四種類型超敏反應(yīng)發(fā)生的機(jī)制不同，同一抗原也可在不同條件下引起不同類型的超敏反應(yīng)。四種類型超敏反應(yīng)的免疫檢測方法有所不同。Ⅰ型超敏反應(yīng)主要檢測過敏原和測定血清特異性IgE.Ⅱ型超敏反應(yīng)的檢測重點(diǎn)是抗血細(xì)胞抗體。Ⅲ型超敏反應(yīng)主要檢測循環(huán)免疫復(fù)合物。Ⅳ型超敏反應(yīng)可用皮膚試驗(yàn)來檢測。

　　一、過敏原皮膚試驗(yàn)

　　皮膚試驗(yàn)簡稱皮試，是在皮膚上進(jìn)行的體內(nèi)免疫學(xué)試驗(yàn)。當(dāng)試驗(yàn)抗原進(jìn)入致敏者皮膚時(shí)，皮膚中結(jié)合有IgE的肥大細(xì)胞或致敏T細(xì)胞就會與試驗(yàn)抗原結(jié)合，引發(fā)即刻型或遲發(fā)型的皮膚超敏反應(yīng)。試驗(yàn)抗原也可從注射部位進(jìn)入微血管，與循環(huán)中的相應(yīng)抗體結(jié)合，形成的免疫復(fù)合物可在局部沉積，激活補(bǔ)體引起炎癥。所以皮膚試驗(yàn)主要用于檢測Ⅰ型和Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)，有時(shí)也用于檢測Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

　?。ㄒ唬┰囼?yàn)準(zhǔn)備

　　首先應(yīng)當(dāng)制備試驗(yàn)用抗原，如有合格商品可直接購買?？梢宰鳛樽儜?yīng)原的物質(zhì)種類繁多，例如動(dòng)物皮毛、家禽羽毛、鴿糞、昆蟲、螨類、真菌、花粉、雜草、物理粉塵和各種食品等都可能成為變應(yīng)原。

　　不同抗原的制備方法不同，但一般包括以下幾個(gè)步驟：①收集原料；②粉碎與勻漿；③脫脂與提??；④過濾與分離；⑤分裝保存。分裝保存之前應(yīng)對提取產(chǎn)物進(jìn)行鑒定。首先必須經(jīng)過無菌試驗(yàn)、急性毒性試驗(yàn)和熱原檢查，保證提取產(chǎn)物無明顯的毒副作用；還要測定產(chǎn)物的蛋白含量，用凱氏定氮法或磷鎢酸沉淀法標(biāo)定出總氮單位或蛋白氮單位。

　　試驗(yàn)部位應(yīng)清洗干凈，嚴(yán)格消毒，以免皮膚的不潔物引起非特異性反應(yīng)或感染。當(dāng)皮膚患濕疹、感染、皮炎或外傷時(shí)不宜進(jìn)行皮膚試驗(yàn)。正在或近日服用免疫抑制劑或抗組胺藥物者也不宜進(jìn)行皮膚試驗(yàn)。

　?。ǘ┰囼?yàn)類型及方法

　　皮膚試驗(yàn)的最常用部位是前臂屈側(cè)，因此處皮膚較為光滑細(xì)膩，而且便于試驗(yàn)操作和結(jié)果觀察。按正規(guī)作法，左右兩臂一側(cè)作試驗(yàn)，另一側(cè)作對照。需要時(shí)也可選用上臂或背部皮膚。具體試驗(yàn)方法可分為皮內(nèi)試驗(yàn)、挑刺試驗(yàn)和斑貼試驗(yàn)。

　　1.皮內(nèi)試驗(yàn)：將試驗(yàn)抗原與對照液各0.0l～0.03ml用皮試針頭分別注入皮內(nèi)（不是皮下），使局部產(chǎn)生一個(gè)圓形小丘。當(dāng)同時(shí)試驗(yàn)多種抗原時(shí)，相互間至少間隔2.5～5cm，以免強(qiáng)烈反應(yīng)時(shí)互相混淆結(jié)果。

　　皮內(nèi)試驗(yàn)的敏感性比其他皮膚試驗(yàn)高，所用抗原應(yīng)適當(dāng)稀釋，以免出現(xiàn)嚴(yán)重反應(yīng)；當(dāng)高可疑性抗原出現(xiàn)陰性結(jié)果時(shí)，應(yīng)逐漸加大抗原濃度進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。

