酶活性的定義及單位是什么呢?
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酶活性指酶催化反應的能力即酶促反應速度。
表示常用國際單位。
國際單位定義表示酶量的多少,即1min能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物(μmol)的酶量為一個國際單位(μmol/min)。
用SI制表示的酶活性單位為Katal(催量)。
每秒鐘轉(zhuǎn)化1個摩爾底物的酶量為1Katal。
常用單位為μKatal或nKatal。
國際單位和Katal間關(guān)系為:
1U=1μmol/min=16.67nmol/s=16.67nKatal
1.連續(xù)監(jiān)測法中酶活性濃度的計算
在酶反應過程中,用儀器監(jiān)測某一反應產(chǎn)物或底物濃度隨時間的變化所發(fā)生的改變,通過計算求出酶反應初速度的方法。
連續(xù)監(jiān)測法優(yōu)點之一是計算方便,不需作標準曲線或標準管,用分光光度計監(jiān)測酶反應過程時,很容易求出反應體系中每分鐘吸光度變化,根據(jù)摩爾吸光系數(shù)可求出△A(相當測定物質(zhì)變化的微摩爾數(shù))。
計算中要考慮標本的稀釋倍數(shù),還應考慮光徑不同時對△A的影響。
ε為微摩爾(線性)吸光體系
△A為吸光度變化
ν為標本體積(ml)
V為反應體系體積(ml)
L為光徑(cm)
后面幾項皆為常數(shù),叫做酶活力濃度測定轉(zhuǎn)化因子:
2.常數(shù)K值設(shè)置
在測酶時,常數(shù)K值的選擇是很重要的。
比值過高雖然測定的線性范圍較寬,但重復性差。反之,雖然精密度好,但線性窄。
K值設(shè)置的首發(fā)點應是測定酶的判斷值或參考值上限,應保證這些值測定的可靠。
3.臨床酶催化活性濃度測定的校準
由于臨床酶催化活性濃度測定受測定方法和條件的影響,國際醫(yī)學檢驗量值溯源委員會推薦了常用酶測定的參考方法。采用與儀器和試劑相配套的有溯源校準的校正測定系統(tǒng),是發(fā)展趨勢。
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