親和層析法-臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí):
親和層析利用待分離物質(zhì)和它的特異性配體間具有特異的親和力醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理,從而達(dá)到分離的目的。
將可親和的一對(duì)分子中的一方以共價(jià)鍵形式與不溶性載體相連作為固定相吸附劑,當(dāng)含混合組分的樣品通過(guò)此固定相時(shí),只有和固定相分子有特異親和力的物質(zhì),才能被固定相吸附結(jié)合,性無(wú)關(guān)組分隨流動(dòng)相流出。
改變流動(dòng)相組分,可將結(jié)合的親和物洗脫下來(lái)。親和層析中所用的載體稱為基質(zhì),與基質(zhì)共價(jià)連接的化合物稱配基。
具有專一親和力的生物分子對(duì)主要有:抗原與抗體,DNA與互補(bǔ)DNA或RNA,酶與底物、激素與受體、維生素與特異結(jié)合蛋白、糖蛋白與植物凝集素等。親和層析可用于純化生物大分子、稀釋液的濃縮、不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的貯藏、分離核酸等。