流感嗜血桿菌知識(shí)匯總-檢驗(yàn)士資料：

生物學(xué)性狀：

流感嗜血桿菌，簡稱流感桿菌。

（1）形態(tài)與染色：急性感染標(biāo)本上，如腦脊液中多為短小球桿菌醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理，恢復(fù)期病灶或長期人工傳代培養(yǎng)后可呈球桿狀、長稈狀、絲狀等多形態(tài)性。

毒力株（黏液型菌株）在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上，6-8小時(shí)有明顯莢膜，在陳舊培養(yǎng)物中莢膜消失。

無鞭毛，無芽孢。革蘭染色陰性，但著色較淺。用苯酚復(fù)紅或亞甲蘭單染色，呈現(xiàn)兩端濃染現(xiàn)象。

（2）培養(yǎng)特性：需氧菌。最適生長溫度為35℃，最適pH為7.6-7.8.初次分離培養(yǎng)最好在5%-10%CO2環(huán)境中，以促進(jìn)其生長。

在普通培養(yǎng)基中需加入X和V因子才能生長。血液中的V因子通常處于抑制狀態(tài)，經(jīng)80-90℃加熱10分鐘，使V因子釋放，故流感嗜血桿菌在加熱血平板上生長良好，培養(yǎng)18-24小時(shí)后生長直徑為0.5-0.8mm、圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊，呈露滴狀的小菌落。48小時(shí)后可形成直徑1.0-1.5mm灰白色較大的菌落。有莢膜菌株的菌落呈輕度粘稠。

當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上共同培養(yǎng)時(shí)，金黃色葡萄球菌能合成較多V因子，可促使流感嗜血桿菌生長。故在金黃色葡萄球菌落周圍生長的流感嗜血桿菌菌落較大，離金黃色葡萄球菌落越遠(yuǎn)的菌落越小，此稱為衛(wèi)星現(xiàn)象。有助于流感嗜血桿菌菌的鑒定。

在液體培養(yǎng)基中，有莢膜的菌株呈均勻渾濁生長，無莢膜的R型菌株則為顆粒狀沉淀生長。

（3）生化反應(yīng)：流感嗜血桿菌對(duì)糖發(fā)酵不穩(wěn)定。一般分解葡萄糖只產(chǎn)酸，不分解乳糖或甘露醇，對(duì)麥芽糖、蔗糖或糊精的發(fā)酵不穩(wěn)定。所有菌株還原硝酸鹽。有莢膜菌株產(chǎn)生吲哚。典型菌株不溶血。產(chǎn)生自溶酶，可被膽汁溶解。根據(jù)流感嗜血桿菌產(chǎn)生吲哚，尿酸酶及鳥氨酸脫羧酶反應(yīng)，將其分為8個(gè)生化型。

致病性：

主要通過呼吸道感染，引起原發(fā)性或繼發(fā)性感染。原發(fā)性感染多由b型莢膜強(qiáng)毒株引起，為急性化膿感染，如腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會(huì)厭炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、心包炎及敗血癥。繼發(fā)感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺結(jié)核等感染后發(fā)生，多為無莢膜菌株引起。如慢性支氣管炎、中耳炎、鼻竇炎、肺炎等。

致病物質(zhì)為內(nèi)毒素、莢膜、菌毛和酶類。

微生物檢驗(yàn)：

（1）標(biāo)本采集：可采集痰液、腦脊液、鼻咽分泌物及膿液等。

（2）檢驗(yàn)方法：

1）直接鏡檢：痰液、膿液等標(biāo)本可直接涂片，腦脊液可取離心沉淀物涂片，革蘭染色鏡檢。如查到革蘭陰性小桿菌或多形態(tài)桿菌，結(jié)合臨床，可做初步診斷。

2）分離培養(yǎng)與鑒定：將血液、腦脊液標(biāo)本先增菌培養(yǎng)后，再轉(zhuǎn)種巧克力瓊脂平板或選擇性巧克力瓊脂平板，經(jīng)37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)。根據(jù)菌落形態(tài)、涂片染色、衛(wèi)星現(xiàn)象，X、V因子需求與否，定種，再作生化試驗(yàn)和莢膜腫脹試驗(yàn)分型。

3）如何提高流感嗜血桿菌的陽性率：

①初次培養(yǎng)應(yīng)在5%-10%CO2環(huán)境；

②生長需要X、V因子，故在培養(yǎng)基中應(yīng)添加此因子；

③應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基，如巧克力瓊脂中加一定量抗生素，1ml培養(yǎng)基中含萬古霉素50μg，桿菌肽300μg，克林可霉素1μg，嗜血桿菌分離率可達(dá)96.7%.