酶活性的測(cè)定:定時(shí)法
通過測(cè)定酶反應(yīng)開始后某一時(shí)間段內(nèi)(t1到t2)產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來求取酶反應(yīng)初速度的方法。其中t1往往取反應(yīng)開始的時(shí)間。
酶與底物在一定溫度下作用一段固定的時(shí)間,通過加入強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、蛋白醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理沉淀劑等,使反應(yīng)完全停止(也叫中止反應(yīng)法)。加入試劑進(jìn)入化學(xué)反應(yīng)呈色測(cè)出底物和產(chǎn)物的變化。
該法最基本的一點(diǎn)是停止反應(yīng)后才測(cè)定底物或物的變化。
優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)單易行,對(duì)試劑要求不高。
缺點(diǎn):難保證測(cè)定結(jié)果的真實(shí)性。
難以確定反應(yīng)時(shí)間段酶促反應(yīng)是否處于線性期。隨著保溫時(shí)間的延續(xù),酶變性失活加速。
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