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循環(huán)免疫復(fù)合物的物理測(cè)定法

2013-01-08 19:04 來(lái)源:
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循環(huán)免疫復(fù)合物的物理測(cè)定法:

1.聚乙二醇法:聚乙二醇(PEG)是乙二醇聚合而成的無(wú)電荷形多糖分子,分子量變化范圍較大,常用的分子量是6000.用3%~4%濃度的PEG可以選擇性地將大分子免疫復(fù)合物沉淀下來(lái),其作用機(jī)制尚不甚清楚醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。將PEG溶液與待檢血清混合,置4℃冰箱過(guò)夜后離心,將沉淀物用PEG溶液充分洗滌,重新溶解于0.01mol/L的NaOH中,在波長(zhǎng)280nm下測(cè)量溶液的吸光度;也可利用散射比濁法直接測(cè)定PEG沉淀的免疫復(fù)合物;以不同濃度的熱聚合IgG作為參考標(biāo)準(zhǔn)來(lái)計(jì)算CIC的含量。

聚乙二醇法簡(jiǎn)單易行,可在臨床工作中推廣。但此法易受多種大分子蛋白和溫度的干擾,特異性稍差。PEG法還特別適用于沉淀獲得CIC,再進(jìn)行解離分析其中的抗原與抗體。

2.冷球蛋白測(cè)定:在某些病理情況下,血清中的免疫復(fù)合物具有可逆性冷沉淀的特性,于4℃冰箱中放置1~3天可自發(fā)地沉淀下來(lái)(參見(jiàn)第二十六章);此種情況多見(jiàn)于冷球蛋白血癥,所涉及的抗原包括自身的IgG、IgM、核苷酸、腫瘤相關(guān)抗原、腎小管上皮、甲狀腺球蛋白、紅細(xì)胞基質(zhì)等,還有外源性抗原如乙肝病毒、EB病毒、巨細(xì)胞病毒、牛白蛋白和馬蛋白等。

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