電泳分析:醋酸纖維素薄膜電泳的特點
醋酸纖維素薄膜電泳的特點:
1.(1)醋酸纖維薄膜對蛋白質(zhì)樣品吸附極少,無“拖尾”現(xiàn)象,染色后背景能完全脫色,各種蛋白質(zhì)染色帶分離清晰,因而提高了測定的精確性。
(2)快速省時。由于醋酸纖維薄膜親水性較濾紙小,薄膜中所容納的緩沖液也較少,電滲作用小,電泳時大部分電流是由樣品傳導(dǎo)的,所以分離速度快,電泳時間短,一般電泳45—60min即可,加上染色,脫色,整個電泳完成僅需90min左右。
(3)靈敏度高,樣品用量少。 血清蛋白僅需2μl血清,甚至加樣體積少至0.1μl,僅含5μg蛋白樣品也可得到清晰的分離帶。臨床醫(yī)學(xué)檢驗利用這一點,檢測在病理情況下微量異常蛋白的改變。
(4)應(yīng)用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離,如胎兒甲種球蛋白,溶菌酶,胰島素,組蛋白等用醋酸纖維薄膜電泳能較好地分離。
(5)醋酸纖維薄膜電泳染色后,經(jīng)冰乙酸,乙醇混合液或其它溶液浸泡后可制成透明的干板,有利于掃描定量及長期保存。
2、醋酸纖維薄膜電泳與聚丙烯酰胺凝膠電泳相比,操作簡單,但分離效果不太好。如血清蛋白在醋酸纖維素薄膜電泳中,只能分離出5—6條區(qū)帶,而聚丙烯酰胺凝膠電泳可分離出數(shù)10條區(qū)帶。
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