方法名稱： 冰硼散—硼砂的測定—分光光度法

應用范圍： 本方法采用分光光度法測定冰硼散中硼砂的含量。

本方法適用于中成藥冰硼散。

方法原理： 供試品加甲醇振搖濾過，濾液中加入姜黃素溶液及濃硫酸-冰醋酸溶液，搖勻甲醇定容得供試液。置紫外可見分光光度計,于波長530nm處測定姜黃素與硼砂在酸性非水介質(zhì)中形成的紅色絡合物的吸收度，計算出其含量。

試劑： 1.濃硫酸—冰醋酸 1:1

2.甲醇

3.硼砂

4.姜黃素

儀器設備： 分光光度計

試樣制備： 1.對照品溶液的制備

精密稱取硼砂適量，加甲醇制成1mg/mL的硼砂對照品儲備溶液。

2.標準溶液的制備

精密量取上述硼砂對照品儲備溶液40，80，120，160，200µL，分別置于5個10mL量瓶中，分別加入0.0125%姜黃素溶液0.5mL及濃硫酸-冰醋酸溶液(1:1)6mL，搖勻。以甲醇定容至，放置20min，作為繪制標準曲線的系列標準溶液。

3.供試品溶液的制備

精密稱取供試品100mg，加入15mL甲醇搖勻，浸漬2h，不斷振搖。濾過，以甲醇洗滌殘渣，洗滌液與濾液合并定容至25mL，作為供試品溶液，備用。

4.供試品測定溶液的制備

精密量取上述供試品溶液50µL，加入0.0125%姜黃素溶液0.5mL及濃硫酸-冰醋酸溶液(1:1)6mL，搖勻,加甲醇定容至10mL，混勻，放置20min，作為供試品測定溶液。

注1：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一，“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 1.標準曲線的繪制

將上述標各系列標準溶液，于波長530nm處測定吸收度。以硼砂溶液濃度對吸收度值作線性回歸，繪制標準曲線。

2.供試品的測定

供試品測定溶液，于波長530nm處測定吸收度，計算含量。

注：分光光度法應以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應減去空白讀數(shù)，再計算含量。