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　　外周血單個核細(xì)胞分離的原理的試劑：常用的分層液有Ficoll與Percoll兩種。

　　Ficoll分層液法：

　　Ficoll分層液即聚蔗糖-泛影葡胺，是一種較理想的細(xì)胞分層液，其主要成分是一種合成的蔗糖聚合物，具有高密度、低滲透壓、無毒性的特點(diǎn)。

　　主要用于分離外周血中單個核細(xì)胞，是一種單次密度梯度離心分離法。

　　操作時，將分層液置于試管下層，然后將肝素化的全血或白細(xì)胞懸液以Hanks或PBS液稀釋后，輕輕鋪于分層液面上，經(jīng)2000rpm15-20min離心后，紅細(xì)胞與粒細(xì)胞因比重大于分層液，故較快沉于管底。血小板則比重小于分層液而懸浮于血漿中。唯有與分層液比重相當(dāng)?shù)膯魏思?xì)胞和淋巴細(xì)胞密集于血漿層和分層液的界面中。其分布由上到下依次為：稀釋的血漿層，單個核細(xì)胞層，粒細(xì)胞層和紅細(xì)胞層。

　?。?）Percoll分層液法：

　　Percoll是一種經(jīng)聚乙烯吡咯烷酮（PVP）處理的硅膠顆粒，對細(xì)胞無毒性。利用Percoll液經(jīng)高速離心后可形成一個連續(xù)密度梯度的原理，將比重不等的細(xì)胞分離純化。其分布由上至下依次為：死細(xì)胞組分及血小板分層，富含單核細(xì)胞組分層，富含淋巴細(xì)胞組分層及紅細(xì)胞與粒細(xì)胞組分層。