　　皮內(nèi)試驗(yàn)是最常用的皮膚試驗(yàn)。應(yīng)用范圍也很廣，幾乎各類抗原及各型反應(yīng)都可用皮內(nèi)試驗(yàn)進(jìn)行測定，只是不同類型的反應(yīng)觀察結(jié)果的時(shí)間和判定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)有所不同。

　　2.挑刺試驗(yàn)：也稱點(diǎn)刺試驗(yàn)或刺痕試驗(yàn)。將試驗(yàn)抗原與對照液分別滴于試驗(yàn)部位皮膚上，用針尖透過液滴或在皮膚上輕輕地挑刺一下，以刺破皮膚但以不出血為度；1min后拭（吸）去抗原溶液。同時(shí)試驗(yàn)多種抗原時(shí)，千萬注意不要將不同的抗原液交叉混合，以免出現(xiàn)假陽性。

　　挑刺試驗(yàn)主要用于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，該法雖比皮內(nèi)試驗(yàn)法敏感性稍低，但假陽性較少，與臨床及其他試驗(yàn)的相關(guān)性較強(qiáng)。

　　劃痕試驗(yàn)是挑刺試驗(yàn)的一個(gè)變型，用三棱針或注射器針頭在皮膚劃一條或多條約lcm長的創(chuàng)痕。因?yàn)閯澓鄣妮p重與長短難于掌握一致，故不常用。

　　3.斑貼試驗(yàn)：將試驗(yàn)抗原直接貼敷于皮膚表面的方法。主要用于尋找接觸性皮炎過敏原。試驗(yàn)抗原為軟膏時(shí)可直接涂沫在皮膚上；如為固體物時(shí)可用蒸餾水混合或浸濕后涂敷于皮上；如為水溶液則浸濕紗布后敷貼于皮膚上。所用抗原濃度以不刺激皮膚為原則，涂敷范圍以0.5～1cm為宜。涂敷后蓋以油紙或玻璃紙，用紗布或繃帶固定；如有明顯不適感可隨時(shí)打開查看，并進(jìn)行適當(dāng)處理。斑貼試驗(yàn)主要是檢測Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)，敏感程度雖然不太高，但假陽性較少，結(jié)果的可信度大。

　　（三）結(jié)果判定及分析

　　1.Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)在抗原刺激后20～30min內(nèi)觀察結(jié)果。挑刺試驗(yàn)的陽性反應(yīng)以紅暈為主，皮內(nèi)試驗(yàn)的陽性反應(yīng)則以風(fēng)團(tuán)為主，判定標(biāo)準(zhǔn)見有關(guān)文獻(xiàn)。

　　2.IV型變態(tài)反應(yīng)在接觸抗原后24～72h內(nèi)觀察結(jié)果。皮內(nèi)試驗(yàn)的陽性結(jié)果以紅腫和硬結(jié)為主，斑貼試驗(yàn)的陽性結(jié)果以紅腫和水皰為主。判定標(biāo)準(zhǔn)見有關(guān)文獻(xiàn)。有時(shí)候，機(jī)體對某變應(yīng)原可能同時(shí)存在多種類型的反應(yīng)。例如在做青霉素皮內(nèi)試驗(yàn)時(shí)，30min內(nèi)觀察呈陰性反應(yīng)，但在5～8h可能會出現(xiàn)Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)，反應(yīng)的外觀現(xiàn)象介于Ⅰ型與Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)之間；甚至還可能出現(xiàn)型變態(tài)反應(yīng)。

　　3.假性結(jié)果：在一定條件下，皮膚反應(yīng)的結(jié)果可能與機(jī)體的實(shí)際情況不符，即出現(xiàn)假陽性或假陰性等不真實(shí)的結(jié)果。

　　出現(xiàn)假陰性的常見原因有：①試驗(yàn)抗原的濃度過低，或者因各種原因失效；②試驗(yàn)時(shí)正確服用免疫抑制劑或抗組胺藥物（后者可通過設(shè)立組胺陽性對照而判斷出來）；③操作誤差，例如皮內(nèi)試驗(yàn)時(shí)注射過深進(jìn)入皮下，注入抗原量過少等；④皮試季節(jié)選擇不當(dāng)，例如花粉季節(jié)過后，抗花粉抗體水平可下降。

