熒光抗體染色與結果判斷有哪些?
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熒光抗體與抗原反應,一般在25~37℃,30分鐘,不耐熱抗原的檢測則以4℃過夜為宜。
(一)直接法
用特異熒光抗體直接滴加于標本上。本法操作簡便,特異性高,非特異熒光染色因素少;缺點是敏感度偏低,需制備特異性的熒光抗體。
(二)間接法
可用于檢測抗原和抗體,普通一抗+熒光二抗。靈敏度高,僅需一種熒光抗體。
(三)雙標記法
FITC及羅丹明分別標記不同的抗體,而對同一標本做熒光染色。
(四)熒光抗體染色結果判斷
在每次實驗時均需設立實驗對照(陽性和陰性對照)。陽性細胞的顯色分布有胞質型、胞核型和膜表面型三種類型。臨床上根據(jù)特異性熒光強度達“+”(為熒光較弱但清楚可見)以上判定為陽性。
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