1、鎮(zhèn)靜催眠作用:酸棗仁水溶性提取物,每ml相當于7.5g生藥,將原液稀釋為1:1,l:0.5,1:0.25 3種濃度,pH=9,用量每20g用1.0ml。
對小白鼠一般活動的影響: 直接觀察法試驗:取體重18.0±1.0g小白鼠,各半,給藥前先觀察其正?;顒忧闆r,然后給予不同濃度酸棗仁水溶性提取物1.0ml/20g ig。
光電鎮(zhèn)靜法試驗:用十字交叉光束的二個光導管串聯(lián)組成光電鎮(zhèn)靜器,用積數(shù)器記錄10分鐘內(nèi)小鼠自發(fā)活動次數(shù)。在藥物濃度為1:1與1:0.7組小鼠活動顯著減少。
排水量法試驗:參考Komlos等的抖籠排水裝置用單位時間內(nèi)的排水量表示小白鼠的活動情況。小白鼠分為大劑量組(1 :0.5),小劑量組(1 :0.25)和對照組,1次ig給藥,30分鐘后開始觀察15、30分鐘內(nèi)排水量,1:0.5藥物組比對照組排水量顯著減少(P<0.01)。
抖籠法試驗:選體重18±1.0g小鼠,隨機分兩組,每組10只,給藥組用 1:1酸棗仁水溶液ig 1.0ml/20g體重,30分鐘后放入抖籠內(nèi)觀察10分鐘內(nèi)活動情況。結(jié)果給藥組自發(fā)活動明顯降低。酸棗仁石油醚提取液、正丁醇萃取液、乙酸乙酯萃取液(以上的提取液每1ml相當原生藥10g)水煎劑(濃度為每1ml相當原生藥1g),pinosin配成每1ml相當原生藥1mg。采用抖籠法自身對照試驗。結(jié)果見表4,除石油醚提取液無效外,均顯示明顯的降低自發(fā)活動。
降低協(xié)調(diào)運動:選取體重18±1.0g 小白鼠,在滾籠上轉(zhuǎn)1h,不落下者為合格。取40只,按體重性別隨機分4組,給予不同劑量酸棗仁水提物(每1ml相當7.5g生藥,并稀釋為1:1,1 :0.5,1 :0.7)與生理鹽水對照,用滾籠法進行實驗,滾籠轉(zhuǎn)速為 6.5wk/分鐘,每次放入10只小白鼠,ig給藥30分鐘后放入滾籠,連續(xù)轉(zhuǎn)60分鐘,觀察動物落下只數(shù),結(jié)果見表5。3種濃度均落下60%以上,與鹽水組對照有非常顯著差異。
對動物睡眠的影響:
酸棗仁水溶性提取物與戊巴比妥鈉作用的影響:取18.0±1.0g小白鼠20只,按體重、性別隨機分為二組。一組給酸棗仁水溶提取物(每ml 相當7.5g生藥,稀釋為 1:1);另一組給等容量生理鹽水作對照,ig給藥后30分鐘,每只小鼠ip 0.2%戊巴比妥鈉 0.1ml/10g,每5分鐘進行一次翻正反射試驗直至翻止反射消失,記錄30分鐘內(nèi)消失只數(shù),酸棗仁水溶性提取物能加強戊巴比妥鈉催眠作用。酸棗仁水溶性提取物還能顯著延長戊巴比妥鈉對小白鼠的睡眠時間(P<0.05),但不及氯丙嗪(P<0.01)。
炒棗仁煎劑對大鼠睡眠的影響:Wistar大鼠18只,體重160-240g。隨機分為實驗組與對照組,置于有機玻璃圓筒內(nèi)單獨飼養(yǎng),活動不受限制,自由攝食和飲水,保持自然光照,在戊巴比妥鈉麻醉下安裝皮層電極,用于記錄腦電。在兩側(cè)顳肌和頸肌內(nèi)分別插入銀絲電極以記錄肌電,連續(xù)記錄6小時,每只大鼠在ig前記錄3天,ig后記錄3天。炒棗仁煎劑每1ml相當于原生藥0.5g。實驗組用炒棗仁煎劑ig,每次1ml,每日2次,自記錄睡眠的d3晚上開始給藥,共3天。對照組用等量生理鹽水。睡眠資料分析采用目測法,每30秒為一分段時間。睡眠覺醒周期分為:
1)覺醒期以額-頂葉引導出的低幅快波腦電和明顯的肌電活動為特征;
2)慢波睡眠(Slow wave sleep,SWS)以梭形波(10-15Hz)和高幅慢波(Q波。0.5-5Hz)為特征,該期肌電活動明顯減少。其中Q波少于50%者為慢波睡眠第1期(SWS1),相當于淺睡階段;Q波超過50%者為慢波睡眠第2期(SWS2),相當于深睡階段;
3)快波睡眠(Paradoxical sleep,PS)以低幅快波(6-9H2)的腦電為特征、除偶爾有肌肉抽動外無明顯的肌肉活動;
4)總睡眠時相(TS)包括SWS1、SWS2和PS。全部實驗資料以均值±標準誤(X±SD表示,用t檢驗統(tǒng)計處理。
結(jié)果:實驗組大鼠ig后TS和SWS2持續(xù)時間明顯增長,與ig前相比,6小時內(nèi)TS持續(xù)時間平均增加51.0分鐘(26.O%),SWS2持續(xù)時間平均增加41.4分鐘(116.3%),差異均非常顯著(P<0.001)。SWS1和PS持續(xù)時間無明顯變化。對照組ig生理鹽水前后未見明顯變化。實驗組ig后TS與SWS2的發(fā)作頻率與發(fā)作持續(xù)時間均有明顯變化。與ig前相比,6h內(nèi)TS發(fā)作頻率平均減少22.7次(-36.3%),每次發(fā)作持續(xù)時間增加3.5分鐘(+95.6%);6小時內(nèi)SWS2發(fā)作頻率平均增加28.3次(+89.O%),均有非常顯著的意義(P<0.001),而SWS2每次發(fā)作的持續(xù)時間延長0.3小時(+31.6%),有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對照組ig前后對發(fā)作頻率和發(fā)作的持續(xù)時間則無顯著變化。在實驗中還發(fā)現(xiàn)ig后多數(shù)大鼠的腦電圖波型有明顯變化,主要表現(xiàn)在慢波睡眠階段高幅慢波增多,波幅增大,頻率變慢,尤其是ig前睡眠量較少的大鼠更為明顯。對照組在ig前后未見明顯變化。
酸棗仁有效成分對大鼠多導睡眠描記的影響:酸棗仁用石油醚脫脂后加水抽提,再加硫酸銨至一定飽和度,析出沉淀,加水溶解,并濾去不溶物,清液調(diào)pH至3.O后,用陽離子交換柱層析,先用水洗至中性,然后用NH4OH洗脫并分部收集得兩部分,分別為1.90g(SZ1)和1.86g(SZ2)。SZ1和SZ2均用生理鹽水(NS)配成4g/L。在描記開始前l(fā)h按20mg/kg體重作ip。大鼠隨機分3組,每組11只,分別 ip SZ1、SZ2和NS,多導睡眠描記,為了避免晝夜節(jié)律對實驗影響,描記在每天同一時間進行(下午2:00-6:00)。每只大鼠均在給藥前l(fā)d和當天各連續(xù)描記4h,大鼠睡眠按Usdin法。結(jié)果以均值±標準差(X±SD)表示,用t檢驗統(tǒng)計處理。