　　出現(xiàn)假陽性的常見原因有：①試驗(yàn)抗原不純，在提取、配制，甚至在試驗(yàn)過程中被其他抗原污染，引起交叉反應(yīng)；②試驗(yàn)溶液配制不當(dāng)，過酸或過堿都會對皮膚產(chǎn)生非特異性刺激；③皮膚反應(yīng)性過強(qiáng)，例如被試者患有皮膚劃痕癥，或者有既往過敏的痕跡等；④操作不當(dāng)，例如注入少量空氣也可出現(xiàn)假陽性。

　　（四）應(yīng)用與評價(jià)

　　皮膚試驗(yàn)屬于活體試驗(yàn)，雖然影響因素眾多，卻能反應(yīng)機(jī)體各種因素綜合作用的實(shí)際免疫狀態(tài)；并且簡單易行，結(jié)果的可信度大；這些優(yōu)點(diǎn)是其他方法難以替代的，所以在臨床和防疫工作中都經(jīng)常應(yīng)用。

　　1.尋找變應(yīng)原：變態(tài)反應(yīng)防治的重要原則之一是回避變應(yīng)原，而回避的前提是明確變應(yīng)原。確定變應(yīng)原的常用方法是各種類型的皮膚試驗(yàn)。例如支氣管哮喘和蕁麻疹等均可用皮膚試驗(yàn)來幫助診斷。但食物過敏與皮膚試驗(yàn)的相關(guān)性較差，這可能是因?yàn)槭澄锏目乖崛∫号c腸吸收的物質(zhì)有所不同，或食物過敏并非IgE所介導(dǎo)；而且食物過敏的變應(yīng)原容易發(fā)現(xiàn)，一般不必作皮膚試驗(yàn)。

　　2.對患者首次注射某批號的青霉素、鏈霉素預(yù)防藥物或疫苗過敏或其他易過敏藥物之前，必須做過敏試驗(yàn)；如果患者呈陽性反應(yīng)（即使是可疑陽性），就應(yīng)更換其他抗生素。注射異種抗血清（例如抗破傷風(fēng)血清和抗狂犬病血清）前也必須做過敏試驗(yàn)，如果呈陽性反應(yīng)就需要換用精制抗體；或進(jìn)行脫敏治療（少量多次注射，使抗原逐漸中和血液中的抗體）。

　　3.評價(jià)宿主細(xì)胞免疫狀態(tài)：在可疑免疫缺陷病、腫瘤或器官移植時(shí)，了解患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)對疾病診斷和預(yù)后判斷都有重要意義。這種情況下可以使用共用抗原結(jié)核菌素（OT或PPD）或雙鏈酶（SD-SK）進(jìn)行皮膚試驗(yàn)；或使用人工合成的二硝基氯苯（DNCB）或二硝基氟苯（DNFB）等先進(jìn)行致敏再作皮膚試驗(yàn)，這樣可消除抗原接觸史不同所致的誤差醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

　　4.傳染病的診斷：對某些可疑的傳染病，用某種病原體的特異性抗原進(jìn)行皮膚試驗(yàn)可以起到診斷或鑒別診斷的作用。例如對布氏菌病和軟下疳等細(xì)菌感染、對某些病毒感染和真菌感染、以及某些寄生蟲感染均有一定的意義。

　　另外，還有一些反應(yīng)機(jī)制不同于變態(tài)反應(yīng)的中和性皮膚試驗(yàn)，例如診斷白喉的錫克試驗(yàn)和診斷猩紅熱的狄克（Dick）試驗(yàn)等。

　　二、血清lgE的檢測

　　IgE是介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的抗體，因此檢測血清總IgE和特異性IgE對Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的診斷和過敏原的確定很有價(jià)值。

　?。ㄒ唬┭蹇侷gE的測定

　　正常情況下血清IgE僅在ng／ml水平，用常規(guī)測定IgG或IgM的凝膠擴(kuò)散法檢測不出IgE，必須用高度敏感的放射免疫測定法及酶聯(lián)免疫測定法和化學(xué)發(fā)光法等進(jìn)行檢測。

