1.血液標本的采集

　　血液標本的采集，可分為毛細血管采血法和靜脈采血法。DETA-K2抗凝劑對血細胞形態(tài)影響很小，因此適用于血細胞計數(shù)，特別是血小板計數(shù)。血細胞分析儀使用標本一般要求為靜脈抗凝血，為了避免淤血和濃縮，壓脈帶壓迫時間不可過長，最好不超過半分鐘。因為毛細血管標本，受末梢血循環(huán)狀態(tài)、采血技術的影響，有時血液易形成小凝塊，堵塞機器造成實驗結果偏差。

　　2.血細胞分析儀計數(shù)

　　血液標本在室溫中必須6 h內上機檢測，上機前一定要將血液標本顛倒混勻至少8次，如需制備血涂片，應在采血后3 h內涂制。無論多先進的血液分析儀，只能當作一種過篩手段，不能完全替代目視法顯微鏡鏡檢,因為儀器還不能準確區(qū)分幼稚細胞、異常淋巴細胞、有核紅細胞等。因此，當出現(xiàn)白細胞、紅細胞及血小板明顯升高或降低，白細胞分類出現(xiàn)異常結果，白細胞、紅細胞及血小板直方圖或散點圖出現(xiàn)異常，均應用顯微鏡涂片復查。

　　3.血涂片的制備

　　血涂片既可由非抗凝的靜脈血和毛細血管血制備，也可由DETA-K2抗凝血制備，EDTA-K2抗凝血中，鈣離子被螯合后，能阻止血小板聚集，推片時血小板均勻平均，顯微鏡下易于對血小板進行觀察評價，但有時可觀察到因EDTA-K2引起的紅細胞皺縮及白細胞叢集現(xiàn)象，因此最好使用非抗凝血制備涂片，這樣可減少因抗凝劑所致的人工假象。涂片的好壞與血滴大小、推片與載片之間角度有關；血膜分布不均，主要是推片邊緣不齊，用力不均或載玻片不清潔所致，將制成的血膜在空氣中揮動，使迅速干燥，以免血細胞皺縮。

　　4.血涂片的染色

　　瑞氏-姬姆薩混合染色，兩種染色法各有其優(yōu)缺點，故在細胞學檢查中常將兩者結合起來，取長補短，細胞的胞質、顆粒、核等染色均較滿意；染色環(huán)境的pH對著色影響很大，應維持在pH值6.4~6.8，因此必須使用緩沖液；未干透血膜不能立即染色，否則染色時易脫落。

　　5.血涂片的鏡檢

　　選擇血涂片的體尾交界處染色良好的部分，在油鏡下按一定方式有規(guī)律地移動視野，一般計數(shù)100個~200個白細胞，醫(yī)學教|育網(wǎng)|收集整理同時注意白細胞、紅細胞、血小板形態(tài)的改變和分布，有無血液寄生蟲、有核紅細胞、幼稚或原始細胞、異淋細胞等。