1.標本嚴溶血及混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣的活性,催化底物顯色造成假陽性,嚴重溶血標本禁用。
2.采血試管洗滌不徹底、反復使用易交叉污染;塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。最好使用一次性玻璃試管或真空管采血管;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,可能與高濃度肝素具有強大的負電荷能吸附酶標記物不易洗脫有關;EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。
3.標本凝固不全,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h完全血塊完全收縮。在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原醫(yī)學教|育網|收集整理,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當?shù)拇倌齽?/p>