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防風通圣丸作用研究

材料與方法

1.1、實驗動物剛斷乳的SD大鼠,體重60~70g,清潔級,雌雄各半,動物及普通飼料均由吉林大學(xué)實驗動物中心提供。

1.2、實驗藥物防風通圣丸[江蘇平光信誼(焦作)有限公司生產(chǎn),批號:070202,規(guī)格:5g/袋],蘆薈減肥茶(廣州權(quán)威保健品有限公司生產(chǎn),批號:20061108,規(guī)格:6g/袋),使用前配置成5%溶液。

1.3、主要儀器電子天平(型號:BS600,上海友聲衡器有限公司制造),自動平衡離心機(型號:LD24-0.8,北京醫(yī)用離心機廠制造),全自動生化分析儀(型號:7060,日本制造)。

1.4、主要試劑甘油三酯(批號:070181),膽固醇(批號:0700271),血糖(批號:070456),以上試劑均購自北京中生北控生物科技股份有限公司。方法:葡萄糖氧化酶法。

1.5、大鼠營養(yǎng)性肥胖模型的制備及給藥方法取SD大鼠80只,隨機兩組,正常對照組(n=12),飼喂普通飼料;其余大鼠為肥胖模型組,飼喂高脂飼料[3~5]。高脂飼料的組成:普通飼料55%,豬油12%,蔗糖5%,奶粉8%,花生5%,雞蛋10%,麻油3%,食鹽2%,濃魚肝油100滴(含維生素A1.7×105u、維生素D1.7×104u),每天飼喂適量的新鮮黃豆芽。8周后將造模成功的動物隨機分5組(n=10),分組給藥,模型對照組(5ml生理鹽水)、陽性對照組(給予蘆薈減肥茶60mg/kg)、高劑量組(防風通圣丸500mg/kg)、中劑量組(防風通圣丸350mg/kg)、低劑量組(防風通圣丸200mg/kg)。灌胃給藥,每天1次,連續(xù)6周。

1.6、觀察指標

(1.6.1)體重和Lee's指數(shù)每周測1次體重及體長,并且計算Lee's指數(shù)。Lee's指數(shù)=體重(g)1/3×103/體長(cm)。(體長:從大鼠鼻尖到肛門的長度)。

(1.6.2)血清指標的測定分離血清,測定甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和血糖。

(1.6.3)體脂濕重剖腹取出大鼠體內(nèi)脂肪(腹腔內(nèi)脂肪、睪丸、子宮及腎周圍脂肪墊),稱其濕重。

(1.6.4)脂肪細胞大小在剝離出的脂肪組織中取一小塊,用10%甲醛固定,石蠟包埋切片,HE染色,酒精梯度脫水,在400倍顯微鏡下計數(shù)全視野中脂肪細胞數(shù),并用測微器測脂肪細胞大小。每張切片計數(shù)10個視野的細胞數(shù)、測量10個細胞的直徑,取平均值作為每例的數(shù)值。

(1.6.5)統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(x±s)表示,組間比較采用t檢驗。

結(jié)果

(2.1)對大鼠體重的影響造模8周后,模型對照組與正常對照組比較大鼠體重、體內(nèi)脂肪、Lee's指數(shù)均有顯著增加(P<0.01),見表1。防風通圣丸灌胃給藥后能使肥胖動物的體重、脂肪重量和Lee's指數(shù)均顯著下降,且隨著劑量的增大,作用增強,呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。表1肥胖高脂飼料對大鼠體重的影響注:與正常對照組比較:##P<0.01,#P<0.05。防風通圣丸灌胃給藥對營養(yǎng)性肥胖大鼠的影響注:與模型對照組比較:**P<0.01,*P<0.05。

(2.2)防風通圣丸灌胃給藥對大鼠脂肪細胞大小的影響400倍鏡下,模型對照組大鼠脂肪細胞明顯增大,鏡下脂肪細胞數(shù)減少,提示其脂肪細胞內(nèi)脂肪堆積;給藥組單個視野脂肪細胞變小,脂肪細胞數(shù)量多于模型對照組,細胞直徑分別小于模型對照組,鏡下脂肪細胞數(shù)增多,差異有顯著性,以防風通圣丸高劑量組作用最顯著。防風通圣丸對肥胖大鼠脂肪細胞形態(tài)的影響注:與模型對照組比較,**P<0.01,*P<0.05。

(2.3)防風通圣丸灌胃給藥對模型大鼠血清指標的影響由表4可以看出,給藥后,肥胖動物的血脂、甘油三脂和血糖均有所降低,其中與模型對照組相比,血糖明顯下降(P<0.01),差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,血脂、甘油三脂與對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

(2.4)防風通圣丸灌胃給藥對模型大鼠肝、腎功能的影響由表5可以看出,該藥對動物的肝、腎的功能無明顯的不良影響。表4防風通圣丸對肥胖大鼠體重TC、TG、血糖的影響注:與模型對照組比較,防風通圣丸對肥胖大鼠肝、腎功能的影響注:與模型對照組比較。

(2.5)防風通圣丸灌胃給藥對動脈粥樣硬化面積的影響經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),本藥對動脈硬化無縮小面積的作用。

討論

單純性肥胖癥指體內(nèi)脂肪堆積過多和(或)分布異常、體重增加,是遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果[6~9],且隨著年齡增加,常伴有高血壓、高血脂等,而高血脂又易引起血栓和動脈硬化等并發(fā)癥。中藥減肥因長期服用副作小、療效肯定,越來越受到肥胖癥求美者的青睞。防風通圣丸是金元時期醫(yī)學(xué)家劉元素所創(chuàng)名方,由防風、川芎、當歸、芍藥、大黃、薄荷、麻黃、連翹、芒硝、生石膏、黃芩、桔梗、滑石、甘草、荊芥、白術(shù)、梔子等17味中藥組成,具有解表通里、清熱解毒的功效,主治外寒內(nèi)熱,表里俱實之證。方中防風、荊芥、石膏、黃芩等解表清熱,大黃、芒硝攻下,當歸、川芎等補血活血,一方面能促進體內(nèi)物質(zhì)的代謝、異化,另一方面能減少物質(zhì)的吸收、同化,用于治療高脂血癥,能促進和提高脂質(zhì)代謝水平,改善和調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝與紊亂。20世紀80年代,日本學(xué)者應(yīng)用此方治療4例肥胖癥患者,體重減輕l0%,認為其有能發(fā)汗通便,加速新陳代謝產(chǎn)物排泄及脂肪排除的功效,并推斷該方減肥機制可能主要是對脂肪的分解作用,而對蛋白質(zhì)的影響較小。現(xiàn)代研究證明,防風通圣丸減肥的作用機制之一是通過活化棕色脂肪組織(BAT)而引起體重的減輕。認為可能主要是抑制了外源性膽固醇的吸收所致,與臨床上肥胖癥除了遺傳因素之外,過多攝食動物性脂肪是其高膽固醇血癥形成的主要原因之一有很重要的實際意義。本組30只單純性肥胖動物經(jīng)防風通圣丸治療2個月,其體重、體內(nèi)脂肪、TC、TG、血糖,均有明顯降低,尤其在血糖方面,作用顯著,且對肝腎功能影響較小,不良反應(yīng)較少。該藥有市售丸劑,服用方便,可作為肥胖求美者推薦用藥,有治療、預(yù)防保健的雙重作用。

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