24小時(shí)客服電話:010-82311666
APP下載
掃一掃,立即下載
醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)APP下載

開(kāi)發(fā)者:北京正保醫(yī)教科技有限公司

蘋(píng)果版本:8.6.4

安卓版本:8.6.4

應(yīng)用涉及權(quán)限:查看權(quán)限 >

APP:隱私政策:查看政策 >

正保醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)衛(wèi)生資格_微信公眾號(hào)
微信公眾號(hào)
熱門(mén)資訊,實(shí)時(shí)推送
med66_weisheng
正保醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)衛(wèi)生資格_微信視頻號(hào)
官方視頻號(hào)
免費(fèi)直播,訂閱提醒
微信掃碼即可關(guān)注
正保醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)衛(wèi)生資格考試知指導(dǎo)老師
考試指導(dǎo)老師
備考規(guī)劃,專屬指導(dǎo)
微信掃碼添加老師
正保醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)_官方抖音號(hào)
官方抖音號(hào)
分享更多醫(yī)考日常
抖音掃一掃關(guān)注
當(dāng)前位置:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng) > 臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)職稱 > 免疫檢驗(yàn)
招生方案

抗核抗體的檢測(cè)方法

2009-10-13 14:17 來(lái)源:
打印
字體:

  由于抗核抗體(ANA)的復(fù)雜性及多樣性,故測(cè)定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫熒光法、放射免疫法、ELISA、免疫雙擴(kuò)散、對(duì)流免疫電泳及免疫印跡技術(shù)等。

  常用間接免疫熒光法(indirect immunofluorescence,IIF)作為總的ANA篩選試驗(yàn)。鼠肝常用于檢測(cè)抗核抗體,但近十年來(lái)多被HEp-2細(xì)胞所代替,這是因?yàn)镠Ep-2細(xì)胞具有以下特點(diǎn):人源性;細(xì)胞核大;分裂期細(xì)胞多;可大批量培養(yǎng)。當(dāng)然,單個(gè)細(xì)胞不可能替代組織切片,所以鼠組織切片仍繼續(xù)用于自身抗體的檢測(cè)。

  放射免疫法:常用于檢測(cè)抗DNA抗體,有Farr法及過(guò)濾法。

 ?。?)Farr法的原理為用同位素標(biāo)記DNA,被標(biāo)記的DNA和被檢血清的抗DNA抗體結(jié)合,經(jīng)50%硫酸銨飽和液沉淀,然后比較沉淀物和上清液中的放射活性,從而得出DNA結(jié)合活性,一般結(jié)合率大于20%為陽(yáng)性。

 ?。?)過(guò)濾法是在分離結(jié)合物時(shí)用纖維素酯薄膜濾器(孔徑為0.45μm)進(jìn)行過(guò)濾,游離的DNA被濾去而與抗體結(jié)合的復(fù)合物被阻留在濾膜上。

  ELISA法:臨床上主要是應(yīng)用間接ELISA檢測(cè)抗dsDNA抗體,其重復(fù)性及敏感性均較對(duì)流免疫電泳及雙擴(kuò)散為高。目前已有試劑盒供應(yīng)。

  免疫印跡(immunoblotting)法:先將混合抗原作凝膠電泳,分離開(kāi)不同的區(qū)帶,然后將這些帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上,最后用酶標(biāo)抗體或放射性同位素標(biāo)記抗體進(jìn)行檢測(cè)和分析。由于該試驗(yàn)不需純化的單個(gè)抗原,可在同一固相上作多項(xiàng)分析檢測(cè),靈敏度高,特異性強(qiáng)。故目前已廣泛用于自身免疫病患者血清中多種自身抗體的檢測(cè),如檢測(cè)抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SS-A抗體及SS-B抗體等。

  另外,還可用傳統(tǒng)的瓊脂雙向擴(kuò)散法、醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理對(duì)流免疫電泳法、間接血凝法和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)等。這些試驗(yàn)要求的實(shí)驗(yàn)條件比較低,但敏感性也比較低。

檢驗(yàn)職稱題庫(kù)

相關(guān)資訊
折疊