關于三萜類化合物的分離，醫(yī)學教育網(wǎng)小編專門整理如下，請各位中藥學職稱考生仔細查看。

1.分段沉淀法：（適合于皂苷的分離）

①原理：利用皂苷難溶于乙醚、丙酮等溶劑。

②操作：將粗皂苷先溶于少量甲醇或乙醇中，然后逐滴加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮（1：1）的混合溶劑（加入量以能使皂苷從醇溶液中析出為限），邊加邊搖勻，皂苷即可析出。

③分段沉淀法，逐漸降低溶劑極性，極性不同的皂苷就可分批沉出，從而達到分離的目的。分段沉淀法雖然簡便，但難以分離完全。

2.膽甾醇沉淀法

①原理：皂苷可與膽甾醇生成難溶性的分子復合物（三萜皂苷與膽甾醇形成的復合物不如甾體皂苷與膽甾醇形成的復合物穩(wěn)定）。

②操作：先將粗皂苷溶于少量乙醇中，再加入膽甾醇的飽和乙醇溶液，至不再析出沉淀為止（混合后需稍加熱），濾過，取沉淀用水、醇、乙醚依次洗滌以除去糖類、色素、油脂和游離的膽甾醇，然后將此沉淀干燥后，用乙醚回流提取，膽甾醇被乙醚提出，使皂苷解脫下來，殘留物即為較純的皂苷。但是，此法已經(jīng)基本不被應用。

3.色譜分離法

色譜法是目前分離三萜類化合物最常用的方法，通常采用多種色譜法相組合的方法。

①吸附柱色譜法；②分配柱色譜法；③高效液相色譜法；④大孔樹脂柱色譜；⑤凝膠色譜法。

（1）吸附柱色譜法：

①常用方法，可用于分離各類三萜化合物。

②依據(jù)所用的吸附劑性質(zhì)的不同，分為正相吸附柱色譜和反相吸附柱色譜。

③正相吸附柱色譜的吸附劑常用硅膠。醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理

④反相柱色譜通常以鍵合相硅膠Rp-18、Rp-8或Rp-2等為填充劑。

（2）分配柱色譜法：多用于分離皂苷，常用硅膠等作為支持劑，固定相為3%草酸水溶液等，流動相為含水的混合有機溶劑：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等。

（3）高效液相色譜法：是目前分離皂苷類化合物最常用的方法，分離效能較高。用于皂苷的分離制備一般采用反相色譜柱，以甲醇-水、乙腈-水等系統(tǒng)為洗脫劑。

（4）大孔樹脂柱色譜：適用于皂苷的精制和初步分離。

操作：將含有皂苷的水溶液通過大孔樹脂柱后，先用水洗滌除去糖和其他水溶性雜質(zhì)，然后再用濃度由低到高的甲醇或乙醇依次進行梯度洗脫，極性大的皂苷可被l0%～30%的醇洗脫下來，極性小的皂苷則被50%以上的醇洗脫下來。

（5）凝膠色譜法：分子篩的原理來分離分子量不同的化合物，在用不同濃度的甲醇、乙醇或水等溶劑洗脫時，各成分按分子量遞減順序依次被洗脫下來。即分子量大的皂苷先被洗脫下來，分子量小的皂苷后被洗脫下來。應用較多的是在有機相中使用的Sephadex LH-20.

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