補(bǔ)體的檢測及應(yīng)用

Δ 補(bǔ)體Complement

是存在于人和動(dòng)物血清中的一組具有酶活性的球蛋白，一般情況下處于未激活狀態(tài)

Δ 補(bǔ)體的特性

穩(wěn)定性差，各種理化因素都可使之失活：如酸、堿、紫外線照射、劇烈震蕩等

實(shí)驗(yàn)室滅活補(bǔ)體的條件為：56℃30‘，室溫2~3天也可自然失活

補(bǔ)體檢測必須用新鮮血清

Δ 補(bǔ)體的組成

1.補(bǔ)體的固有成分：C1-C9，其中C1又包括C1q、C1r、C1s，共9種成分11種蛋白分子。其中C9的分子量最小、C3的含量最高

2.補(bǔ)體的調(diào)節(jié)蛋白：如C4調(diào)節(jié)蛋白、C1抑制物、S蛋白等

3.補(bǔ)體受體：如C1qR、C3aR等

Δ 補(bǔ)體的激活：三條途徑

經(jīng)典激活途徑：又稱C1途徑

激活劑：IgG、IgM形成的AgAb復(fù)合物

參與成分：C1~C9

激活過程：這是一個(gè)連鎖反應(yīng)，缺少其中任何一個(gè)組分，連鎖反應(yīng)都不能進(jìn)行下去

旁路激活途徑：又稱C3途徑

激活劑：脂多糖、酵母多糖、IgG4和IgA的聚合物（提供接觸表面）

參與成分：C3、C5~C9、B因子、D因子、P因子

甘露糖結(jié)合凝集素途徑：又稱MBL途徑

在感染早期，常采用前兩個(gè)途徑，產(chǎn)生Ab后采用第一個(gè)途徑

Δ 補(bǔ)體的生物學(xué)作用

溶菌、溶細(xì)胞作用（MAC效應(yīng)）；調(diào)理作用（C3b、C4b和iC3b）；免疫黏附作用（C3b、C4b）；炎癥介質(zhì)作用：趨化作用（C3a，C5a）過敏毒素作用（C3a，C4a，C5a）

Δ 補(bǔ)體的檢測

功能檢測：總補(bǔ)體活性的檢測、單一補(bǔ)體活性的檢測（溶血試驗(yàn)）

量的檢測：單一補(bǔ)體量的檢測（免疫比濁法或單擴(kuò)法）

Δ 溶血試驗(yàn)

SRBC+兔抗SRBC抗體（溶血素）+新鮮血清（提供補(bǔ)體）——啟動(dòng)經(jīng)典激活途徑（溶血）

指示系統(tǒng)：綿羊紅細(xì)胞和溶血素

補(bǔ)體來源：多只豚鼠的混合血清

Δ 總補(bǔ)體活性檢測：CH50試驗(yàn)

原理：組成和功能完整的補(bǔ)體系統(tǒng)能使致敏羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血；羊紅細(xì)胞的溶血程度與補(bǔ)體的活性成正比

概念：在50%溶血附近（30%-70%之間），稍微改變補(bǔ)體量，溶血程度變化明顯，因此以50%溶血率來判定終點(diǎn)較100%更為敏感

檢測結(jié)果處理：最后找到與制備好的50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管比較，取吸光度值最接近的一管，則CH50（U/ml）=1/血清用量X稀釋倍數(shù)

總補(bǔ)體活性參考范圍：50-100U/ml

Δ 單一補(bǔ)體活性的檢測（溶血試驗(yàn)），常用于檢測C3、C4、C1q、B因子等

Δ 單一補(bǔ)體量的測定：采用免疫比濁法或單擴(kuò)法，常檢測C3（含量1200~1300ug/ml）

Δ 補(bǔ)體檢測的臨床意義

1.補(bǔ)體量↑：多見于急性炎癥感染、組織損傷、癌腫