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招生方案

纖溶活性測定

2020-02-28 18:30 來源:醫(yī)學教育網(wǎng)
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檢驗師考點:纖溶活性測定,快來跟著小編了解一下吧!

1.凝血酶時間(thrombin time,TT)及甲苯胺藍糾正試驗

(1)原理:受檢血漿中加入“標準化”凝血酶溶液,測定開始出現(xiàn)纖維蛋白絲所需的時間。糾正試驗:甲苯胺藍可糾正肝素的抗凝作用,在TT延長的血漿中加入少量的甲苯胺藍,若延長的TT明顯恢復(fù)正常和縮短,表示受檢血漿中肝素或類肝素樣物質(zhì)增多,否則為其他類抗凝物或是纖維蛋白原異常。

(2)臨床意義:受檢TT值延長超過正常對照3秒為延長,見于低(無)纖維蛋白原血癥;血中FDP增高(DIC);血中有肝素和類肝素物質(zhì)存在(如肝素治療中、SLE和肝臟疾病等)。

2.血漿纖溶酶原測定

(1)血漿纖溶酶原活性(plasminogen activity,PLG:A)測定

1)原理:發(fā)色底物法,受檢血漿中加鏈激酶(SK)和發(fā)色底物(S-2251),受檢血漿中的PLG在SK的作用下,轉(zhuǎn)變成PL,后者作用于發(fā)色底物,釋出對硝基苯胺(PNA)而顯色。顯色的深淺與纖溶酶的水平呈正相關(guān),通過計算求得血漿中PLG:A的含量。

2)臨床意義:增高表示纖溶活性減低,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。減低表示纖溶活性增高,見于原發(fā)性纖溶、繼發(fā)性纖溶和先天性PLG缺乏癥。PLG缺陷癥:可分為CRM+型(PLG:Ag或PLG:A減低)和CRM-型(PLG:Ag和PLG:A均減低)。此外,前置胎盤、腫瘤擴散、大手術(shù)后、肝硬化、重癥肝炎、門脈高壓、肝切除等獲得性PLG缺陷癥,也存在PLG減低。

(2)血漿纖溶酶原抗原(plasminogen antigen,PLG:Ag)測定

1)原理:ELISA法,將純化的兔抗人纖溶酶原抗體包被在酶標反應(yīng)板上,加入受檢血漿,血漿中的纖溶酶原與包被在反應(yīng)板上的抗體結(jié)合,然后加入酶標記的兔抗人纖溶酶原抗體,酶標記的抗體與結(jié)合在反應(yīng)板上的纖溶酶原結(jié)合,最后加入底物顯色,顯色的深淺與受檢血漿中纖溶酶原的含量呈正相關(guān)。從標準曲線中計算出血漿中纖溶酶原的含量。

2)臨床意義:見PLG:A測定。

3.血漿組織纖溶酶原活化劑測定

(1)血漿組織纖溶酶原活化劑活性(tissue plasminogen activator activity,t-PA:A)測定

1)原理:發(fā)色底物法。血漿優(yōu)球蛋白部分含有t-PA及全部凝血因子,但不含PAI。受檢血漿加入過量PLG和纖維蛋白的共價物,血漿中的t-PA吸附于纖維蛋白上,并使PLG轉(zhuǎn)變成PL,PL使發(fā)色底物(S-2251)釋出PNA而顯色,顯色的深淺與受檢血漿中t-PA的含量呈正相關(guān)。所測得的A值,可從標準曲線中計算出受檢血漿中t-PA:A的含量。

2)臨床意義

①增高:表明纖溶活性亢進,見于原發(fā)性纖溶癥、繼發(fā)性纖溶癥如DIC等。

②減低:表明纖溶活性減弱,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病,如動脈血栓形成、深靜脈血栓形成、高脂血癥、口服避孕藥、缺血性中風等。

