一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?

⑴了解牛奶酸度和鈣含量的檢測(cè)方法及其表示。

⑵了解配位滴定法的原理及方法。

二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1.酸度的測(cè)定

⑴實(shí)驗(yàn)原理

通過測(cè)定牛奶的酸度即可確定牛乳的新鮮程度，同時(shí)可反映出乳質(zhì)的實(shí)際狀況。

乳的酸度一般以中和100mL牛乳0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液的毫升數(shù)來表示，正常牛乳的酸度隨乳牛的品種、飼料、泌乳期的不同而略有差異，但一般均在14～18°T之間。如果牛乳放置時(shí)間過長(zhǎng)，因細(xì)菌繁殖而致使牛乳酸度降低。因此牛乳的酸度是反映乳質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。

⑵試劑及儀器

試劑：1%酚酞指示劑，0.1mol·L-1氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，pH=6.88標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液。

儀器：量筒、錐形瓶、堿式滴定管、pHS-25型酸度計(jì)。

⑶測(cè)定方法

①滴定法

量取50mL鮮乳，注入250mL錐形瓶中，用50mL中性蒸餾水稀釋，加入1%酚酞指示劑5滴，混勻。用0.1mol·L-1氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（如何標(biāo)定？）滴定，不斷搖動(dòng)，直至微紅色在1min內(nèi)不消失為止。計(jì)算酸度以100mL牛乳消耗的NaOH克數(shù)表示，或量取250mL酸牛乳，充分?jǐn)嚢杈鶆?，然后?zhǔn)確稱取此酸牛乳15～20g于250mL錐形瓶中，加入50mL熱至40℃的蒸餾水（搖勻），加0.1%酚酞指示劑3滴，用0.1mol·L-1NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴至微紅色在30s內(nèi)不消失，即為終點(diǎn)，重復(fù)三次，計(jì)算酸度（以100g酸牛奶消耗的NaOH的克數(shù)表示）。

②酸度計(jì)法

按照pH計(jì)的使用說明用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液pH=6.88定位，用蒸餾水洗凈電極，擦干。取50mL鮮牛奶放入100mL燒杯中，在酸度計(jì)上測(cè)定pH值。

2.鈣含量的測(cè)定

⑴實(shí)驗(yàn)原理

測(cè)定牛奶中的鈣采取配位滴定法，用二乙胺四乙酸二鈉鹽（EDTA）溶液滴定牛奶中的鈣。用EDTA測(cè)定鈣，一般在pH=12～13的堿性溶液中，以鈣試劑（絡(luò)藍(lán)黑R）為指示劑，計(jì)量點(diǎn)前鈣與鈣試劑形成粉紅配合物，當(dāng)用EDTA溶液滴定至計(jì)量點(diǎn)時(shí)，游離出指示劑，溶液呈現(xiàn)藍(lán)色。

滴定時(shí)Fe、Al干擾時(shí)用三乙醇胺掩蔽。

⑵試劑及儀器

試劑：EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.02mol·L-1）、NaOH（20%）、鉻藍(lán)黑R（0.5%）或MgY-EBT作指示劑。

儀器：移液管（25mL）、錐形瓶（250mL）、滴定管。

⑶實(shí)驗(yàn)步驟

⑴EDTA溶液的標(biāo)定（用標(biāo)準(zhǔn)鋅溶液標(biāo)定）

⑵鈣含量的測(cè)定

準(zhǔn)確移取牛奶試樣25.00mL三份分別加入250mL錐形瓶中，加入蒸餾水25mL，加入2mL20%NaOH溶液，搖勻、再加入10～15滴鉻藍(lán)黑R指示劑，用標(biāo)準(zhǔn)EDTA滴定至溶液由粉紅色至明顯灰藍(lán)色，即為終點(diǎn)，平行測(cè)定三次，計(jì)算牛奶中的含鈣量，以每100mL牛奶含鈣的毫克數(shù)表示。將純鮮牛奶換成高鈣牛奶，重復(fù)做三次，計(jì)算高鈣牛奶中的含鈣量。