CD4細(xì)胞及CD8細(xì)胞的分離:
(1)CD4細(xì)胞的分離:將一定量的T細(xì)胞懸液通過(guò)一根SephDdexC—10柱,然后用少量的RPMll640培養(yǎng)洗滌,收獲的細(xì)胞懸液約含85%的CD4細(xì)胞。醫(yī)學(xué)|教育|網(wǎng)搜集整理
(2)CD8細(xì)胞分離:用Tris緩沖液稀釋羊抗鼠IgG(濃度為10μg/m1)包被一平皿表面,然后放置4℃過(guò)夜,沒(méi)有包被上的抗體用PBS洗凈。然后將已標(biāo)記有抗CD8單克隆抗體的T細(xì)胞(細(xì)胞濃度為1×l07/m1)3m1加入上述的平皿內(nèi),4℃放置2小時(shí),用PBS輕輕洗凈末粘附的細(xì)胞,然后用毛細(xì)管加入10m1PBS吹打。收集的脫落細(xì)胞經(jīng)洗滌后懸浮在RPMIl640培基中備用。CD4細(xì)胞亦可用此法分離。
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