結(jié)果:SZ1和SZ2組給藥后睡眠總時間(TST)和慢波睡眠(SWS)顯著增多,而覺醒(W)顯著減少,與給藥前l(fā)h相比,TST分別增加21.7±19.4分鐘(±17.2%,P<0.001)和27.7±18.5分鐘(+20.O%,P<0.001);SWS分別增加20.O±18.6分鐘(+17.O%,P<0.01)和28.2±19.0分鐘(+21.9%,P<0.001),其中慢波睡眠深睡期(SWS2)分別增加8.4±12.1分鐘(+48.8%,P<0.005)和25.3±19.4分鐘(+138.2%,P<0.01);W分別減少21.7±19.4分鐘(-19.O%,P<0.01)和27.7±18.5分鐘(-27.3%,P<0.001),而慢波睡眠淺睡期(SWS1)和快波睡眠(PS)均無顯著變化,NS組給藥前后各時相均無顯著變化。從有效成份時間效應關(guān)系看,給藥當天與前l(fā)d同一時間的每小時TST和SWS2相比較,分析SZ1和SZ2的時間效應關(guān)系。又從給藥后TST和SWS2效應達高峰的時間來看,SZ1在h4-5,效應達高峰時TST和SWS,分別增加45.3%(P<0.01)和186.7%(P<0.005),而SZ2在第3-4小時,效應達高峰時TST和SWS2分別增加23.6%(P<0.05)和191.4%(P<0.01)。
對抗中樞興奮劑的作用: :取體重18±1.0g小鼠,各半,隨機分3組。一組用酸棗仁水溶性提取物(每1ml相當7.5g生藥,稀釋成1:1)1.0m1/20g,分兩次ig,中間相隔30分鐘,用藥30分鐘后ip戊四氮半數(shù)驚厥量50mg/kg,觀察給藥后,產(chǎn)生全身陣攣性驚厥的只數(shù)及死亡率。對照用生理鹽水。結(jié)果表明,酸棗仁水溶性提取物對戊四氮引起的驚厥有對抗作用。
對抗戊四氮的作用
對抗咖啡因的作用:選體重18.0±1.0g小鼠20只,各半,按體重、性別隨機分二組,一組給1:1酸棗仁水溶性提取物1.0m1/20g(每1ml相當7.5g生藥,稀釋成1 :1),分二次給藥,中間相隔30分鐘,末次給藥30分鐘后,給苯甲酸鈉咖啡因50mg/kg。對照用生理鹽水,末次給藥30分鐘后給苯甲酸鈉咖啡因50mg/kg,用抖籠描記法記錄二組小鼠30分鐘內(nèi)活動曲線。結(jié)果酸棗仁水溶性提取物可使描記曲線降低。
抗士的寧所致的小鼠驚厥作用表明:小鼠ip酸棗仁0.3ml/10g無明顯的對抗作用。
2、對心血管系統(tǒng)的作用:
酸棗仁對實驗性心律失常的影響:
對氯化鋇所致大鼠心律失常的作用:大鼠39只,體重110-180g,雌雄不拘,分成兩組,酸棗仁組20只,對照組19只。Ip 3%戊巴比妥鈉1ml/kg麻醉后,再 ip 10%水合氯醛 2ml/kg 5分鐘后,用RM-46型生理記錄儀觀察并記錄Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ導聯(lián)心電圖。然后從舌下iv0.4%氯化鋇溶液1ml/kg,5秒內(nèi)注完;待其出現(xiàn)心律失常后,給藥組從舌下iv上述酸棗仁水溶液2ml/kg,對照組注射同量生理鹽水,觀察10分鐘內(nèi)心電圖的變化。注射氯化鋇后,39只大白鼠均立即出現(xiàn)以雙相性室性心動過速為主的心律失常波形。酸棗仁組給藥后平均在20秒(14只在10秒以內(nèi))即轉(zhuǎn)為竇性正常節(jié)律,觀察至10分鐘未再出現(xiàn)心律失常波形。對照組給生理鹽水后心電圖無明顯變化,心律失常持續(xù)時間為1-10分鐘。