(2)血漿組織纖溶酶原活化劑抗原(tissue plasminogen activator antigen,t-PA:Ag)測定

1)原理:ELISA法。將純化的抗t-PA單克隆抗體包被在酶標反應(yīng)板上,加入受檢血漿,血漿中的t-PA與包被在反應(yīng)板上的抗體結(jié)合,然后加入酶標記的t-PA抗體,酶標記的抗體與結(jié)合在反應(yīng)板上的t-PA結(jié)合,最后加入底物顯色,顯色的深淺與受檢血漿中t-PA的含量呈正相關(guān)。從標準曲線中計算出血漿中t-PA的含量。

2)臨床意義:同t-PA:A檢測。

4.血漿纖溶酶原活化抑制物測定

(1)原理:血漿纖溶酶原活化抑制物活性(plasminogen antigen inhibitor activity,PAI:A)檢測,發(fā)色底物法。

(2)臨床意義:增高見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。減低見于原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶癥。根據(jù)PAI:A和PAI:Ag的檢測結(jié)果,可將PAI-1缺陷分為CRM+型和CRM-型。

5.血漿α2纖溶酶抑制物測定

(1)原理:血漿α2纖溶酶抑制物活性(α2 plasmin inhibitor activity,α2 PI:A)檢測,發(fā)色底物法。

(2)臨床意義:增高見于靜脈和動脈血栓形成、惡性腫瘤、分娩后等。減低見于肝病、DIC、手術(shù)后、先天性α2PI缺乏癥。根據(jù)α2PI:A和α2PI:Ag檢測的結(jié)果,可將α2PI缺陷分為CRM+型和CRM-型。

6.血漿魚精蛋白副凝固(plasma protamine paracoagulation test,3P)試驗

(1)原理:受檢血漿中加入硫酸魚精蛋白溶液,如果血漿中存在可溶性纖維蛋白單體-纖維蛋白降解產(chǎn)物復(fù)合物,則魚精蛋白使其解離釋出纖維蛋白單體。纖維蛋白單體自行聚合成肉眼可見的纖維狀物,此為陽性反應(yīng)結(jié)果。

(2)結(jié)果判斷:正常人為陰性。

(3)臨床意義:陽性見于DIC的早、中期,但在惡性腫瘤、上消化道出血、外科大手術(shù)后、敗血癥、腎小球疾病、人工流產(chǎn)、分娩等也可出現(xiàn)假陽性。陰性見于正常人、晚期DIC和原發(fā)性纖溶癥。

7.血清纖維蛋白降解產(chǎn)物[fibrin(ogen)degradation products,F(xiàn)DP]測定

(1)原理:膠乳凝集法,于被檢血清中加入FDP抗體包被的膠乳顆粒懸液,當血清中FDP的濃度等于或超過5μg/ml,便與膠乳顆粒上的抗體結(jié)合,則膠乳顆粒發(fā)生凝集。根據(jù)被檢血清的稀釋度可計算出血清FDP的含量。

(2)臨床意義:血清FDP增高見于原發(fā)性纖溶癥、DIC、惡性腫瘤、急性早幼粒細胞白血病、肺栓塞、深靜脈血栓形成、腎臟疾病、肝臟疾病、器官移植的排斥反應(yīng)、溶栓治療等。

8.血漿D-二聚體(D-dimer,D-D)測定

(1)原理:膠乳凝集法,被檢血漿中加入標記D-二聚體單抗的膠乳顆粒懸液,如果血漿中D-二聚體含量大于0.5mg/L時,便與膠乳顆粒上的抗體結(jié)合,膠乳顆粒則發(fā)生凝集。根據(jù)被檢血漿的稀釋度可計算出血漿D-二聚體的含量。

(2)臨床意義:在DIC時,為陽性或增高,是診斷DIC的重要依據(jù)。高凝狀態(tài)和血栓性疾病時,血漿D-二聚體含量也增高。D-二聚體在繼發(fā)性纖溶癥為陽性或增高,而原發(fā)性纖溶癥為陰性或不升高,此是兩者鑒別的重要指標。

以上是小編為大家整理的內(nèi)容,希望對大家有所幫助,更多關(guān)于臨床檢驗技師的資訊請關(guān)注醫(yī)學教育網(wǎng)! 

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