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細(xì)菌染色標(biāo)本的革蘭染色法
本法是細(xì)菌學(xué)中最經(jīng)典、最常用的染色方法。除糞便、血液等極少數(shù)標(biāo)本外,絕大多數(shù)標(biāo)本在分離培養(yǎng)之前都要進(jìn)行革蘭染色、鏡檢。通過革蘭染色將所有細(xì)菌分為G+菌和G-菌兩大類,可初步識別細(xì)菌,縮小范圍,有助于進(jìn)一步鑒定。甚至有時結(jié)合細(xì)菌特殊形態(tài)結(jié)構(gòu)及排列方式,對病原菌可進(jìn)行初步鑒定,如腦脊髓膜炎患者,取其腦脊液涂片、革蘭染色、鏡檢,如檢到革蘭陰性、腎形、凹面相對的雙球菌,位于細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外,可報告“找到革蘭陰性雙球菌,形似腦膜炎奈瑟菌”;如檢到革蘭陽性、菌體周圍有明顯莢膜的雙球菌,可報告“找到革蘭陽性雙球菌,形似肺炎鏈球菌”。其結(jié)果為臨床早期診斷及治療提供了依據(jù)。
革蘭染色除用以鑒定細(xì)菌外,病原菌革蘭染色特性可為臨床選擇用藥提供參考,幫助臨床制訂有針對性的治療方案。因為G+菌與G-菌對一些抗生素表現(xiàn)出不同的敏感性,且其致病物質(zhì)(前者產(chǎn)生外毒素而后者多產(chǎn)生內(nèi)毒素)及其作用機(jī)理不同。
細(xì)菌染色標(biāo)本的抗酸染色法
抗酸染色也可將細(xì)菌分為兩大類:即抗酸性細(xì)菌和非抗酸性細(xì)菌。因為臨床上絕大多數(shù)病原菌為非抗酸性細(xì)菌,所以抗酸染色不作為臨床上常規(guī)的細(xì)菌檢查項目,只針對性用于結(jié)核病、麻風(fēng)病等的細(xì)菌檢查醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)。疑似結(jié)核分枝桿菌感染的標(biāo)本,經(jīng)抗酸染色后以油鏡檢查,即可作出初步鑒定。將有肺結(jié)核癥狀病人的痰標(biāo)本,制成涂片后,作萋-納染色鏡檢,根據(jù)所見結(jié)果即可報告“找到(未找到)抗酸菌”。再如有腎感染癥狀的病人,取其尿標(biāo)本,經(jīng)離心沉淀后作涂片,行萋-納及潘本漢抗酸染色,如兩張涂片均查見紅色抗酸桿菌,可報告為“找到抗酸分枝桿菌”。對臨床疾病的診斷和治療具有重要參考價值。
除以上所述染色方法外,用于細(xì)菌鑒定的還有鞭毛染色、異染顆粒染色等。鞭毛染色后于顯微鏡下可觀察到菌體上有無鞭毛、鞭毛的位置及數(shù)量,在細(xì)菌鑒定中,特別是非發(fā)酵菌的鑒定中很重要。疑為白喉棒狀桿菌感染,進(jìn)行涂片檢查,除證實為革蘭陽性典型棒狀桿菌外,還須用異染顆粒染色法,鏡檢異染顆粒,方可初步報告“檢出形似白喉棒狀桿菌”,為臨床早期診斷提供依據(jù)。
細(xì)菌染色標(biāo)本的熒光染色法熒光染色法敏感性強(qiáng),效率高而且容易觀察結(jié)果,在臨床細(xì)菌鑒定中有很大的實用價值。主要用于結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌、白喉棒狀桿菌及痢疾志賀菌等的檢測。如痰標(biāo)本涂片、固定,用熒光染料金胺0法(也稱金胺0-羅丹明B法)染色,以熒光顯微鏡檢查,在暗背景中可觀察到呈金黃色熒光的菌球。
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