對烏頭堿所致大鼠心律失常的作用:大鼠27只,體重110-220g,酸棗仁組14只,對照組3只。用戊巴比妥鈉ip麻醉(劑量同上)。用RM一46型生理記錄儀觀察并記錄心電圖的變化。以0.002%烏頭堿1ml/kg舌下iv,當出現(xiàn)心律失常后,給藥組iv酸棗仁溶液2ml/kg,對照組iv同量生理鹽水,觀察并比較兩組15分鐘內(nèi)心電圖的變化。注射烏頭堿后,數(shù)秒至4分鐘內(nèi)均出現(xiàn)室性早搏二聯(lián)律、室性心動過速等心律失常波形。酸棗仁組的14只大白鼠中有8只心電圖波形有好轉(zhuǎn)(即能恢復竇性節(jié)律數(shù)分鐘,以后又出現(xiàn)心律失常,較短時間又自行恢復,如此反復數(shù)次);而生理鹽水組13只大白鼠,全部在 15分鐘內(nèi)持續(xù)出現(xiàn)心律失常波形。兩組結(jié)果用X2測驗直接計算概率法,測得P<0.01,相差非常顯著。
酸棗仁對腦垂體后葉素引起大鼠心肌缺血的影響: :取大鼠18只,體重160-220g,分成二組,每組9只,麻醉后一組預先ip酸棗仁溶液4ml/kg (1ml相當生藥1g),另一組用生理鹽水。10分鐘后分別由舌下iv腦垂體后葉素注射液0.5u/kg,用XDH-3型心電圖儀記錄注射后1、2、15、30秒和1、2、5、10分鐘 時心電圖第Ⅱ?qū)?lián)的變化。
ip給藥組
iv給藥組:取大鼠10只,體重160-290g,每組5只,麻醉后,一組預先從舌下iv酸棗仁溶液1.5ml/kg,另一組iv生理鹽水。2分鐘后,舌下iv腦垂體后葉素0.75u/kg,同上法記錄各個時間的心電圖變化。凡在下述第一期及第二期中各出現(xiàn)一項心電圖變化者,定為有心肌缺血。心肌缺血的指征:第一期T波比原水平高50%以上,或S一T段明顯下移或出現(xiàn)期前收縮。第二期S-T段明顯下移或T波倒置低平,心率明顯減慢。用X測驗直接計算概率法分別測定ip及iv的酸棗仁組與生理鹽水組出現(xiàn)心肌缺血的差異,結(jié)果都非常顯著(P<0.01)。
對心臟的作用:酸棗仁液可使離體和在體蛙心的心率減慢,心收縮力加強,有強心作用。
3、對微循環(huán)的作用:酸棗仁液可使微血管管徑擴張極為顯著。
4、對動物抗缺氧能力的影響:用成年小鼠120只,根據(jù)體重隨機分為:缺氧對照組、酸棗仁組,每組60只。減壓缺氧前一天下午ig每只小鼠酸棗仁煎劑0.4ml(含生藥0.1g)缺氧對照組ig蒸餾水0.4ml。減壓缺氧前2小時重復ig一次,劑量同上。動物進入減壓裝置后,先快速(1000m/分鐘)減壓至 3000m模擬高度,然后緩速(200m/分鐘)至10,000m,停l小時后回到平原高度,計算動物存活率。結(jié)果對照組存活27只,用藥組存活48只,P<0.01。并用成年小鼠觀察模擬高度后腦組織的氧耗量,結(jié)果用藥組與對照組和平原對照組比較,P<0.05和0.01。用藥后顯著減少腦組織的氧耗量。
5、免疫增強作用:酸棗仁乙醇提取褐色浸膏物明顯提高小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化值,對小鼠抗體溶血素生成也明顯高于對照組,能明顯增強小鼠的單核巨噬細胞的吞噬功能,可明顯增加小鼠的遲發(fā)型超敏反應并能拮抗CPA引起的遲發(fā)型超敏反應的抑制。酸棗仁及多糖每天口服0.1g/kg,共給藥16天,能增強小鼠的體液免疫和細胞免疫功能,并且對放射性損傷小鼠有一定保護作用。