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HLA抗體的臨床意義及檢測技術的研究進展

2012-04-09 15:03 來源:
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1 與器官移植的關系:

許多資料表明,HLA抗體可以導致針對移植物的免疫反應而發(fā)生超急排和加速性排斥反應,使移植失敗或降低移植物存活率。在器官移植中,供受雙方的HLA相容性越大,移植成功率越高。最近一項國際合作的研究結果顯示,對36個移植中心的4763例器官移植患者檢測HLA抗體,腎移植HLA抗體檢出率是20. 9%,肝移植19. 3%,心臟移植22. 8%,肺臟移植14.2%.另一項在23個腎移植中心開展的檢測HLA抗體預測移植1年內(nèi)失敗頻率的研究中, 2278例腎移植病人中有HLA抗體的移植失敗率為6. 6% ; 1778無HLA抗體的病人移植失敗率為3. 3%.結果顯示有HLA抗體移植病人的失敗率明顯高于無抗體的病人。另外HLA抗體的濃度與移植存活密切相關。M o n te iro等對124例腎移植患者隨訪發(fā)現(xiàn),術后PRA(群體反應性抗體)> 50%的患者中85%需透析,PRA 10%的患者移植腎喪失的幾率是PRA< 10%患者的3倍。國內(nèi)外研究者一致認為移植前受者體內(nèi)PRA水平的檢測對于是否發(fā)生移植排斥反應有著顯著影響 2 ,移植后受者體內(nèi)PRA水平對于移植物存活率的高低,移植轉歸以及移植后的器官功能都有著重要作用 3 .最新資料顯示HLA抗體是引起急排的始動因素,HLA-I類抗體出現(xiàn)后平均約634d移植失敗,HLA-II類抗體出現(xiàn)后平均約1503d移植失敗,病人體內(nèi)可清楚檢測到供者的特異性抗體 4 .隨著檢測HLA抗體方法的靈敏度的進一步提高,移植失敗患者體內(nèi)HLA抗體的檢出率上升到95% 5 ,幾乎所有的移植排斥均可檢測到HLA抗體。

2 與輸血的關系:

HLA抗原存在于所有的有核細胞,在淋巴細胞上的密度最高,幼稚紅細胞和血小板都帶有HLA抗原。因此在輸注全血,紅細胞懸液,粒細胞,血小板等血液成分時都有可能發(fā)生因HLA抗原型不同而引起的各類非溶血性輸血反應,影響輸血治療的效果。盡管現(xiàn)在使用了白細胞濾器,全血或紅細胞懸液輸注的非溶血性輸血反應得到有效的控制,但粒細胞和血小板的輸注依然存在問題。大多數(shù)發(fā)熱反應與多次輸入HLA不相合的白細胞,血小板有關。有資料顯示發(fā)熱反應患者的微量淋巴細胞毒反應多數(shù)呈陽性,輸血次數(shù)與陽性反應發(fā)生率呈平行關系。由于多次接受HLA不相合的白細胞,血小板,受血者血中產(chǎn)生相應的抗體,再次接受輸血時,發(fā)生抗原抗體反應,激活補體,進一步引起白細胞,血小板溶解而釋放熱源,導致發(fā)熱反應。同時由于個體間差異能激發(fā)產(chǎn)生同種抗體,也可引起發(fā)熱反應。對于血小板輸注而言,給具有HLA抗體的患者輸注血小板,抗體可與輸入的血小板反應,造成血小板輸注無效。

3 與妊娠的關系:

妊娠婦女由于母胎HLA不合或輸血免疫反應可以產(chǎn)生白細胞抗體,抗體隨著妊娠次數(shù)的增加而相應增高。這種HLA抗體屬于IgG,可以通過胎盤,使胎兒產(chǎn)生同種免疫性中性粒細胞減少癥及同種免疫性血小板減少性紫癜。現(xiàn)代免疫學認為,母胎HLA相容性越大,母體就不能識別胚胎抗原,就不能產(chǎn)生封閉抗體,胚胎得不到封閉抗體的保護而遭排斥,即產(chǎn)生病理性妊娠。有資料表明HLA抗體與病理性妊娠如流產(chǎn),不孕,妊高癥和早產(chǎn)等均有一定關系 6 .胡興等進一步證實妊高癥組HLA抗體在顯著低于對照組,尤其以HLA-II類抗體的下降更為顯著,這說明HLA抗體,尤其是HLA-II類抗體的下降或缺乏在妊高癥的發(fā)病及病情進展中有著重要的作用 7 ,國外也有類似報道

4 .HLA抗體的檢測方法

1 微量淋巴細胞毒實驗(CDC):該實驗是由美國洛杉磯加州大學的Pau l.T e ra sak i教授于1964年創(chuàng)建。主要原理是淋巴細胞具有HLA抗原,HLA抗體能結合到帶有相應抗原的淋巴細胞膜上,補體可以結合并在淋巴細胞膜上使其死亡。如果淋巴細胞不帶有相應的抗原,則無此作用。通過染色來觀察細胞是否死亡來確定相應的抗原或抗體。該方法可迅速檢測患者的HLA抗體,但需要分離細胞,抗原用量大且敏感性不高,多年來在臨床廣泛應用。

2 酶聯(lián)免疫法(EL ISA):該實驗的基本原理是將HLA抗原包被在一個孔內(nèi),將患者血清加入孔中與孔內(nèi)的HLA抗原反應,通過酶作用使其顯色,用熒光儀根據(jù)吸收光的不同來判斷結果。這種方法無需分離細胞,敏感性也有所提高,無需專門儀器設備,同時可檢出HLA-I類和HLA-II類抗體。但該方法操作繁瑣,也較費時,一次只能檢測一個指標,因此臨床應用受到一定限制。

3 流式細胞儀法(F lowCy tom e t ry)及單抗原磁珠法(L um inexTMF lowCy tom e t ry):這兩種方法的基本原理323陜西醫(yī)學雜志2005年3月第35卷第3期都是將HLA單價抗原包被在不同顏色的微磁珠表面,用被檢測血清與磁珠反應,血清中HLA特異性抗體便與包被在磁珠上的抗原結合,然后再與標記PE的二抗孵育。根據(jù)熒光強弱通過流式細胞儀檢測出與這些磁珠對應的HLA抗體。這兩種方法在酶聯(lián)免疫法的基礎上使敏感性明顯提高,排除其它非反應抗原的干擾,可準確確定HLA抗體的特異性。單抗原磁珠法(L um inexTMF lowCy tom e t ry)在普通流式細胞儀基礎上進一步改進,并通過分析軟件的更新,對于較弱的反應抗體也能準確檢出。

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