　　1.放射免疫吸附試驗(yàn)（IRST）：是將抗IgE吸附到固相載體上用以檢測血清IgE的方法，故又稱固相放射免疫測定（SPRIA）。臨床常用雙抗體夾心法，多以濾紙為載體。將抗IgE抗體偶聯(lián)到經(jīng)溴化氰活化的濾紙上，使其與待檢血清及IgE參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行反應(yīng)；洗滌后加入125I標(biāo)記的抗人IgE，再經(jīng)洗滌后測定濾紙片的放射活性，其測定值與標(biāo)本中的IgE含量呈正相關(guān)。

　　2.酶聯(lián)免疫測定法：測定血清IgE時(shí)也常用雙抗體夾心ELISA法，操作方便，敏感性也很高，在臨床上經(jīng)常應(yīng)用。

　　3.間接血凝試驗(yàn)：用抗IgE致敏紅細(xì)胞，將標(biāo)本血清做系列稀釋后與致敏紅細(xì)胞反應(yīng)。此法更加簡便易行，便于普及，但敏感性比上兩法稍低。

　　4.化學(xué)發(fā)光法：用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記抗IgE，與血清中的IgE反應(yīng)后，通過化學(xué)發(fā)光分析，計(jì)算出IgE含量。此法敏感性特異性均較好。

　　（二）特異性IgE的測定

　　過敏患者的血清中存在著具有變應(yīng)原特異性的IgE稱之為特異性IgE，如對牛奶過敏者則有針對牛奶變應(yīng)原的IgE；對蒿草花粉過敏者，則有針對該花粉的IgE，該抗體只能與該變應(yīng)原特異性結(jié)合。因此需要用純化的變應(yīng)原代替抗IgE進(jìn)行檢測。

　　sIgE檢測方法有許多種，目前臨床上常用的有ELISA，F(xiàn)EIA，免疫印跡等。隨著sIgE測定技術(shù)的完善，此項(xiàng)測定已日趨商品化，開發(fā)了各種檢測系統(tǒng)，如CAP過敏原檢測系統(tǒng)，Master過敏原檢測系統(tǒng)，Px過敏原檢測系統(tǒng)等，這些測定系統(tǒng)包括了儀器、試劑、計(jì)算機(jī)軟件處理系統(tǒng)。國內(nèi)目前應(yīng)用最多的是CAP檢測系統(tǒng)。

　　1.放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)（RAST）：將純化的變應(yīng)原與固相載體結(jié)合，加入待檢血清及參考對照，再與同位素標(biāo)記的抗IgE抗體反應(yīng)，然后測定固相的放射活性，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出待檢血清中特異性IgE的含量，或在標(biāo)本放射活性高于正常人均數(shù)加3s時(shí)判為陽性。

　　2.酶聯(lián)免疫測定法試驗(yàn)：原理及步驟基本同RAST，僅是最后加入酶標(biāo)記的抗IgE，利用酶底物進(jìn)行顯色。測定結(jié)果的表示也與RAST相同。

　　3.CAP檢測系統(tǒng)：CAP，一個(gè)很小的塑料帽狀物，其內(nèi)置有多孔性、彈性和親水性的纖維素粒，此粒多孔，吸咐了更多的變應(yīng)原，加人血清，血清中的sIgE就會和變應(yīng)原結(jié)合，再加入酶標(biāo)抗人IgE，再加入熒光顯色系統(tǒng)，在熒光分光光度計(jì)上測定熒光強(qiáng)度，計(jì)算機(jī)提供相應(yīng)軟件，自動(dòng)計(jì)算出結(jié)果。報(bào)告sIgE含量。

　　（三）臨床意義

　　1.血清總IgE：血清總IgE水平一般用國際單位（IU）或ng表示，1IU=2.4ng，相當(dāng)于WH0標(biāo)準(zhǔn)凍干血清制劑0.00928mg內(nèi)所含的IgE量。正常人群IgE水平受環(huán)境、種族、遺傳、年齡、檢測方法及取樣標(biāo)準(zhǔn)等因素的影響，以致各家報(bào)道的正常值相差甚遠(yuǎn)。嬰兒臍帶血IgE水平小于0.5IU／ml，出生后隨年齡增長而逐漸升高，12歲時(shí)達(dá)成人水平。成人血清IgE水平約在20～200IU／ml之間，一般認(rèn)為大于333IU／ml（800ng／ml）時(shí)為異常升高。

