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注射劑與滴眼劑——熱原檢查法

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  (一)家兔發(fā)熱試驗(yàn)法

  熱原檢查目前各國藥典法定的方法仍為家兔發(fā)熱試驗(yàn)法,屬限度試驗(yàn)。它是將一定量的供試品,由靜脈注入家兔體內(nèi),在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察體溫的變化情況,如家兔體溫升高的度數(shù)超過規(guī)定限度即認(rèn)為有熱原反應(yīng)。具體試驗(yàn)方法和結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)見《中國藥典》(2000年版)二部附錄。

  本法結(jié)果準(zhǔn)確,但費(fèi)時(shí)較長、操作繁瑣,不利于連續(xù)生產(chǎn)。

  (二)鱟試驗(yàn)法

  本法操作簡單、結(jié)果迅速可得、靈敏度高。但本法醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)搜集整理對革蘭氏陰性以外的內(nèi)毒素不敏感,故還不能完全代替家兔發(fā)熱試驗(yàn)法。常用于某些不能用家兔進(jìn)行熱原檢測的品種,如放射性藥劑等;也適用于生產(chǎn)注射藥品時(shí),檢測中間產(chǎn)品是否污染熱原。原理是利用動物鱟的變形細(xì)胞溶解物與引起熱原反應(yīng)的細(xì)菌內(nèi)毒素之間可產(chǎn)生的凝膠反應(yīng),從而定性或定量地測定此內(nèi)毒素。

  測定方法:取4支無菌、無熱原帶塞玻璃試管放于37℃水浴中,向每支試管中加入0.2ml鱟試劑。向第1支試管內(nèi)加入0.9%NaCl液0.2ml,作陰性對照管,此管應(yīng)無凝膠生成(因無熱原不應(yīng)有凝膠生成);向第2支試管內(nèi)加入0.9%NaCl與0.05μg/ml標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素混合液0.2ml,作陽性對照管,30分鐘應(yīng)出現(xiàn)穩(wěn)定的凝膠(試管倒轉(zhuǎn)180度,凝膠固定不變),說明鱟試劑有效;向第3支試管內(nèi)加樣品溶液與0.05μg/ml標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素混合液0.2ml作假陽性對照管,30分鐘應(yīng)出現(xiàn)穩(wěn)固的凝膠,說明供試品內(nèi)不致有干擾物質(zhì)存在;向第4支試管內(nèi)加入檢品溶液0.2ml,30分鐘后若無凝膠生成,證明檢品中無熱原存在。操作時(shí)一般可將試管傾斜45度觀察,如含有熱原,多在20分鐘就出現(xiàn)陽性反應(yīng),同時(shí)還須注意如溫度、pH值及沉淀劑等對鱟試劑的干擾作用。

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直播時(shí)間:3月10日 19:30-21:00

主講老師:劉 楝老師

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