1.試驗(yàn)方法將分離的反應(yīng)細(xì)胞（通常是患者的淋巴細(xì)胞）與刺激細(xì)胞（通常是供者或已知的標(biāo)準(zhǔn)淋巴細(xì)胞）配制成1×10⁶/ml濃度的懸液，各加0.2ml到反應(yīng)管中；放置37℃和5％CO₂環(huán)境下培養(yǎng)5～6天。培養(yǎng)結(jié)束后進(jìn)行涂片染色，觀察并計(jì)數(shù)轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞；也可在培養(yǎng)結(jié)束前5～12小時(shí)加入3H-TdR，收獲后用液體閃爍儀計(jì)數(shù)細(xì)胞的放射性。試驗(yàn)結(jié)果的常用表示方式是刺激指數(shù)（SI）。 

MLC分為雙向法和單向法。雙向MLC是反應(yīng)管中兩種細(xì)胞都有應(yīng)答能力，可以互為刺激細(xì)胞和反應(yīng)細(xì)胞，試驗(yàn)結(jié)果是兩種細(xì)胞反應(yīng)之和。

SI＝2×試驗(yàn)管cpm/（A對照cpm＋B對照cpm）

雙向MLC只能反映兩種細(xì)胞間LD的差別，結(jié)果比較模糊，也不能做LD抗原的分型。單向MLC是將刺激細(xì)胞用絲裂霉素C（mitomycinC）或X線照射先行滅活，但細(xì)胞的抗原性保持不變，因此可作為刺激細(xì)胞而不能作為反應(yīng)細(xì)胞，試驗(yàn)結(jié)果是待檢測細(xì)胞的反應(yīng)，使于結(jié)果分析。

SI＝試驗(yàn)管cpm/自身對照cpm

單向MLC可以用來進(jìn)行HLD-D和DP位點(diǎn)的分型試驗(yàn)，常用的方法有兩類：醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理純合子分型細(xì)胞（homozygoustypingcell，HTC）試驗(yàn)和預(yù)敏淋巴細(xì)胞分型（primedlymphocytetyping，PLT）試驗(yàn)。

2.HTC試驗(yàn)HTC是指細(xì)胞內(nèi)一對同源染色體上兩個(gè)HLA單倍型完全相同，所以該位點(diǎn)在細(xì)胞表面只表達(dá)一種抗原；HTC可從近親婚配的子代表中尋找。將一組HTC經(jīng)處理來活后作為刺激細(xì)胞，與待檢細(xì)胞做單向MLC.如果待檢細(xì)胞與刺激細(xì)胞的LD不同，就會發(fā)生反應(yīng)；如果相同便不反應(yīng)；所以試驗(yàn)又稱為陰性分型法。當(dāng)SI≤2時(shí)可認(rèn)為待檢細(xì)胞與該管HTC的LD抗原相同。本法的缺點(diǎn)是HTC難以得到，而且培養(yǎng)時(shí)間長（5～6天），在尸體器官移植時(shí)不能應(yīng)用。