　　與IgE升高相關(guān)的常見疾病有：過敏性哮喘、季節(jié)性過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、藥物性間質(zhì)性肺炎、支氣管肺曲菌病、麻風(fēng)、類天皰瘡及某些寄生蟲感染等。上述疾病時(shí)IgE升高的程度并不一致，在過敏性支氣管肺曲菌病時(shí)最為顯著，其值可達(dá)5000～20000ng／ml，除了此病和特應(yīng)性皮炎以及在花粉季節(jié)之外，任何血清總IgE水平大于5000ng／ml的患者均應(yīng)考慮寄生蟲感染的可能性。

　　2.特異性IgE：slgE測定是體外檢測變應(yīng)原的重要手段。主要用于Ⅰ型超敏反應(yīng)的診斷。其試驗(yàn)的靈敏度及特異性都很高、特別是對花粉、螨類、寵物皮屑、牛奶、雞蛋、堅(jiān)果等變應(yīng)原的sIgE測定，靈敏度和特異性都在90%以上，有的甚至接近l00%.根據(jù)sIgE含量可確定患者變應(yīng)原種類，可評價(jià)患者過敏狀態(tài)，脫敏治療的療效，對哮喘的診斷和鑒別診斷有重要幫助。

　　RAST（放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)）是目前公認(rèn)的檢測Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的有效方法之一，具有特異性強(qiáng)、敏感性高、影響因素少、對患者絕對安全等優(yōu)點(diǎn)；不但有助于過敏性哮喘的診斷，對尋找變應(yīng)原也有重要價(jià)值。RAST與皮膚試驗(yàn)和支氣管激發(fā)試驗(yàn)的符合率在80%左右，但不能完全代替后兩種試驗(yàn)，因?yàn)榛铙w試驗(yàn)還能反映嗜堿性粒細(xì)胞和靶細(xì)胞的反應(yīng)性。

　　但是RAST也有許多缺點(diǎn)：費(fèi)用昂貴、花費(fèi)時(shí)間長、放射性同位素易過期而且污染環(huán)境、不同來源試劑盒的參比血清不同而不易相互比較、待檢血清含有相同特異性IgG時(shí)可干擾正常結(jié)果。目前國內(nèi)應(yīng)用較少。

　　因此一般只在下列情況下才做RAST：①皮試結(jié)果難以肯定，但需提供進(jìn)一步的診斷證據(jù)者；②不適宜做皮試或激發(fā)試驗(yàn)者，例如老年、幼兒、妊娠婦女、患有皮膚病、對變應(yīng)原有嚴(yán)重過敏史或正服用抗過敏藥物以及重病者；③觀察脫敏治療效果或研究變態(tài)反應(yīng)機(jī)制。

　　ELISA法與RAST有相似的優(yōu)點(diǎn)，而且還有獨(dú)特的長處，如沒有同位素污染、酶標(biāo)抗體可長期保存，因此在國內(nèi)應(yīng)用較多。用ELISA測試屋塵和一些花粉的結(jié)果與RAST符合率較高，且與臨床也較符合，但與皮膚試驗(yàn)的符合率可能不夠理想。

　　CAP吸咐變應(yīng)原有單價(jià)，有多價(jià)，如多價(jià)霉菌，多價(jià)食物（Fx5E，含6種食物過敏原），多價(jià)羽毛等，多價(jià)變應(yīng)原陽性后，再進(jìn)一步確定單個(gè)變應(yīng)原成分。目前國內(nèi)應(yīng)用較多醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

　　三、抗血細(xì)胞抗體的檢測

　　血細(xì)胞抗體是Ⅱ型變態(tài)反應(yīng)的主要介質(zhì)，檢測抗血細(xì)胞抗體對Ⅱ型變態(tài)反應(yīng)的診斷有重要的意義，具體方法和臨床分析參見臨床血液學(xué)和臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)以及凝集反應(yīng)等有關(guān)章節(jié)。主要包括Rh抗體檢測、抗紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞等。

