血凝試驗(yàn)（hemagglutinationtest）是紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)的簡稱。間接血凝試驗(yàn)是以紅細(xì)胞作為載體的間接凝集試驗(yàn)，在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用廣泛，以下簡述其操作過程。

（一）載體

紅細(xì)胞是大小均一的載體顆粒，最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細(xì)胞及O型人紅細(xì)胞。新鮮紅細(xì)胞能吸附多糖類抗原，但吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力較差。致敏的新鮮紅細(xì)胞保存時間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用2～3天。為此一般在致敏前先將紅細(xì)胞醛化，可長期保存而不溶血。常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅細(xì)胞經(jīng)醛化后體積略有增大，兩面突起呈圓盤狀。

醛化紅細(xì)胞具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力，血凝反應(yīng)的效果基本上與新鮮紅細(xì)胞相似。如用兩種不同醛類處理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸處理。醛化紅細(xì)胞能耐60℃加熱，并可反復(fù)凍融不破碎，在4℃可保存3～6個月，在－20℃可保存一年以上。

（二）致敏

致敏用的抗原或抗體要求純度高，并保持良好的免疫活性。用蛋白質(zhì)致敏紅細(xì)胞的方法有直接法和間接法。直接法只須在低pH，低離子濃度下，用醛化紅細(xì)胞直接吸附即可。間接法則需用偶聯(lián)劑將蛋白質(zhì)結(jié)合到紅細(xì)胞上。常用偶聯(lián)劑為雙偶氮聯(lián)苯胺（bidiazotizedbenzidine，BDB）和氯化鉻。前者通過共價鍵，后者通過金屬陽離子靜電作用使蛋白質(zhì)與紅細(xì)胞表面結(jié)合而達(dá)到致敏的目的。