiàn)特異臭味,這種現(xiàn)象稱酸敗。2)《中國(guó)藥典》2010年版一部規(guī)定,苦杏仁的過(guò)氧化值不得超過(guò)0.11;郁李仁的酸值不得過(guò)10.0、羰基值不得過(guò)3.0、過(guò)氧化值不得過(guò)0.050;薄荷素油的酸值不得大于1.5
5色度檢查
1)含揮發(fā)油類成分的中藥,在貯藏過(guò)程常發(fā)生易氧化,聚合、縮合而致變色或“走油”。許多中藥目前僅靠感官評(píng)判變色與“走油”程度,缺乏量化指標(biāo)。
2)《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定檢查白術(shù)的色度。利用白術(shù)的酸性乙醇提取液與黃色9號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液比較,不得更深。(3)與藥效相關(guān)的定量分析(含葉量的檢查、浸出物測(cè)定、含量測(cè)定)
1含葉量的檢查
《中國(guó)藥典》2010年版一部規(guī)定穿心蓮藥材葉不得少于30%,薄荷藥材葉不得少于30%,廣藿香藥材不得少于20%等,從而保證這些藥材和飲片的總體質(zhì)量。2浸出物測(cè)定
1)《中國(guó)藥典》2010版規(guī)定:麥冬的水溶性浸出物(冷浸法)不得低于60.0%;黨參的45%乙醇浸出物(熱浸法)不得低于55.0%;遠(yuǎn)志70%乙醇浸出物(熱浸法)不得低于30.0%
2)《中國(guó)藥典》2010年版一部規(guī)定,浸出物測(cè)定法有3種:
① 水溶性浸出物測(cè)定法,分為冷浸法和熱浸法。
② 醇溶性浸出物測(cè)定法,亦分為冷浸法和熱浸法。
③ 揮發(fā)性醚溶性浸出物測(cè)定法。3含量測(cè)定
1)常用方法包括揮發(fā)油含量測(cè)定法和有效成分(指標(biāo)性成分)含量測(cè)定方法。
2)《中國(guó)藥典》規(guī)定揮發(fā)油測(cè)定分為甲法、乙法:甲法適于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以下的揮發(fā)油;乙法測(cè)定密度在1.0以上的揮發(fā)油