化學(xué)致突變物的檢測(cè)是公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師衛(wèi)生毒理學(xué)要求掌握的內(nèi)容，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。

　　化學(xué)致突變物的檢測(cè)所觀察的現(xiàn)象并不一定就是三類遺傳學(xué)損傷，而可能是致突變過程中發(fā)生的其他作用（事件）。

　?。ㄒ唬┲峦蛔?cè)囼?yàn)的遺傳學(xué)終點(diǎn)和試驗(yàn)組合的選擇

　　將致突變?cè)囼?yàn)觀察到的現(xiàn)象所反映的各種遺傳學(xué)事件稱為遺傳學(xué)終點(diǎn)。遺傳學(xué)終點(diǎn)分為4類：①基因突變；②染色體畸變；③不分離；④原發(fā)性DNA損傷。

　　成組試驗(yàn)組合的原則為：①多個(gè)遺傳學(xué)終點(diǎn)；②原核生物和真核生物；③體外試驗(yàn)和體內(nèi)試驗(yàn)；④體細(xì)胞和生殖細(xì)胞。

　　（二）常用的致突變?cè)囼?yàn)方法

　　1.細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)-鼠傷寒沙門菌回變?cè)囼?yàn)（Ames試驗(yàn)）

　　原核生物體外試驗(yàn)、基因突變。

　　鼠傷寒沙門菌試驗(yàn)菌株（突變型）不能自行合成組氨酸，在不含組氨酸的最低營養(yǎng)平皿上不能生長。突變型試驗(yàn)菌株可被各種誘變因素誘導(dǎo)，回復(fù)突變成野生型，即恢復(fù)了合成組氨酸的能力，可在此平皿上生長成可見菌落。

　　鼠傷寒沙門菌野生型（原養(yǎng)型）←→組氨酸營養(yǎng)缺陷型突變株（his+）　回復(fù)突變?。╤is）

　　如果受試物處理組回變菌落數(shù)顯著超過陰性對(duì)照組；并有劑量反應(yīng)關(guān)系，即可判定受試物為鼠傷寒沙門菌的致突變物。

　　Ames試驗(yàn)中使用的標(biāo)準(zhǔn)菌株為TA97、TA98、TA 100和TA 102.his-突變外，附加突變：①深粗糙型突變（rfa）、②切除修復(fù)基因uvrB缺失（△uvrB）和③抗藥因子（R因子即抗氨芐青霉素的PKMl01質(zhì)粒和抗四環(huán)素的PAQ1質(zhì)粒）。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理

　　TA97和TA98主要用于檢測(cè)移碼型突變；TA100和TA102可檢測(cè)堿基置換。

　　有點(diǎn)試驗(yàn)和摻入試驗(yàn)兩種。應(yīng)分別進(jìn)行不加及加代謝活化系統(tǒng)的試驗(yàn)，常用為S9混合液，即用多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的大鼠肝勻漿經(jīng)9000 g離心得到的上清液，再加上NADP及葡萄糖-6-磷酸等輔助因子。

　　2.微核試驗(yàn)

　　體內(nèi)試驗(yàn)，遺傳學(xué)終點(diǎn)是染色體畸變和不分離。

　　微核是染色體斷片或因紡錘體受損傷而遲滯的整個(gè)染色體，分裂的后期仍留在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)。檢測(cè)斷裂劑和有絲分裂毒物。

　　常用的是嚙齒類動(dòng)物骨髓嗜多染紅細(xì)胞。在主核排出時(shí)微核可留在胞漿中。

　　3.染色體畸變?cè)囼?yàn)

　　細(xì)胞遺傳學(xué)檢驗(yàn)，即制備中期相染色體標(biāo)本，在光鏡下觀察染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)目改變。遺傳學(xué)終點(diǎn)為染色體畸變。

　　嚙齒類動(dòng)物睪丸細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，用于檢測(cè)對(duì)生殖細(xì)胞的染色體損傷作用。

　　4.程序外DNA合成試驗(yàn)

　　DNA受損后，發(fā)生在正常復(fù)制合成期（S期）以外DNA的修復(fù)合成，稱為程序外DNA合成（UDS）或DNA修復(fù)合成。

　　3H-胸苷摻入量，反映DNA修復(fù)合成情況。需將受試細(xì)胞分裂阻斷同步化于G1期，再用羥基脲抑制殘存的S期半保留DNA復(fù)制，放射自顯影法和液閃計(jì)數(shù)法確定3H-胸苷摻入量。