薄層色譜法，系將適宜的吸附劑或載體涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開后，與適宜的對照物按同法在同板上所得的色譜圖對比，并可用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。

　　1.儀器與材料

　　（1）玻板 除另有規(guī)定外，用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

　?。?）吸附劑或載體最常用的有硅膠g、硅膠gf<[254]>、硅膠h、硅膠hf<[254]>，其次有硅藻土、硅藻土g、氧化鋁、氧化鋁g、微晶纖維素、微晶纖維素f<[254]>等。其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm.薄層涂布，除另有規(guī)定外，一般可分無黏合劑和含黏合劑兩種；前者系將吸附劑或載體用水適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻璃板上，后者系在吸附劑或載體中加入一定量的黏合劑，一般常用10％～15％煅石膏（caso4.2h2o在140℃加熱4小時），混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液（0.2％～0.5％）適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻璃板上。也有含一定改性劑如熒光劑或緩沖液等的薄層。

　?。?）涂布器 應(yīng)能使吸附劑或載體在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

　　（4）點樣器 一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點樣器材。

　　（5）展開室 可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或有雙槽，蓋子須密閉。

　　2.操作方法

　　（1）薄層板制備除另有規(guī)定外，將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布（厚度為 0.25～0.5mm），取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于 110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用?；蛴蒙唐奉A(yù)制板。

　　（2）點樣 除另有規(guī)定外，用點樣器點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。

　　點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

　?。?） 展開 將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距原點5mm為宜，密封，待展開至規(guī)定距離，除另有規(guī)定外，一般為8～15cm，取出薄層板，晾干，按正文項下的規(guī)定檢測。

　　展開缸如需預(yù)先用展開劑預(yù)平衡，可在缸中加入適量的展開劑，必要時并在壁上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，蓋嚴(yán)，使展開缸平衡或按正文規(guī)定操作。［醫(yī)學(xué)　教育網(wǎng) 搜集整理］

　?。?） 如需用薄層掃描儀對色譜進(jìn)行掃描供鑒別、檢查或含量測定，則可用薄層掃描法。

　　3.薄層掃描法系指用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜中有吸收紫外光或可見光的斑點，或經(jīng)激發(fā)后能發(fā)射出熒光的斑點進(jìn)行掃描，將掃描得到的圖譜及積分?jǐn)?shù)據(jù)用于藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定。

　　除另有規(guī)定外，薄層掃描方法可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇反射方式，采用吸收法，或熒光法，用雙波長或單波長掃描。測定方法有內(nèi)標(biāo)法及外標(biāo)法。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故薄層掃描定量測定應(yīng)在保證供試品斑點的量在校正曲線的線性范圍內(nèi)的情況下，與對照品同板點樣，展開，掃描，積分和計算。

　　用外標(biāo)法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。含量測定時，供試品溶液和對照品溶液應(yīng)交叉點于同一薄層板上，供試品點樣不得少于4個，對照品每一濃度不得少于2個，薄層掃描定量用的對照品純度應(yīng)符合含量測定用對照品的要求。