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檢驗師:《答疑周刊》2017年第23期

2017-04-01 14:01 來源:
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檢驗師:《答疑周刊》2017年第23期:

1.【問題】雙向免疫擴散沉淀現(xiàn)象分析?

【解答】雙向免疫擴散是利用瓊脂凝膠為介質(zhì)的一種沉淀反應(yīng),擴散作用使分處兩處的抗原和相應(yīng)抗體相遇,形成抗原—抗體復(fù)合物,比例合適時將出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。

如果是相同抗原兩條沉淀線相同會吻合相連;

如果部分相同會部分相切;

如果完全不同,沉淀線也不相同,會交叉而過。

2.【問題】糖尿病酸中毒各指標有什么變化?

【解答】糖尿病代謝性酸中毒時:HCO3-原發(fā)性下降,PCO2代償性下降,血氯代償性升高,血清鉀升高。血鈉升高,血鈣降低。

3.【問題】酶橋法免疫組化檢測和ABC法的區(qū)別?

【解答】酶橋法:抗酶抗體作為第三抗體,通過橋抗體(第二抗體),將特異性識別組織抗原的第一抗體與第三抗體連接起來,形成酶聯(lián)的抗原-抗體復(fù)合物,加底物顯色。

酶橋法較酶標法的敏感性有所提高,但操作分四步,較為復(fù)雜。在酶橋法中,如果抗酶抗體與酶結(jié)合弱,在操作中酶常被沖洗掉;如果酶標記在非特異性抗體上就會存在背景著色問題;如果抗酶抗體的非特異性成分與橋抗體結(jié)合,就會與抗酶抗體競爭橋抗體結(jié)合位點,影響方法的敏感性。

親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物技術(shù)(ABC)法的反應(yīng)原理是:按一定比例將親和素與酶標生物素結(jié)合,形成可溶性親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)。當其與檢測反應(yīng)體系中的生物素化抗體(直接法)或生物素化第二抗體(間接法)相遇時,ABC中未飽和的親和素結(jié)合部位即可與抗體上的生物素結(jié)合,使抗原抗體反應(yīng)體系與ABC標記體系連成一體進行檢測。

ABC法的優(yōu)點:敏感性高。生物素與親和素的結(jié)合十分牢固,并且1個分子親和素有4個生物素結(jié)合位點,可以分別和生物素化的抗體和酶結(jié)合,l個過氧化物酶或免疫球蛋白分子又可結(jié)合多個生物素分子,從而形成網(wǎng)絡(luò)狀復(fù)合物。醫(yī)學(xué)/教育網(wǎng)搜集整理此外,ABC法尚具有親和力強、特異性高、第一抗體和第二抗體工作濃度低、操作時間短、可以多重標記等特點。

4.【問題】與可溶性抗原結(jié)合的顆粒性載體有什么要求?

【解答】顆粒型載體應(yīng)具有化學(xué)惰性,不得與樣品組分起化學(xué)反應(yīng),且穩(wěn)定性要好等。

檢驗師:《答疑周刊》2017年第23期(word版本下載)

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