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紫外－可見吸收光譜法

基于物質(zhì)對200～800nm光譜區(qū)輻射的吸收特性建立起來的分析測定方法稱為紫外-可見吸收光譜法或紫外-可見分光光度法。它具有如下特點：

1.靈敏度高，可以測定10-7～10-4g·mL-1的微量組分。

2.準確度較高，其相對誤差一般在1%～5%之內(nèi)。

3.儀器價格較低，操作簡便、快速。

4.應(yīng)用范圍廣。

紫外吸收光譜：200～400nm

可見吸收光譜：400～800nm

兩者都屬電子光譜。

紫外-可見吸收光譜的定量依據(jù)仍然是Lamber-Beer(朗伯-比耳)定律。

影響紫外-可見吸收光譜的因素：

共軛效應(yīng)：

共軛效應(yīng)使共軛體系形成大p鍵，結(jié)果使各能級間的能量差減小，從而躍遷所需能量也就相應(yīng)減小，因此共軛效應(yīng)使吸收波長產(chǎn)生紅移。共軛不飽和鍵越多，紅移越明顯，同時吸收強度也隨之加強。

溶劑效應(yīng)：

溶劑極性對光譜精細結(jié)構(gòu)的影響；

溶劑化限制了溶質(zhì)分子的自由轉(zhuǎn)動，使轉(zhuǎn)動光譜表現(xiàn)不出來，如果，溶劑的極性越大，溶劑與溶質(zhì)分子間產(chǎn)生的相互作用就越強，溶質(zhì)分子的振動也越受到限制，因而由振動而引起的精細結(jié)構(gòu)也損失越多；

溶劑極性對p?p*和n?p*躍遷譜帶的影響；

當溶劑極性增大時，由p?p*躍遷產(chǎn)生的吸收帶發(fā)生紅移， n?p*躍遷產(chǎn)生的吸收帶發(fā)生藍移。

溶劑的選擇：

盡量選用非極性溶劑或低極性溶劑；

溶劑能很好地溶解被測物，且形成的溶液具有良好的化學和光化學穩(wěn)定性；

溶劑在樣品的吸收光譜區(qū)無明顯吸收。

pH值的影響：

如果化合物在不同的pH值下存在的型體不同，則其吸收峰的位置會隨pH值的改變而改變。

紫外-可見分光光度計：

儀器的基本構(gòu)造：

紫外-可見分光光度計都是由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號指示系統(tǒng)五個部分構(gòu)成。

儀器類型：

紫外-可見分光光度計主要有以下幾種類型：

單光束分光光度計、雙光束分光光度計、雙波長分光光度計和多通道分光光度計。

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