T、B與其他免疫細(xì)胞的純化:
經(jīng)密度梯度離心法獲得的單個(gè)核細(xì)胞是不均一的細(xì)胞群,還可根據(jù)各種細(xì)胞的生物學(xué)特性、表面標(biāo)記等進(jìn)一步純化。例如單核細(xì)胞等具有粘附和吞噬作用,可用玻璃或塑料容器的粘壁法和吞噬羰基鐵顆粒的磁鐵吸引法除去或獲得。綿羊紅細(xì)胞能與人T細(xì)胞形成E花環(huán),藉此可通過花環(huán)沉降法分離T與B淋巴細(xì)胞。此外,利用B細(xì)胞具有易粘附于尼龍纖維表面的特性,也可將T和B細(xì)胞分開。
為了進(jìn)一步除去細(xì)胞懸液中個(gè)別細(xì)胞群T、B與其他免疫細(xì)胞的純化,尚可將相應(yīng)的單抗結(jié)合于塑料板上,利用親和層析的原理作親和板粘附法,或在細(xì)胞懸液中加入單抗和補(bǔ)體,以特異性地破壞相應(yīng)細(xì)胞,使獲得的細(xì)胞懸液更加均一。
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