間接凝集反應是將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當大小的顆粒載體表面,然后與相應抗體(或抗原)作用,在適宜電解質(zhì)存在的條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象,稱間接凝集反應。
根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應的方式,間接凝集反應分為4類:①正向間接凝集反應;②反向間接凝集反應;③間接凝集抑制反應;④協(xié)同凝集反應。
間接凝集反應適用于各種抗體和可溶性抗原的檢測。以載體來分,常用的為紅細胞、膠乳顆粒及明膠顆粒等。
常用的試驗有:
1.間接血凝試驗:其原理是將抗原(或)抗體包被于紅細胞表面,成為致敏載體,然后與相應的抗體(或抗原)結(jié)合,從而使紅細胞被動地凝聚在一起,出現(xiàn)可見的凝集現(xiàn)象。
間接血凝試驗可分為三類:①紅細胞包被抗原,用以檢測抗體的血凝,稱為正向間接血凝反應(PHA);②紅細胞包被抗體,用以檢測抗原的血凝反應,稱為反向間接血凝反應(RPHA);③先將可溶性抗原(或抗體)與相應的抗體(或抗原)混合然后再加入抗原(或抗體)致敏的紅細胞,則能抑制原先的血凝現(xiàn)象,稱為正向(或反向)間接血凝抑制試驗。間接血凝抑制試驗醫(yī)學教育網(wǎng)整理可用于檢測抗體、自身抗體、變態(tài)反應性抗體,也可測定抗原。
間接血凝試驗 —:紅細胞沉積于管底;1+:紅細胞沉積于管底,周圍有散在少量凝集;2+:紅細胞形成片層凝集,面積較小,邊緣較松散;3+:紅細胞形成片層凝集,面積多于2+;4+:紅細胞形成片層凝集,均勻布滿孔底,或邊緣皺縮如花邊狀。
2.膠乳凝集試驗:膠乳凝集試驗也是一種間接凝集試驗,所用載體為聚苯乙烯膠乳,是一種直徑約為0.8μm大小的圓形顆粒,帶有負電荷,可物理性吸附蛋白分子,但這種結(jié)合牢固性差。膠乳凝集試驗分試管法和玻片法兩種。膠乳凝集試驗用于檢測抗溶血素O、RF等。
3.明膠凝集試驗:將全病毒抗原及重組抗原吸附在粉紅色醫(yī)學教育網(wǎng)整理明膠顆粒上,來檢測相應抗體。
間接凝集反應具有快速、敏感、操作簡便、無需特殊的實驗設(shè)備等特點,而且能用于抗原或抗體的測定,因此在臨床檢驗中廣為應用。
(1)抗原的檢測:反向間接凝集試驗用于檢測病原體可溶性抗原,也可用于檢測各種蛋白質(zhì)成分。
?。?)抗體的檢測:可用于檢測細菌、病毒和寄生蟲等感染后產(chǎn)生的醫(yī)學教育網(wǎng)整理抗體,例如間接凝集試驗或明膠顆粒凝集試驗用于檢測抗人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體以診斷艾滋病、乳膠凝集試驗用于檢測抗溶血素O等。