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臨床蛋白電泳基本技術-生化檢驗

2012-10-29 17:13 來源:
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1.醋酸纖維素薄膜電泳

醋酸纖維素是指纖維素的羥基乙?;纬傻睦w維素醋酸酯,由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維薄素薄膜。它具有電滲小、分離速度快、分離清晰、血清用量少及操作簡便等優(yōu)點,現(xiàn)已廣泛用于血清蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、脂蛋白和同工酶等的分離和測定。

2.凝膠電泳

凝膠電泳根據支持介質的不同可分為淀粉膠、瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳等。瓊脂糖凝膠孔徑較大,對蛋白質一般不起分子篩作用,適用于分離同工酶及其亞型,大分子核酸等。聚丙烯酰胺凝膠具有分子篩作用,有更高的分辨率,普遍用于分離蛋白質及小分子核酸。

3.等電聚焦電泳(isoelectricfocusing,IEF)

等電點是蛋白質的一個重要性質,測定等電點的方法是在不同pH條件下測量蛋白質的電泳遷移率,然后用遷移率對pH作圖,對應于遷移率為零的pH就是蛋白質的等電點。按照蛋白質等電點不同而進行分離的電泳方法稱為蛋白質等電聚焦電泳。醫(yī)|學教育網搜集整理由于其分辨率可達到0.01pH單位,故特別適用于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。

4.毛細管電泳(capillaryelectrophoresis,CE)

毛細管電泳是八十年代初發(fā)展起來的一類高效、快速分離分析方法。同其它技術相比,毛細管電泳具有分辨率高、塔板數(shù)高、選擇性好、定量準確、所需樣品少等特點。毛細管電泳將電泳載體移到毛細管中后,克服了傳統(tǒng)電泳的熱擴散和試樣擴散的難題,大大提高了分析的靈敏度。因而它是一種比傳統(tǒng)電泳優(yōu)越得多的分離分析技術。毛細管電泳可分為毛細管區(qū)帶電泳、凝膠電泳、等速電泳、等電聚焦和膠束電動色譜等。

在生命科學中廣泛使用的是毛細管區(qū)帶電泳(capillaryzoneelectrophoresis,CZE)。毛細管區(qū)帶電泳是近年發(fā)展起來的一種高效、快速的液相分離分析技術,有分離選擇性高、檢測靈敏度高、分離快速、操作簡便和易自動化等特點,現(xiàn)已開始在臨床實驗診斷中得到逐步地應用。

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