方法名稱： 小兒熱速清口服液 –黃芩苷的測定--高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定小兒熱速清口服液中黃芩苷的含量。

本方法適用于中成藥小兒熱速清口服液。

方法原理： 供試品用大孔吸附樹脂柱凈化后，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長276nm處檢測黃芩苷的吸收值，計算出其含量。

試劑： 1. .D101大孔吸附樹脂

2. 甲醇

3. 磷酸

4. 乙醇

儀器設備： 1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按黃芩苷峰計應不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 磷酸 = 47 53 0.2

2.2 檢測波長：276nm

2.3 柱溫：室溫

3. 大孔吸附樹脂柱（內徑約1.5 cm，填充高度10cm）

試樣制備： 1. 量取供試品

精密量取本品0.5mL，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取黃芩苷對照品約10mg, 精密稱定，置20mL量瓶中，加50%甲醇適量，置熱水浴中振搖使溶解，放置至室溫，并稀釋至刻度，搖勻。

3. 供試品溶液的制備

濕法裝柱：將D101大孔吸附樹脂與水混合，攪拌除去空氣泡，徐徐傾入色譜柱中，然后加入水將附著管壁的樹脂洗下，至水從色譜柱自然流下，色譜柱面平整。

供試品加入柱中后，以每分鐘1.5mL的流速，用水70mL洗滌，繼用40%乙醇洗脫，棄去7~9mL，收集續(xù)洗脫液，置50mL量瓶中，至刻度，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液5μL與供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，紫外吸收檢測器，于波長276nm處測定黃芩苷（C21H18O11）的吸收值，計算出其含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p.347。