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發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)總結(jié)

2020-03-13 20:40 來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)總結(jié),跟著小編來學(xué)習(xí)一下吧!

(一)常用標(biāo)記方法 小分子物質(zhì)(如藥物、激素等)的標(biāo)記主要是通過偶聯(lián)反應(yīng)制備(直接偶聯(lián));生物大分子的標(biāo)記是利用交聯(lián)劑使標(biāo)記物與被標(biāo)記物分子結(jié)構(gòu)中游離的氨基、硫氫基、羥基等基團形成不可逆的連接(間接偶聯(lián))。

常見有:碳二亞胺縮合法;過碘酸鈉氧化法;重氮鹽偶聯(lián)法;N-羥基琥珀酰亞胺活化法。

(二)影響標(biāo)記的因素

1.發(fā)光劑的選擇。

2.被標(biāo)記蛋白質(zhì)的性質(zhì):選用較高的純度和免疫學(xué)穩(wěn)定性的抗原進行標(biāo)記;抗體作為被標(biāo)記物時,則要求具有較高的效價,應(yīng)用提純的IgG來代替全血清。

3.選擇正確的標(biāo)記方法。

4.原料比:IgG:發(fā)光劑:交聯(lián)劑的克分子比(mol: 第十一章 生物素-親和素放大技術(shù)mol:mol)會影響結(jié)合物的發(fā)光效率。

5.標(biāo)記率:結(jié)合物中IgG與發(fā)光劑之間的克分子比。

6.溫度:盡量選擇較低的溫度,以避免蛋白質(zhì)在標(biāo)記過程中活性的喪失。

7.純化與保存:通過透析法、凝膠過濾法和鹽析沉淀法等進行純化。結(jié)合物一般可分裝保存在-70℃條件下,最好冷凍干燥保存。

以上是小編為大家整理的內(nèi)容,希望對大家有所幫助,更多關(guān)于臨床檢驗技師的資訊請關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)! 

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