補體結(jié)合試驗知識點
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將免疫溶血作為指示系統(tǒng),用以檢測另一反應系統(tǒng)中抗原或抗體。該方法并非用于補體的檢測,而是利用補體的溶細胞作用進行各種物理狀態(tài)的抗原抗體測定。
一、試驗原理
包括:
①反應系統(tǒng):已知抗原(或抗體)與待測抗體(或抗原);
②補體系統(tǒng);
③指示系統(tǒng):SRBC與相應溶血素預先結(jié)合,成為致敏綿羊紅細胞。
反應分兩步進行。首先反應系統(tǒng)與補體作用;第二步:指示系統(tǒng)利用剩余補體反應。如反應系統(tǒng)中有抗體或抗原,則形成免疫復合物而固定和消耗補體,使后加入的SRBC-抗SRBS指示系統(tǒng)無多余補體可利用,則無溶血反應發(fā)生,反之亦然。不溶血為補體結(jié)合試驗陽性。
二、試驗方法
(一)試劑的準備
1.抗原或抗體
2.補體:
采用豚鼠血清為補體。
3.待測標本:
及時分離血清用于檢測或-20℃保存?zhèn)溆?。試驗前,應先將血?6℃加熱30分鐘(或60℃3分鐘)以滅活補體。
血清標本遇有抗補體現(xiàn)象時,可作下列處理:
①加熱滅活時提高12℃;
②-20℃凍融后離心去沉淀;
③以3mmol/L鹽酸處理;
④加入少量補體后再行滅活;
⑤以白陶土處理;
⑥通入CO2;
⑦以小白鼠肝粉處理;
⑧用含10%新鮮雞蛋清的生理鹽水稀釋血清。
(二)正式試驗:小量法較為常用。
三、方法評價
補體結(jié)合試驗是一經(jīng)典的免疫技術(shù),具有靈敏度高、可檢測的抗原或抗體范圍廣泛等優(yōu)點。該方法無需特殊設(shè)備,結(jié)果容易觀察,試驗條件要求不高,一般醫(yī)院均具備開展的條件。
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