　　四、循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測

　　Ⅲ型超敏反應(yīng)的發(fā)生主要是由循環(huán)免疫復(fù)合物（CIC）引起，通過檢測CIC可以證實(shí)某些疾病是否與Ⅲ型超敏反應(yīng)有關(guān)，也可幫助分析判斷疾病的進(jìn)程及轉(zhuǎn)歸醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

　?。ㄒ唬┛乖禺愋悦庖邚?fù)合物的檢測

　　抗原特異性免疫復(fù)合物的檢測是通過檢測免疫復(fù)合物中抗原特異性來檢測CIC.優(yōu)點(diǎn)是特異性高，通過檢測可以了解引起免疫復(fù)合物病的抗原。但在大多數(shù)情況下，免疫復(fù)合物中的抗原性質(zhì)不太清楚或非常復(fù)雜，所以抗原特異性方法并不常用。

　?。ǘ┛乖翘禺愋悦庖邚?fù)合物的檢測

　　抗原非特異性免疫復(fù)合物的檢測僅是檢測血清中循環(huán)免疫復(fù)合物，方法很多。

　?。ㄈ┡R床意義

　　判定免疫復(fù)合物為發(fā)病機(jī)制的證據(jù)有三：①病變局部有IC沉積；②CIC水平顯著升高；③明確IC中的抗原性質(zhì)。第三條證據(jù)有時(shí)很難查到，但至少要具備前兩條，單獨(dú)CIC的測定不足為憑。人體在健康狀態(tài)下也存在少量的CIC（大約l0～20μg／ml），其生理與病理的界限不易區(qū)分。另外，CIC檢測的方法太多，其原理各不相同，用一種方法測定為陽性，另一種方法檢測可能為陰性；但與免疫組化法一起檢測，其意義就大得多。

　　目前已經(jīng)明確系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、部分腎小球腎炎和血管炎等疾病為免疫復(fù)合物病，CIC檢測對這些疾病仍是一種輔助診斷指標(biāo)，對判斷疾病活動(dòng)和治療效果也有一定意義。在發(fā)現(xiàn)紫癜、關(guān)節(jié)痛、蛋白尿、血管炎和漿膜炎等情況時(shí)，可考慮免疫復(fù)合物病的可能性，進(jìn)行CIC和組織沉積IC的檢測。另外，患有惡性腫瘤時(shí)CIC檢出率也增高，但不出現(xiàn)Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)的損傷癥狀，稱之為臨床隱匿的IC病，然而這種狀態(tài)常與腫瘤的病情和預(yù)后相關(guān)。

　　五、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)

　?。ㄒ唬┦人嵝粤＜?xì)胞計(jì)數(shù)

　　嗜酸性粒細(xì)胞參與Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，因此嗜酸性粒細(xì)胞增多可作為Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的輔助診斷指標(biāo)，而且可作為療效判定的指標(biāo)之一。

　　嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)可用白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)法，也可以用直接計(jì)數(shù)法，目前多采用后者。該類細(xì)胞的胞漿顆粒中富含堿性氨基酸和堿性蛋白，其等電點(diǎn)為pH11，因此呈嗜酸性，易與陰離子結(jié)合而被染色。常用的染色液含伊紅、石炭酸和福爾馬林，該溶液可溶解紅細(xì)胞和其他白細(xì)胞，增加背景的清晰度，使嗜酸性粒細(xì)胞易于識別醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

　?。ǘ┦葔A性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)

　　嗜堿性粒細(xì)胞亦參與Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，其計(jì)數(shù)方法主要是直接計(jì)數(shù)法。嗜堿性粒細(xì)胞胞漿顆粒中肝素的硫酸根容易與陽離子染料結(jié)合而著色，現(xiàn)在常用的酸性染色液包括0.1íTA、阿利新藍(lán)、氯代十六烷基吡啶和氯化鑭等。該染液能使紅細(xì)胞和其他白細(xì)胞溶解，使嗜酸性粒細(xì)胞易于區(qū)別。外周血嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)大于33／μl判為增高，大于50／μl為顯著增高。本試驗(yàn)可作為Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的篩選試驗(yàn)，陽性率可達(dá)60%～70%；而且可作為療效考查的輔助指標(biāo)。