在實(shí)驗(yàn)室測(cè)定酶之前,標(biāo)本還要經(jīng)過采集、分離血清和貯存等一系列處理過程。而酶在血中是處于一個(gè)動(dòng)態(tài)變化過程,血液離開體內(nèi)后,還會(huì)有一定變化。因此在其中任何一個(gè)階段處理不當(dāng),都有可能引起測(cè)定值變化。
采取血液標(biāo)本時(shí)最容易引起實(shí)驗(yàn)室誤差的是抽血不當(dāng),或者實(shí)驗(yàn)室急于分離血清,因此體外溶血。由于大部分酶在細(xì)胞內(nèi)外濃度差異明顯,少量血細(xì)胞的破壞就有可能引起血清中酶明顯升高。最明顯例子是LD,紅細(xì)胞中LD約為血清的100倍,這樣,只要有輕度溶血,如1/100紅細(xì)胞破壞,就足以使血清中LD升高一倍,常使原為正常的血清LD值超過參考值上限。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理其它如CK,雖然紅細(xì)胞中無CK,但含有豐富腺苷酸激酶(AK),進(jìn)入血清能使某些用“連續(xù)監(jiān)測(cè)法”測(cè)定CK的值假性升高,紅細(xì)胞中酶的干擾,不僅表現(xiàn)在溶血影響上,采血后如不及時(shí)將血清和血凝塊分離,血細(xì)胞中酶同樣可以透過細(xì)胞膜進(jìn)入血清,所以采血后1-2小時(shí)實(shí)驗(yàn)室必須及時(shí)離心,分離血清。
除非測(cè)定與凝血或纖溶有關(guān)的酶,一般都不采用血漿而采用血清作為測(cè)定標(biāo)本。大多數(shù)抗凝劑都在一定程度上影響酶活性,例如EDTA為金屬離子螯合劑,在去除Ca2+同時(shí)也去除其中Mg2+、Mn2+等離子,Mg2+是ALP、CK和5′-核苷酸酶(5′-NA)作用的激活劑,其它如草酸鹽、枸櫞酸鹽乃至肝素都對(duì)一些酶有一定程度抑制。有必要時(shí),可考慮使用肝素為抗凝劑,在常用抗凝劑中它對(duì)酶影響最小的。
酶蛋白不穩(wěn)定,易失活,ACP是最明顯的一個(gè)例子。此酶在中性或堿性環(huán)境中極不穩(wěn)定,血液在37℃放置1小時(shí),ACP活性可下降50%.大部分酶在低溫中比較穩(wěn)定,分離血清如不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)放冰箱保存。