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(1)外標(biāo)法:若標(biāo)準(zhǔn)曲線過原點(diǎn),測(cè)定組分含量變化不大,可使用外標(biāo)一點(diǎn)法。由于中藥制劑中測(cè)定組分含量波動(dòng)范圍較大,所以最好采用標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。
(2)內(nèi)標(biāo)法:中藥制劑組成復(fù)雜,若使用內(nèi)標(biāo)法,會(huì)增加分離的難度,其組分很容易干擾內(nèi)標(biāo)峰,所以中藥制劑含量測(cè)定中,當(dāng)組成相對(duì)簡(jiǎn)單,雜質(zhì)不干擾內(nèi)標(biāo)峰時(shí),才使用內(nèi)標(biāo)法。
(3)供試品溶液的制備 由于高效液相色譜法本身具有分離的功能,因此所用供試品一般經(jīng)提取制得,不在需要純化處理。但組成復(fù)雜的制劑,仍需采用萃取、柱色譜等預(yù)處理方法對(duì)供試品進(jìn)行純化處理。
中藥制劑多含有糖,制備供試液時(shí),宜使用高濃度的醇或其他有機(jī)溶劑提取測(cè)定組分,最好不使用水為溶劑,以免提出糖污染色譜柱,提取的方法視制劑的情況而定,可采用萃?。ㄓ糜谝后w制劑)、回流或超聲震蕩提?。ü腆w制劑)等。 醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理
由于中藥制劑組成復(fù)雜,分析時(shí)應(yīng)在分析柱前加預(yù)柱。分析完畢后一般用水或低濃度的醇水先洗去糖等水溶性雜質(zhì),再用甲醇等有機(jī)溶劑將色譜柱沖洗干凈。
示例 桂枝茯苓丸中桂皮酸的含量測(cè)定。本品桂枝為君藥,采用高效液相色譜法測(cè)定其中桂皮酸的含量。
供試品的制備 精密稱取本品細(xì)粉約1g,置50ml量瓶中,加50%甲醇40ml,超聲震蕩提取30分鐘,放冷,加50%至刻度,離心10分鐘(1200r/min),取上清液用0.45μm的濾膜過濾,取續(xù)濾液備用。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取桂皮酸對(duì)照品適量,加50%甲醇定量稀釋成每ml中含0.01mg的溶液。
色譜條件 Inersil 5ODS-Ⅱ柱(25cm×4.6mm);流動(dòng)相:乙腈-0.1%磷酸(29:71);檢測(cè)波長(zhǎng)285nm;流速1.0ml/min。
用外標(biāo)法測(cè)定其含量。
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