單克隆抗體的制備原理是什么：

最常用的單克隆抗體是小鼠的單抗醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集|整理，此外也有大鼠的和人源的單抗。人源單抗制備比較復(fù)雜。小鼠單抗的制備通常是使用Balb/c小鼠的B細(xì)胞和它的骨髓瘤細(xì)胞。大鼠的單抗制備通常用Lou/c大鼠及其骨髓瘤和Y3/AO大鼠及其骨髓瘤細(xì)胞。B細(xì)胞是從免疫動(dòng)物的脾臟中分離出來的。動(dòng)物免疫方法與抗血清制備相同，只是在制備脾臟前3d必須進(jìn)行一次靜脈加強(qiáng)注射以保證得到的B細(xì)胞有旺盛的分泌抗體的活性。骨髓瘤細(xì)胞有許多細(xì)胞株是經(jīng)過誘變和篩選得到的缺陷型。篩選的標(biāo)準(zhǔn)是①瘤細(xì)胞本身不產(chǎn)生抗體或者產(chǎn)生抗體的某種鏈，醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理但不能分泌；②是次黃嘌呤鳥嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶激酶（TK）的缺陷型。因?yàn)檫@種缺陷型的瘤細(xì)胞正常的核酸合成途徑被氨基喋吟（aminopterin）阻斷后，由于缺失這些酶，即使補(bǔ)充它的底物次黃嘌呤（H）和胸腺嘧啶（T），核酸合成的旁路也不能起到救援的作用，結(jié)果導(dǎo)致瘤細(xì)胞死亡。而雜交瘤細(xì)胞因帶有B細(xì)胞的全套基因，在HAT存在的條件下借助于HGPRT和TK的作用通過替代的核酸合成途徑能正常合成DNA和RNA.所以雜交瘤能正常地生長繁殖而被選擇出來。未被融合的游離的B細(xì)胞只能存活3d而后自行死亡。這就是用HAT培養(yǎng)基進(jìn)行選擇的原理。