1.中性粒細胞吞噬功能的測定
較早應(yīng)用的方法為N試驗,即中性粒細胞在殺菌過程中能量消耗劇增、耗氧量增加、糖代謝增強,致使糖代謝的中間產(chǎn)物6-磷酸葡萄糖增多醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜|集整理,并在己糖途徑中氧化脫氫,脫下的氫可被胞漿中的硝基藍四氮唑(nitroblue tetrazolium,N)所接受,使原來淡黃色的N還原成藍黑色的沉淀物,沉積在胞漿內(nèi)。試驗時取抗凝血與等體積N混合,37℃溫育一定時間后推片,經(jīng)瑞氏染色后鏡下計數(shù)百分率,正常人為10%左右,全身性細菌感染患者可見升高。此外,根據(jù)細胞的吞噬作用,將抗凝血與等量5×107/ml的菌液混合,經(jīng)37℃溫育一定時間后推片、染色,于油鏡下觀察細胞吞噬細菌的情況并計算吞噬率和吞噬指數(shù)。
吞噬率=[吞噬細菌的細胞數(shù)/中性粒細胞總數(shù)(200個)]×100%
吞噬指數(shù)=(200個粒細菌吞菌總數(shù)/200個中性粒細胞)×100%
2.大吞噬細胞的檢測
①巨噬細胞吞噬功能的檢測:巨噬細胞具有吞噬大顆粒異物的特性,因此常選用雞紅細胞、白色念珠菌、酵母菌等作為吞噬顆粒。將通過斑蟊發(fā)泡法獲得的細胞與雞紅細胞懸液于體外37℃溫育一定時間,離心后取細胞涂片染色,鏡檢計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)即可估計病人巨噬細胞的吞噬功能。
②巨噬細胞其他功能的測定:巨噬細胞具有多種胞內(nèi)和胞外酶,也可分泌一些可溶性因子,這些物質(zhì)在一定程度上可反映該細胞的功能狀態(tài)。胞內(nèi)酶通過細胞化學(xué)染色法檢測,例如最常用的酸性磷酸酶及特異性酯酶的測定。溶菌酶是巨噬細胞的一種胞外酶,其可在體外溶解細菌,若將血清與一定量細菌懸液混勻于比色杯內(nèi),經(jīng)光電比色后記錄每分鐘光密度變化百分率,與標準曲線相比即可得出標本中血清溶菌酶的含量。
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